трансплантация эмбрионов у кроликов

Уолтер Хейп совершил первый успешный эксперимент переноса эмбрионов кроликов около

100 лет назад ( процитировал Бигерс , 1991) . Были разработаны многочисленные методы получения хирургического доступа к яичникам , маточным трубам , матки и влагалища с флангов или белой линии ( Chang , 1950 ; Хафез , 1962 ; Adams , 1962 ) .

возможность наблюдения и переноса эмбрионов, однако создавали стресс для животного-реципиента

. Кроме того, манипуляции половых органов могли привести к кровотечению или рубцовому образованию, которое снижает эффективность переноса эмбриона . Фудзимото и др ( 1974 ) использовали метод эндоскопии ( Russel , 1988 ) , чтобы наблюдать созревание фолликула и овуляцию у кроликов .

( Theau - Kliment и Bolet , 1987; Santacreu и

др , 1990) и оценить скорость имплантации на 12-й день беременности ( Santacreu и др , 1990 ) . Theau - Kliment и Bolet ( 1987 ) и Santacreu и др ( 1990 ) также отметил , что использование лапароскопии не оказывают негативное влияние на выживаемость плода . Viudes de Kastro и др ( 1991 ) использовали следственную хирургии для изучения влияния калорийности пищи на скоростях овуляции , имплантации и потери плодов и пришли к выводу , что лапароскопия имеет неоценимое значение для определения влияния диет на течки и уровень рождаемости .

, упрощенный подход к передаче эмбрионов в маточных трубах кролика

. Здесь показываются удволетворительные показатели беременности и имплантации в результате уменьшение обработки и стресса для кролика в сочетании со значительно меньшими манипуляциями над репродуктивными органами

в отдельных клетках и одинаковом светом режиме - 14 ч

свет : 10 ч темно ,в течении 3 недель до начала эксперимента . Кролики получали гранулированный корм , который содержал ( 17,5 % белка, 2,0 % жира , 14 % клетчатки , 8,0 % золы , 20 000 IU витамина А, 800 МЕ витамина D3 , 40 мг витамина Е и 25 мг меди) К воде – неограниченный доступ . Испытания были начаты в августе 1991 года и закончилась в апреле 1992 года .

гонадотропина жеребных кобыл (20 МЕ/1кг ГСЖК внутримышечно) Овуляция была вызвана

в.в. введение 180 МЕ Ekluton (синтетическим прогестагеном )на одно животное . Эмбрионы – 2мя, 3мя, 4мя бластомерами или в стадии Морулы. Неоплодотворенные были отброшены . Перенос эмбрионов был осуществлен в течении 22-24 ч после синхронизации животных-реципиентов . Для мітья и зранения ємбрионов біло использованно – фосфатно-солевой буфер Дульбеко, которым и обмывали эмбрионы

(9-12 месяцев и 4-5кг) были использованы для эндоскопической пересадки эмбрионов.

Каждый реципиент получи по 30-54 эмбриона на разных стадиях развития. 6 животных были забиты , для определения успешности оплодотворения. Оставшиеся 3 кролика оставили для дальнейшего вынашивания.

эмбрионов на разных стадиях развития. Всего было задействовано 22 кролика

(4-5 месяцев, 3,5-4,5кг) Эмбрионы использованные в этот раз были с 1й, 1-2 и 2мя бластомерами. Все реципиенты забеременили.

правую маточные трубы, было введено одинаковое количество эмбрионов.

большой cold light fountain 150 ват, оптико- волоконній кабель ,

светонакопительные лампы, инфильтрационный троакар с автоматическим клапоном и пирамидальным наконечником (диаметр 4,5 мм), Ендоскоп Хопкинса 4,5 мм с углом поворота 30 °.

2% и 15 мг кетамина гидрохлорид/1кг 10%,. Пупковую область кролика

выбривали, затем укладывали на передвижном операционном столе в вертикальном положении (головой вниз). После того, как был сделан небольшой разрез (<1 см), эндоскоп троакар был введен через брюшную стенку. После удаления троакара, живот был раздут. Затем был вставлен эндоскоп (см. Рис.1) Вертикальное расположение животного гарантирует, что желудок и кишечник краниально расположены таким образом, что маточные трубы образуют петлю вниз оказывающуюся между яичников и матки. Проксимальный конец ампулы проходит по прямой линии (2-3 см) над воронкой. Среду, содержащую эмбрионы переносили с помощью стеклянного капилляра (5 μ колпачками, Бранд, Вертхейм) в ампулу через воронку (рис 2.). После этого воздух удаляется из брюшной полости и разрез закрывают с помощью зажимаl. Животного-реципиента исследовали при помощи пальпации на 12-й день после овуляции, чтобы определить, была ли она беременна. Частота имплантации определялась как процент эмбрионов, которые были имплантированы, а также процент выживаемости эмбрионов, а также процентное соотношение переданных животному эмбрионов из которых вышло здоровое потомство.

состоящих из 2х, 3х, 4х бластомеров или в стадии морулы

является наиболее успешной. Методика была разроботанная в 2 стадии. Первый этап экспериментов включал передачу 30 – 65 эмбрионов каждому из девяти реципиентов. В результате беременности у всех животных наблюдалась беременность. Через 12 дней шесть кроликов из 9 были убиты , и они показали успешность имплантации 27% . Оставшиеся три кроликов продолжались беременности до родов. Выживаемость эмбрионов составила 26% . На втором этапе , 10 – 20 эмбрионов были переданы каждому из 22 животных-реципиентов , 19 из которых разродились ( выживаемость эмбрионов у забеременевших животных составила 47% ) . Что в свою очередь доказало , что при правильном подходе к этой процедуре , можно достич высоких показателей выживаемости , а также к дальнейшей экономической выгоде.