Слайд 1Лабораторная
диагностика
дифтерии и
коклюша
Слайд 2КЛАССИФИКАЦИЯ КОРИНЕБАКТЕРИЙ
ПОРЯДОК Actinomycetales
СЕМЕЙСТВО
Corynebacteriaceae
РОД Corynebacterium
ВИДЫ
ВОЗБУДИТЕЛЬ ДИФТЕРИИ
C. diphtheriae
БИОВАРЫ:
gravis
mitis
intermedius
C. pseudotuberculosis
верхние дыхательные пути
поверхность кожи
урогенитальный тракт
C. pseudodiphtheriticum
верхние дыхательные пути
поверхность кожи
C. xerosis
поверхность кожи
урогенитальный тракт
C.аmycolactum
урогенитальный тракт
Corynebacterium non diphtheriae
Слайд 3МАЗОК ИЗ КУЛЬТУРЫ C. diphtheriae
ОКРАСКА ПО НЕЙССЕРУ
ОКРАСКА ПО ЛЕФФЛЕРУ
Слайд 4Среда Клауберга II
Питательный агар
Теллурит калия
Глицериновая смесь
Лаковая кровь
Кровяной теллуритовый агар (КТА)
Питательный
агар
Теллурит калия
Дефибринированная или гемолизированная кровь
СРЕДЫ ДЛЯ ПЕРВИЧНОГО ПОСЕВА
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
Слайд 5Колонии C. diphtheriae
на среде Клауберга
Биовар gravis
Биовар mitis
Слайд 7ОСНОВНЫЕ ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ
C. diphtheriae
Слайд 8Коринетоксагар
предназначен для определения токсигенности дифтерийных микробов.
Состав: панкреатический гидролизат минтая, натрия хлорид,
натрия карбонат, агар, 20 % сыворотки крови крупного рогатого скота
или сыворотки лошадиной.
Слайд 9Ат
Ат
Ат
Ат
Ат
Аг (экзотоксин)
Аг
Аг
Аг
Аг
Аг
Аг
Аг
Токсигенная
культура
Токсигенная
культура
Нетоксигенные
культуры
Диск, пропитанный антитоксином диагностическим дифтерийным
«Усы» преципитации (Аг+АТ)
Слайд 10РНГА (РОПГА) для выявления дифтерийного токсина
Диагностикум эритроцитарный дифтерийный
антительный жидкий для
определения токсина в РНГА – моноклональные антитела, связанные с эритроцитами.
Штаммы
коринебактерий дифтерии засевают в жидкую питательную среду и инкубируют при 37° C в течение
18 часов, используют надосадочную жидкость среды культивирования
Через 2,5 - 3,5 часа производят учет результатов реакции. Допускается - через 18 - 24 часа.
токсин
Слайд 11Положительная проба Пизу на наличие цистиназы
В составе питательной среды:
цистин и
уксусно - кислый свинец.
Цистиназа расщепляет цистин, выделяется
сероводород , который взамодействуя с индикатором, образует серно - кислый свинец - соединение темно - коричневого цвета.
Инкубация 37 ̊С – 24 часа
Ускоренный метод - большое количество культуры – 3 часа.
Слайд 12 Проба на наличие уреазы
C. diphtheriae
не имеет уреазы
В составе
питательной среды: мочевина и фенолрот (крезолрот).
Уреаза расщепляет мочевину с образованием
аммиака и углекислоты.
Повышается pH среды - покраснение индикатора.
При отсутствии фермента среда остается желтой.
Ускоренная проба Заксе: 37 ̊С – 30 мин.
Бульон с мочевиной: 37̊С – 24 часа
Слайд 13Определение активности нитратредуктиазы
Тест позволяет определить способность восстанавливать нитраты в
нитриты. Способность к восстановлению N03 в N02 определяют культивированием в
МПБ 24 часа при 37° C, содержащем 1% раствор KN03. Для определения нитритов в среду добавляют несколько капель реактива Грисса. Этот реактив состоит из сульфаниловой кислоты и α-нафтиламина. При взаимодействии реактива Грисса с нитритами образуется азокраситель , и при положительном результате наблюдают появление красного окрашивания.
Слайд 16Исследуемый материал
(отделяемое слизистой зева, носа и
из места атипичной локализации
Тампоны
должны быть доставлены в лабораторию
не позднее 3-х часов с момента взятия материала.
Слайд 171 день
Зев Нос
24 часа
2
день
Постановка проб на:
токсигенность, цистиназу
48 часов /3 день
Посев на:
сахарозу
глюкозу
крахмал
мочевину
72 часа
/ 4 день
Учет свойств
Определение биохимического варианта
Учет
Слайд 18Протокол. Лабораторная диагностика дифтерии
1)____________________
______________________
______________________
______________________
______________________
______________________
______________________
2)
Слайд 19C. diphtheriae
mitis
gravis
C.hofmani
C. diphtheriae
C. diphtheriae
Слайд 20Показания для применения.
Лечение больных дифтерией.
Слайд 21Гастон Рамон
(1886-1963)
Культуру бактерий, продуцирующих экзотоксин, выращивают в жидких питательных средах
для накопления токсина, а затем фильтруют через бактериальные фильтры для
удаления микробных тел. К фильтрату добавляют 0,3—0,4% раствора формалина и помещают в термостат при температуре 37—40 °С на 3—4 нед до полного исчезновения токсических свойств.
дифтерийный анатоксин
Слайд 22Вакцины, содержащие дифтерийный анатоксин
АКДС
АДС-анатоксин
АДС-М- анатоксин
АД-М-анатоксин
Д.Т. Вакс (дифтерия, столбняк)
БУБО-Кок (дифтерия, столбняк,
коклюш, гепатит В)
Слайд 23Тетракок
Тетракок - вакцина для комбинированной профилактики дифтерии, столбняка, коклюша и
полиомиелита у детей с 2-мес. до 6 лет;
1 доза
вакцины Тетракок (0,5 мл) содержит:
очищенный дифтерийный анатоксин,
очищенный столбнячный анатоксин
Bordetella pertussis,
инактивированные вирусы полиомиелита 1,2,3 типов,
гидроокись алюминия,
формальдегид,
фенолэтанол.
Слайд 24Пентаксим® содержит антигены дифтерийного и столбнячного анатоксина, компоненты клеточной стенки
возбудителя коклюша, инактивированный вирус полиомиелита 1,2,3 типов и капсульные полисахариды
гемофильной палочки тип b.
Разовая доза составляет 0,5 мл.
Профилактика у детей от 3-х месяцев до 3 лет 11 месяцев 29 дней.
Слайд 25Инфанрикс ИПВ - ацеллюлярная вакцина для профилактики:
Дифтерии, коклюша, столбняка,
полиомиелита
Состав: ДT, СT, 3 Ag коклюшного микроба (КT+ФГA+ПРT),
3
инактивированных вируса полиомиелита
(тип 1, 2, 3)
Слайд 26Инфанрикс Пента - ацеллюлярная вакцина для профилактики:
Дифтерии, коклюша, столбняка,
полиомиелита,
гепатита В
Состав: ДT, СT, 3 Ag коклюша (КT+ФГA+ПРT), 3
инактивированных вируса полиомиелита (тип 1, 2, 3), очищенный HBsAg
Слайд 27Инфанрикс Гекса -ацеллюлярная вакцина для профилактики:
Дифтерии, коклюша, столбняка,
полиомиелита, гепатита
В, Hib - инфекции
Состав: ДT, СT, 3 Ag коклюшного микроба
(КT+ФГA+ПРT), 3 инактивированных вируса полиомиелита (тип 1, 2, 3), очищенный HBsAg,
коньюгат капсульного
полисахарида Hib
Слайд 28Б О Р Д Е Т Е Л Л Ы
РОД Bordetella
ВИДЫ
B. pertussis
B. parapertussis
B. bronchiseptica
B. avium
Слайд 29Мазок из чистой культуры B. рertussis,
окраска по методу Грама
Слайд 30Рост колоний B. рertussis
на кровяном агаре
Слайд 36
Борде — Жангу среда
плотная питательная среда для культивирования гемоглобинофильных бактерий,
представляющая собой картофельно-глицериновый кровяной агар.
Среда Казеиново-угольный агар (КУА)
кислотный гидролизат казеина
глубокой степени расщепления
крахмал растворимый
уголь активированный
дрожжевой диализат
калий фосфорнокислый однозамещенный
магний хлористый
кальций хлористый
медь сернокислая
кислота глутаминовая
цистеин
агар микробиологический
Слайд 37Вакцины, содержащие коклюшный компонент
Слайд 38Протокол. Лабораторная диагностика коклюша
