Слайд 1 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СОВРЕМЕННЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ МБТ НА БАЗЕ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ
ГБУЗ ЯО «ОКТБ»
О.Ю.Соснина
зав. бактериологической лабораторией, врач - бактериолог
высшей категории
Ярославль, 2016г.
Слайд 2Обзорная рентгенограмма, выполненная с интервалом 18 дней.
Остропрогрессирующий инфильтративный туберкулез.
Казеозная пневмония
верхней доли правого легкого
(тот же больной через 18 дней). Летальный исход.
1
2
Поздняя идентификация возбудителя
Слайд 7Методы микроскопии
Микроскопия с окраской по Цилю-Нильсену:
нативный материал
доступен
для лабораторий всех уровней
не требует особых затрат
результат через
1 час
Микроскопия
люминесцентная:
- осадок
только для ЛУ фтизиатрического профиля
результат на 2 сутки
Слайд 8Недостатки методов:
Не позволяют дифференцировать МБТ от нетуберкулёзных МБ
Можно обнаружить КУМ
только при наличии 5000 – 10000 микробных тел в 1
мл мокроты
Слайд 9Бактериологические методы
Посев на плотные среды:
Левенштейна- Йенсена
Финн-2
Достоинства методов:
Позволяют выявить КУМ
при
наличии в 1 мл исследуемого материала 10-100
микробных тел (чувствительность метода 70-80%);
При получении чистой культуры можно протестировать её лекарственную чувствительность;
Можно использовать любой материал.
Недостатки методов:
Длительность протокола исследования:
отрицательная пробирка – 90 дней, положительная – 18-36 дней;
Слайд 10Бактериологические методы
Посев на жидкие среды с использованием автоматизированной системы BACTEC
MGIT 960
Слайд 11Система детекции и определения чувствительности микобактерий туберкулеза BD BACTEC™ MGIT™ 960
Слайд 12Достоинства методов:
Позволяют выявить КУМ при наличии в 1 мл исследуемого
материала 10-100 микробных тел (чувствительность метода 70-80%)
При получении чистой культуры
можно протестировать её лекарственную чувствительность.
Недостатки методов:
Длительность протокола исследования:
отрицательная пробирка 42 дня, положительная – от 3 дней и выше.
Нельзя исследовать кровь и мочу;
Высокая стоимость исследования.
Слайд 14Метод иммунохроматографии
Основан на определении наличия специфического антигена МБТ МРТ-64
Прост в
выполнении
Обеспечивает идентификацию МБТ за 15 минут
Слайд 15Молекулярно-генетические методы
1.Биологические микрочипы;
2.ДНК-стрипы;
3.Мультикомплексная ПЦР в режиме реального времени;
4.Картриджная технология.
Преимущества методов:
Быстрое
(в течение рабочей смены) и достоверное выявление больных с МЛУ
Позволяют
выявлять устойчивость к препаратам второго ряда, разделять потоки больных и включать в режим лечения наиболее эффективные препараты
Недостатки методов:
Высокая стоимость аппаратуры и расходных материалов
Слайд 16Молекулярно-генетический метод GENEXPERT MTB/RIF
Слайд 17Клинический пример
Пациентка Н, 26 лет, выявлена по
обращению с бронхолегочными жалобами. Госпитализирована в пульмонологическое отделение. Получала лечение
по поводу внебольничной пневмонии, осложненной экссудативным плевритом в течение 13 дней, без положительного эффекта. После консультации фтизиатра переведена в хирургическое отделение ГБУЗ ЯО ОКТБ, где было проведено обследование, в том числе ПЦР-исследование мокроты.
Клинический диагноз: очаговый туберкулёз нижней доли правого легкого , осложнённый экссудативным плевритом
Слайд 18ПЦР-исследование
В результате данного исследования были выявлены микобактерии туберкулёза с устойчивостью
к RIF, что позволило поставить диагноз очаговый туберкулёз и начать
своевременное и адекватное лечение.
Слайд 20Мультикомплексная ПЦР в режиме реального времени
Станция для выделения ДНК
Слайд 22Зарождение эпидемии ТБ МЛУ
Распространенность туберкулеза МБТ+ МЛУ
(на 100 тыс.)
44%
от
всех больных МБТ+
Слайд 23Биологический материал, исследуемый
данными методами:
Bactec MGIT 960: мокрота , промывные воды
бронхов, плевральная жидкость, спинномозговая жидкость.
Система GeneXpertDx: мокрота, промывные воды бронхов,
плевральная жидкость, спинномозговая жидкость.
ПЦР в режиме Real Time: любой биологический материал, кроме крови.
Слайд 24
Для анализа в автоматизированной системе Bactec MGIT 960 используются стерильные
пробирки на 50 мл с плотно завинчивающейся крышкой. Для ПЦР
диагностики используются контейнера в индивидуальной упаковке с контрольной лентой
( признак того, что баночка до пациента не вскрывалась).
Биологический материал должен доставляться в стерильной посуде (каждая соответствует выполняемому анализу) и сопровождаться направительным бланком в котором указывается название ЛПУ, Ф.И.О. больного, год рождения, адрес, диагноз, вид патологического материала, дата, цель исследования, подпись врача.