Разделы презентаций


Презентация на тему БИОТЕХНОЛОГИЯ

Презентация на тему Презентация на тему БИОТЕХНОЛОГИЯ из раздела Разное. Доклад-презентацию можно скачать по ссылке внизу страницы. Эта презентация для класса содержит 20 слайдов. Для просмотра воспользуйтесь удобным проигрывателем, если материал оказался полезным для Вас - поделитесь им с друзьями с помощью социальных кнопок и добавьте наш сайт презентаций TheSlide.ru в закладки!

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1
БИОТЕХНОЛОГИЯ	Курс лекций для студентов IV курса факультета 	биологии РГПУ им. А.И. Герцена
Текст слайда:

БИОТЕХНОЛОГИЯ



Курс лекций для студентов IV курса факультета биологии РГПУ им. А.И. Герцена
Направление 020400 Биология
Профиль Общая биология






Профессор кафедры Зоологии д.б.н., проф. Цымбаленко Надежда Васильевна


Слайд 2
БИБЛИОТЕКИ ГЕНОВ
Текст слайда:






БИБЛИОТЕКИ ГЕНОВ




Слайд 3
СОЗДАНИЕ ГЕНОМНЫХ БИБЛИОТЕКИдентификация генов, кодирующих определенные белки (структурные гены) – цель очень многих
Текст слайда:


СОЗДАНИЕ ГЕНОМНЫХ БИБЛИОТЕК
Идентификация генов, кодирующих определенные белки (структурные гены) – цель очень многих биотехнологических экспериментов.
Создание геномной библиотеки (библиотеки генов, банка клонов, банка генов)- процесс разделения геномной ДНК на клонируемые элементы и введение этих элементов в клетки-хозяева.
Полная библиотека по определению содержит весь геном данного организма.
Специфика структурной организации генов прокариот и эукариот инициирует разработку и применение различной стратегии для их клонирования.




Слайд 4
ПрокариотыУ прокариот искомая последовательность (ДНК-мишень) часто составляет минимальную часть (0,02%) суммарной хромосомной ДНК. Алгоритм:суммарную ДНК гидролизуют РЭ
Текст слайда:


Прокариоты
У прокариот искомая последовательность (ДНК-мишень) часто составляет минимальную часть (0,02%) суммарной хромосомной ДНК.
Алгоритм:
суммарную ДНК гидролизуют РЭ и каждый из полученных фрагментов встраивают в вектор
проводят поиск специфической клеточной линии (клона), которая содержит нужную последовательность
выделяют ДНК и анализируют




Слайд 5
Частичный гидролиз фрагмента ДНК       			рестриктазой типа IIОдин из способов создания библиотеки
Текст слайда:

Частичный гидролиз фрагмента ДНК рестриктазой типа II
Один из способов создания библиотеки ДНК состоит в обработке донорной ДНК рестриктазой, узнающей тетрануклеотиды, например, Sau3AI, которая вносит один разрыв примерно на 256 пар оснований. Гидролиз проводят в таких условиях, чтобы происходило лишь частичное расщепление, так что образуются фрагменты различных размеров.
Глубину гидролиза обычно контролируют изменением времени инкубации или количества фермента. Одни молекулы, представленные на рисунке, расщеплены по всем сайтам для рестриктазы (REI-сайтам), другие только по некоторым




Слайд 6
Частичный гидролиз фрагмента ДНК       			рестриктазой типа II
Текст слайда:

Частичный гидролиз фрагмента ДНК рестриктазой типа II




Слайд 7
Схема создания геномной библиотеки с помощью вектора на основе ДНК λ-фага
Текст слайда:



Схема создания геномной библиотеки с помощью вектора на основе ДНК λ-фага


Слайд 8
Следующий после создания библиотеки этап – это поиск клона (клонов), несущего искомую последовательность ДНК. Для этого используют
Текст слайда:

Следующий после создания библиотеки этап – это поиск клона (клонов), несущего искомую последовательность ДНК. Для этого используют три широко известных метода:

гибридизацию с меченым ДНК-зондом с последующей визуализацией отобранных образцов (изотопная и неизотопная)

иммунологический скрининг

скрининг по активности белка, кодируемого геном-мишенью


Слайд 9
Скрининг с помощью гибридизации (рис. 1)
Текст слайда:

Скрининг с помощью гибридизации (рис. 1)


Слайд 10
Клетки после трансформации высевают на твердую питательную среду, обеспечивающую рост только трансформированных клеток.Переносят клетки из каждой выросшей
Текст слайда:

Клетки после трансформации высевают на твердую питательную среду, обеспечивающую рост только трансформированных клеток.
Переносят клетки из каждой выросшей колонии на твердую подложку (например, нитроцеллюлозный или нейлоновый фильтр), так, чтобы их расположение соответствовало таковому на чашке.
Клетки лизируют, высвободившуюся ДНК подвергают денатурации и депротеинизации и фиксируют на фильтре.
На фильтр наносят меченый ДНК-зонд и проводят гибридизацию.
Смывают с фильтра негибридизовавшийся зонд и проводят детекцию, чтобы определить, какие клетки содержат меченый ДНК-зонд.
Идентифицируют на чашке колонии, содержащие искомую ДНК (положительный гибридизационный сигнал), отбирают из них материал и культивируют.


Слайд 11
Скрининг с помощью гибридизации (рис. 2)Процесс образования водородных связей между комплементарными полинуклеотидными цепями, в результате которого образуются
Текст слайда:


Скрининг с помощью гибридизации (рис. 2)
Процесс образования водородных связей между комплементарными полинуклеотидными цепями, в результате которого образуются гибриды ДНК-ДНК
либо ДНК-РНК, называется гибридизацией



Слайд 12
Получение меченых ДНК-зондовМеченые зонды можно получить разными способами:методом концевого мечения с помощью
Текст слайда:

Получение меченых ДНК-зондов

Меченые зонды можно получить разными способами:
методом концевого мечения с помощью полинуклеотидкиназы, осуществляющей присоединение изотопа фосфора в ﻻ-положении.
методом ник-трансляции с помощью ДНК-полимеразы I
методом случайных праймеров, который основан на применении смеси синтетических олигонуклеотидов (олигомеров), содержащих все возможные комбинации из шести нуклеотидов.
Радиоактивное мечение – один из dNTP содержит в α-положении изотоп фосфора (32 или 33). Радиоактивную метку выявляют с помощью радиоавтографии.
В качестве нерадиоактивной метки часто используют биотин, который присоединяют к одному из четырех dNTP.


Слайд 13
Текст слайда:



Слайд 14
Зонды для скрининга геномной библиотеки можно получить, по крайней мере, двумя способами:Использовать клонированную ДНК близкородственного организма (гетерологичный
Текст слайда:

Зонды для скрининга геномной библиотеки можно получить, по крайней мере, двумя способами:
Использовать клонированную ДНК близкородственного организма (гетерологичный зонд);
Зонд можно получить методом химического синтеза, основываясь на известной аминокислотной последовательности белкового продукта искомого гена.


Слайд 15
Зонды для скрининга геномной библиотеки можно получить, по крайней мере, двумя способами:Использовать клонированную ДНК близкородственного организма (гетерологичный
Текст слайда:

Зонды для скрининга геномной библиотеки можно получить, по крайней мере, двумя способами:
Использовать клонированную ДНК близкородственного организма (гетерологичный зонд);
Зонд можно получить методом химического синтеза, основываясь на известной аминокислотной последовательности белкового продукта искомого гена.


Слайд 16
Иммунологический скрининг Если клонированный ген экспрессируется, то его продукт – весь белок или часть
Текст слайда:

Иммунологический скрининг
Если клонированный ген экспрессируется, то его продукт – весь белок или часть – можно обнаружить иммунологическими методами.


Слайд 17
1.Переносят клетки из каждой выросшей колонии на твердую подложку. 2. Клетки подвергают лизису, белки фиксируют на фильтре.
Текст слайда:


1.Переносят клетки из каждой выросшей колонии на твердую подложку.
2. Клетки подвергают лизису, белки фиксируют на фильтре.
3. Наносят на фильтр первые АТ, которые связываются только с искомым белком.
4. Несвязавшиеся первые АТ удаляют, наносят на фильтр вторые АТ, специфичные в отношении первых, связанные с ферментом (например, щелочной фосфатазой).
5. Отмывают фильтр от несвязавшихся вторых АТ и наносят на фильтр бесцветный субстрат для фермента, при гидролизе которого образуется окрашенный продукт. Гидролиз может произойти только в присутствии вторых антител.
6. Отбирают колонии на чашке, соответствующие окрашенным пятнам на фильтре, и культивируют их. В них может содержаться рекомбинантная ДНК, кодирующая белок, гомологичный первым АТ


Слайд 18
Клонирование структурных генов эукариотПроблемы клонирования эукариотических генов в системе прокариот:1. Прокариоты не способны удалять интроны из первичных
Текст слайда:


Клонирование структурных генов эукариот

Проблемы клонирования эукариотических генов в системе прокариот:
1. Прокариоты не способны удалять интроны из первичных РНК-транскриптов, поэтому правильная трансляция эукариотических мРНК в бактериальной клетке невозможна.
2. Экспрессия эукариотической ДНК может осуществляться только при наличии прокариотических сигнальных последовательностей, регулирующих транскрипцию и трансляцию.


Слайд 19
Схема основных этапов экспрессии генов в клетках прокариот (А) и эукариот (Б)
Текст слайда:

Схема основных этапов экспрессии генов в клетках прокариот (А) и эукариот (Б)


Слайд 20
Этапы клонирования генов эукариот1. Выделение мРНК на колонках, заполненных олиго(dT)-целлюлозой или олиго(dT)-сефарозой.2. Синтез одноцепочечной кДНК на матрице
Текст слайда:


Этапы клонирования генов эукариот
1. Выделение мРНК на колонках, заполненных олиго(dT)-целлюлозой или олиго(dT)-сефарозой.
2. Синтез одноцепочечной кДНК на матрице мРНК с помощью ревертазы, праймера олиго(dT) и четырех dNTP.
3. Синтез двухцепочечной кДНК.
4. После завершения синтеза молекулы мРНК гидролизуют РНК-азой Н, а ДНК обрабатывают нуклеазой SI, в результате чего получаются линейные молекулы ДНК с тупыми концами без шпилек.
5. кДНК встраивают в плазмидный вектор и получают кДНК-библиотеку.
Для скрининга кДНК-библиотеки можно использовать метод гибридизации или иммунологические методы.


Обратная связь

Если не удалось найти и скачать доклад-презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое TheSlide.ru?

Это сайт презентации, докладов, проектов в PowerPoint. Здесь удобно  хранить и делиться своими презентациями с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика