Разделы презентаций


Лекция 4. Изменчивость прокариот

Содержание

Таутомери-зация азотистых оснований – источник ошибок реплика-ции

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1


Слайд 5Таутомери-зация азотистых оснований – источник ошибок реплика-ции

Таутомери-зация азотистых оснований – источник ошибок реплика-ции

Слайд 6Енолизация гуанина
Временная енолизация гуанина приводит к формированию GC – AT

транзиции (мутант). Мутация проявляется во втором поколении, если GT не

будет репарирована в первом поколении.
Енолизация гуанинаВременная енолизация гуанина приводит к формированию GC – AT транзиции (мутант). Мутация проявляется во втором поколении,

Слайд 7Мутагены

Мутагены

Слайд 85-Бром урацил

5-Бром урацил

Слайд 10Мутагены

Мутагены

Слайд 11Тиминовые димеры

Тиминовые димеры

Слайд 12Репарация ДНК
Клетки имеют механизмы исправляющие повреждения ДНК.
Эксцизионная репарация – исправляет

повреждения одной из цепей (пиримидиновые димеры, АР-сайты и т.д.), использует

вторую цепь в качестве матрицы для заполнения пробелов.
Фотореактивация в ответ на возникновение повреждений (пиримидиновых димеров).
Репарация неспаренных нуклеотидов (mismatch repair).
Рекомбинационная репарация (используется неповрежденная цепь).
SOS-репарация. При множественных повреждениях останавливается синтез ДНК.
Репарация ДНККлетки имеют механизмы исправляющие повреждения ДНК.Эксцизионная репарация – исправляет повреждения одной из цепей (пиримидиновые димеры, АР-сайты

Слайд 14Эксцизионная репарация оснований

Эксцизионная репарация оснований

Слайд 15Рекомбинационная репарация

Рекомбинационная репарация

Слайд 16Репарация ДНК
SOS-репарация.
При множественных повреждениях останавливается репликация ДНК. Это вызывает

активацию регулона содержащего до 20 генов, участвующих в процессе репарации.
Синтез

ДНК при SOS-репарации подвержен ошибкам что приводит к повышению частоту мутаций (непрямой мутагенез). Возможно это увеличивает частоту положительных, адаптивных мутаций в популяции бактериальных клеток.
Репарация ДНКSOS-репарация. При множественных повреждениях останавливается репликация ДНК. Это вызывает активацию регулона содержащего до 20 генов, участвующих

Слайд 17Рост генетического разнообразия
Рекомбинация.
Генетический материал разных молекул ДНК комбинируется в

гибридной молекуле ДНК.
У эукариот – рекомбинация в мейозе. У

прокариот – рекомбинация 3 типов, по молекулярным механизмам схожа с рекомбинацией эукариот.
Горизонтальный перенос генов.
Конъюгация.
Трансформация.
Трансдукция.
Рост генетического разнообразияРекомбинация. Генетический материал разных молекул ДНК комбинируется в гибридной молекуле ДНК. У эукариот – рекомбинация

Слайд 18Рекомбинация у прокариот
Гомологичная рекомбинация. Реципрокный обмен участками хромосом с аналогичными

нуклеотидными последовательностями. Возможен нереципрокный обмен с короткими участками ДНК.
Сайт-специфическая рекомбинация.

Интеграция многих вирусных геномов. Донор имеет небольшой участок, гомологичный ДНК хозяина.
Транспозиция. С участием мобильных элементов генома.
Рекомбинация у прокариотГомологичная рекомбинация. Реципрокный обмен участками хромосом с аналогичными нуклеотидными последовательностями. Возможен нереципрокный обмен с короткими

Слайд 19Гомологичная рекомбинация

Гомологичная рекомбинация

Слайд 20Нереципрокная гомологичная рекомбинация

Нереципрокная гомологичная рекомбинация

Слайд 21Транспозиция
Рекомбинация не зависящая от гомологии участков ДНК.
Происходит во многих сайтах

генома.
Происходит с участием мобильных элементов генома – транспозонов.
Мобильные элементы могут

перемещаться между хромосомной и нехромосомной ДНК.
Мобильные элементы внедряются в геном хозяина, меняя генную структуру или подчиняя экспрессию генов новым регуляторным элементам.
ТранспозицияРекомбинация не зависящая от гомологии участков ДНК.Происходит во многих сайтах генома.Происходит с участием мобильных элементов генома –

Слайд 22Транспозоны
Транспозоны:
Инсерционные (IS);
Составные (Tn) ;
Репликативные.
Инсерционные и Составные перемещаются путем обычной транспозиции

(вырезать-вставить). Транспозаза катализирует вырезание, участок опознавания составляет 5-9 п.н.
Репликативные

– посредством репликативной транспозиции.
ТранспозоныТранспозоны:Инсерционные (IS);Составные (Tn) ;Репликативные.Инсерционные и Составные перемещаются путем обычной транспозиции (вырезать-вставить). Транспозаза катализирует вырезание, участок опознавания составляет

Слайд 23Инсерционные транспозоны (IS)
Открыты в 1970г. П.Сталинжером, Г.Сэдлером и Дж.Шапиро. Обычно

несколько is-элементов содержиться в бактериальной хромоосмею Размеры 750-1550 п.н.
На концах

инвертированные последовательности (IR) необходимые для переноса. В центральной части ген транспозазы, необходимый для распознавания is-элементов и взаимодействия с is-элементами в процессе перемещения.
Инсерционные транспозоны (IS)Открыты в 1970г. П.Сталинжером, Г.Сэдлером и Дж.Шапиро. Обычно несколько is-элементов содержиться в бактериальной хромоосмею Размеры

Слайд 24Составные транспозоны
Содержат дополнительные гены (устойчивости к антибиотикам или токсинам), фланкированные

IS последовательностями.
Частота перемещения зависит от типа транспозона. Считается, что

они произошли от 2 ассоциированных инсерционных транспозона, включая область кодирующих генов между ними.
Составные транспозоныСодержат дополнительные гены (устойчивости к антибиотикам или токсинам), фланкированные IS последовательностями. Частота перемещения зависит от типа

Слайд 25Репликативный транспозон
Перемещаются посредством механизма репликативной транспозиции. Процесс катализируется белком ресольвазой

(сайт-специфическая рекомбинация).
Исходный транспозон остается в исходном сайте, реплицируясь на

участке ДНК-мишени.
Репликативный транспозонПеремещаются посредством механизма репликативной транспозиции. Процесс катализируется белком ресольвазой (сайт-специфическая рекомбинация). Исходный транспозон остается в исходном

Слайд 26Простая транспозиция

Простая транспозиция

Слайд 28Функции транспозонов
Могут встраиваться в гены, вызывая мутации или стимулируя хромосомные

перестройки, делеции.
Могут переносить стоп-кодоны либо промоторные участки, что влияет

на транскрипцию или трансляцию гена-мишени.
Часто перемещаются между плазмидами, которые могут содержать несколько транспозонов.
Могут перемещаться между плазмидами и хромосомами, создавать плазмиды устойчивости, содержащие несколько генов устойчивости к антибиотикам.
Функции транспозоновМогут встраиваться в гены, вызывая мутации или стимулируя хромосомные перестройки, делеции. Могут переносить стоп-кодоны либо промоторные

Слайд 29Плазмиды
Плазмиды реплицируются независимо от хромосомы, могут существовать в большом количестве

в клетке. Могут содержать мобильные элементы (транспозоны), способные переходить от

плазмиды к хромосоме и между плазмидами.

1 – бактериальная хромосома, 2 – плазмиды, 3 – деление, 4 – ДНК с включенным материалом плазмид

ПлазмидыПлазмиды реплицируются независимо от хромосомы, могут существовать в большом количестве в клетке. Могут содержать мобильные элементы (транспозоны),

Слайд 30Плазмиды
Небольшие молекулы ДНК (от 1 000 п.н. до неск. сот

тыс. п.н.), способные к самостоятельной репликации (репликон).
Существуют в свободном состоянии

или в составе хромосом.
Эписомы – плазмиды способные к обратимой интеграции в хромосому.
Крупные плазмиды, содержащие гены «домашнего хозяйства» – называют хромосомами.
Плазмиды состоят из модулей: обязателен репликативен, другие опциональны.
ПлазмидыНебольшие молекулы ДНК (от 1 000 п.н. до неск. сот тыс. п.н.), способные к самостоятельной репликации (репликон).Существуют

Слайд 31Плазмиды
Плазмиды способны переносить генетический материал при конъюгации бактериальных клеток (F-плазмиды).

В их состав входят гены белков пилей и другие, всего

до 14 генов.
Мобилом – мобильные генетические элементы клетки.
В плазмидах переносятся гены деградации ксенобиотиков и азотфиксирующих ферментов.
ПлазмидыПлазмиды способны переносить генетический материал при конъюгации бактериальных клеток (F-плазмиды). В их состав входят гены белков пилей

Слайд 33Структура F-плазмиды

Структура F-плазмиды

Слайд 34Горизонтальный (латеральный) перенос генов
Конъюгация.
Прямой перенос ДНК во время временного

физического контакта клеток.
Трансформация.
Перенос свободных молекул ДНК.
Трансдукция.
Перенос молекул ДНК с

участием бактериальных вирусов.
Горизонтальный (латеральный) перенос геновКонъюгация. Прямой перенос ДНК во время временного физического контакта клеток. Трансформация.Перенос свободных молекул ДНК.Трансдукция.Перенос

Слайд 35Горизонтальный (латеральный) перенос генов
Перенос генов между 2 прокариотическими организмами. Важный

механизм увеличения генетического разнообразия у прокариот.
Часть геном – экзогенот

переноситься от донора к реципиенту и интегрируется в эндогенот. Мерозигот временное диплоидное состояние части наследственного материала прокариот.
Бактерии способны обмениваться участками наследственного материала, в том числе генами устойчивости к антибиотикам. Обмен может происходить между непатогенными и патогенными формами.
Горизонтальный (латеральный) перенос геновПеренос генов между 2 прокариотическими организмами. Важный механизм увеличения генетического разнообразия у прокариот. Часть

Слайд 36Образование мерозигот

Образование мерозигот

Слайд 37Конъюгация бактерий
Конъюгация – перенос генетического материала между бактериальными клетками при

помощи прямого клеточного контакта.
Включает F-фактор (F-плазмиду), половые пили и

систему секреции IV типа.
При F+ X F- конъюгации, F-плазмида существует независимо от бактериальной хромосомы и переноситься в клетку реципиента целиком, гены донора обычно не переносятся.
При Hfr-конъюгации, происходит частичная репликация донорской ДНК, переноситься только цепь ДНК (Hfr), содержащая гены плазмиды и хозяина, F-плазмида интегрирована в хромосому хозяина и не переноситься целиком.
Конъюгация бактерийКонъюгация – перенос генетического материала между бактериальными клетками при помощи прямого клеточного контакта. Включает F-фактор (F-плазмиду),

Слайд 38Эксперимент Д. Ледерберга и Э. Тэйтума (1946), доказавший явление конъюгации

Эксперимент Д. Ледерберга и Э. Тэйтума (1946), доказавший явление конъюгации

Слайд 39Эксперимент Б. Дэвиса, показавший роль физического контакта при конъюгации

Эксперимент Б. Дэвиса, показавший роль физического контакта при конъюгации

Слайд 40Конъюгация E.coli

Конъюгация E.coli

Слайд 41F+ X F- конъюгация
F+ X F- конъюгация

F+ X F- конъюгацияF+ X F- конъюгация

Слайд 42F+ X F- конъюгация

F+ X F- конъюгация

Слайд 43Инсерция F-плазмиды в бактериальную хромосому с образованием Hfr-клетки

Инсерция F-плазмиды в бактериальную хромосому с образованием Hfr-клетки

Слайд 44Конъюгация Hfr-клетки с новым реципиентом

Конъюгация Hfr-клетки с новым реципиентом

Слайд 45Трансформация
Впервые явление трансформации описано Ф. Гриффитом в 1928.
Перенос ДНК

без участия дополнительных структур. Внесенная ДНК включается в геном и

может наследоваться.
Часто фрагменты ДНК выходят во внешнюю среду при лизисе клетки, при попадании в «компетентную» клетку вызывают трансформацию. Средняя частота трансформации «компетентных клеток» 10-3.
Компетентность зависит от размеров популяции, при достижении больших размеров 107-108 кл./мл., на поверхности экспрессируется белок отвечающий за трансформацию. Происходит в почвенных и водных экосистемах.
ТрансформацияВпервые явление трансформации описано Ф. Гриффитом в 1928. Перенос ДНК без участия дополнительных структур. Внесенная ДНК включается

Слайд 46Трансформация фрагментами ДНК и плазмидами

Трансформация фрагментами ДНК и плазмидами

Слайд 47Трансформация на примере S.pneumoniae

Трансформация на примере S.pneumoniae

Слайд 49Бактериальная трансформация

Бактериальная трансформация

Слайд 50Перенос ДНК в клетку
Для переноса ДНК через клеточные оболочки имеются

сложные системы, включающие ферменты нуклеазы, транслоказы и другие, а также

некоторые структурные белки образующие канал для перемещения ДНК.
Перенос ДНК в клеткуДля переноса ДНК через клеточные оболочки имеются сложные системы, включающие ферменты нуклеазы, транслоказы и

Слайд 51Трансдукция
Трансдукцию осуществляют бактериофаги, переносящие невирусную информацию. Фаги – вирусы бактерий,

используют аппарат синтеза белка и репликации ДНК клетки.
Ошибки в жизненном

цикле фага могут приводить к попаданию в капсид вируса фрагментов ДНК бактерии.
Вирулентные фаги вызывают лизис клетки после увеличения количества фаговых частиц в клетке – литический цикл.
Умеренные фаги внедряются в геном хозяина, совместно реплицируются длительное время – лизогенный цикл.
Профаг – внедренный в хромосому геном вируса.
ТрансдукцияТрансдукцию осуществляют бактериофаги, переносящие невирусную информацию. Фаги – вирусы бактерий, используют аппарат синтеза белка и репликации ДНК

Слайд 53Общая трансдукция
Описана в 1951г. Дж.Ледербергом и Н.Циндером.
Неспецифический перенос разнообразных генов

хозяина.
Во время лизиса клетки-хозяина обломки ДНК хозяина (0,5 –

2,5 %) укладываются под капсидную оболочку вместе с ДНК фага.
Характерна для литических циклов. Наследование внесенной ДНК происходит только при условии успешной гомологичной рекомбинации с ДНК клетки-хозяина.
Если ген не может быть интегрирован в геном хозяина – абортивная трансдукция.
Общая трансдукцияОписана в 1951г. Дж.Ледербергом и Н.Циндером.Неспецифический перенос разнообразных генов хозяина. Во время лизиса клетки-хозяина обломки ДНК

Слайд 54Общая трансдукция

Общая трансдукция

Слайд 55Общая трансдукция

Общая трансдукция

Слайд 57Специфическая трансдукция
Перенос ограниченного числа генов, расположенных в участке включения ДНК

фага в хромосому бактерии.
Происходит в результате ошибки лизогенного цикла, когда

профаг покидает хромосому хозяина, вырезание может быть неточным, захватывая участок ДНК хозяина (5-10%).
Наиболее известный пример – фаг лямбда, который размножается 2 способами: при литическом цикле присутствует в виде автономной молекулы ДНК, которая обеспечивает синтез фаговых частиц. При лизогенном цикле ДНК фага интегрирована в хромосому и реплицируется пассивно.
Дефектный фаг может содержать гены, следующие на хромосоме за точкой внедрения и профагом.
Специфическая трансдукцияПеренос ограниченного числа генов, расположенных в участке включения ДНК фага в хромосому бактерии.Происходит в результате ошибки

Слайд 58Специфическая трансдукция

Специфическая трансдукция

Слайд 59Специфическая трансдукция

Специфическая трансдукция

Слайд 61Опыт Джона Кернса (1988 г.)
В работе использовался мутантный штамм

lac- бактерий, неспособных к метаболизму лактозы, такие бактерии не растут

на средах, содержащих лактозу в качестве единственного источника энергии. При пересеве таких бактерий на среду с лактозой вырастают только бактерии -ревертанты lac+.
После пересева и суточного роста наблюдалась картина, аналогичная опыту Лурии и Дельбрюка, однако через 2 и 3 суток роста количество устойчивых колоний значительно возросло.
Опыт Джона Кернса (1988 г.) В работе использовался мутантный штамм lac- бактерий, неспособных к метаболизму лактозы, такие

Слайд 62CRISP-кассеты
В 2005 году сотрудниками Danisco Рудольфом Барангу и Филиппом Хорватом

проводились опыты с культурами Streptococcus thermophilus. Эти работы имели практическую

цель получить штаммы бактерии, применяемой для производства молочных продуктов, устойчивой к бактериофагам.
В результате были открыты CRISP-кассеты – участки ДНК, одержащие короткие фрагменты (спейсеры), схожие у бактерии и фага. Считается, что набор спейсеров отвечает за способность фага поражать бактерию.
CRISP-кассетыВ 2005 году сотрудниками Danisco Рудольфом Барангу и Филиппом Хорватом проводились опыты с культурами Streptococcus thermophilus. Эти

Слайд 63Спасибо за внимание

Спасибо за внимание

Обратная связь

Если не удалось найти и скачать доклад-презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое TheSlide.ru?

Это сайт презентации, докладов, проектов в PowerPoint. Здесь удобно  хранить и делиться своими презентациями с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика