Лабораторная диагностика бруцеллёза

поражает коз и овец, возможна миграция на крупный рогатый скот

и свиней),
B. abortus (7 биоваров; вызывает аборты и орхиты у крупного рогатого скота),
B. suis (5 биоваров; поражает свиней, зайцев, северных оленей, грызунов),
B. neotomae (выделяется от пустынной кустарниковой крысы),
B. ovis (вызывает эпидидимиты и орхиты у баранов),
B. canis (поражает собак).
Вновь зарегистрированные бруцеллы:
B. ceti выделяются от китообразных,
B. pinnipedialis - от ластоногих
B. microti - от серой полевки,
B. inopinata - источник не установлен.
Заболевания людей преимущественно вызывают
B. melitensis, B. abortus и B. suis биовары 1 - 4, реже - B. canis

Бруцеллы в мазке-отпечатке из тканей
Окраска по методу Грама

трофобластов.

нейропатия
ССС
Эндокардит
Миокардит
Перикардит
МПС
Орхит
Гломерулонефрит
Интерстициальный нефрит
Пиелонефрит
Аборт
ОДС
Артрит (сакроилеит)
Остеомиелит

пунктат из лимфоузлов,
моча,
желчь,
суставная жидкость

(при артритах),
гной (при абсцессах).

Материал из объектов внешней среды, продукты.

среды; инкубация при 37 °С до 20 - 30 сут.;
3

- 21 сут. от начала исследования:
- учет результатов роста, бактериоскопия;
постановка реакции агглютинации (МФА) отобранных изолированных колоний с сывороткой бруцеллезной диагностической поливалентной для РА;
отсев для получения чистой культуры;

5 - 30 дней от начала исследования:
постановка с культурами возбудителя бруцеллеза, находящимися в стабильной S-форме, тестов межвидовой дифференциации:

- отношение к избыточному содержанию углекислоты в воздухе;
- образование сероводорода;
- редукция красителей (тионин, основной фуксин);
- агглютинация моноспецифическими бруцеллезными сыворотками (anti-abortus, anti-melitensis);
- чувствительность к бруцеллезному бактериофагу Тб;
- чувствительность к антибактериальным препаратам диско-диффузионным методом;

10 - 40 сут. от начала исследования:
учет результатов.

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД

паховую область или внутрибрюшинно - при исследовании крови, спинномозговой жидкости,

костного мозга.

- вскрытие биопробных животных,

посев на питательные среды патологического материала: лимфатические узлы (регионарные в месте введения исследуемого материала, паховый, подчелюстной, шейный, парааортальный), кусочки органов (селезенка, печень, костный мозг), кровь;
- приготовление мазков-отпечатков из органов биопробных животных, постановка МФА;
- постановка ПЦР (суспензия из гомогената органов, лимфатических узлов, костный мозг, сыворотка крови);
- постановка реакций агглютинации

40 сут. от начала исследования:
учет результатов.

20-35 сут. от начала исследования:

БИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД

1-2 часа 20 ̊С
Забор крови

применяется для диагностики бруцеллеза у людей и выявления иммунологической перестройки

организма после вакцинации.

Правила применения
Бруцеллин вводят внутрикожно в дозе 0,1 мл в ладонную поверхность предплечья.

Оценка результата 24-48 часов
Размер гиперемированного и отечного участка: - до 1 см – peaкция сомнительная; - 1-3 см – реакция слабо положительная; - 3-6 см – реакция положительная; - более 6 см – реакция резко положительная.

Аллергический метод
Проба Бюрне с бруцеллином

от биопробных животных
с пробами из объектов внешней среды, продуктов

Молекулярно-генетические методы

исследования
ПЦР

19 ВА.

Через 20-30 дней после вакцинации развитие иммунитета до 10-12 мес, максимальная напряженность сохраняется 5-6 мес. Вакцинацию следует проводить не позднее, чем за 3-4 нед до начала работы, связанной с риском заражения.

введения и накожного нанесения, суспензия для инъекций

Граму))

на заболевание людей в зависимости от формы заболевания - содержимое

везикул, отделяемое карбункула или язвы, струпья, мокрота, кровь, спинномозговая жидкость, моча, испражнения, экссудаты;
б) трупный материал - кровь, экссудаты, кусочки органов (селезенки, печени, лимфоузлов и др.);
в) материал от животных;
г) продовольственное сырье и продукты животного происхождения;
д) объекты окружающей среды - почва, трава, фураж, подстилка, вода и т.д.

с фенолфталеинфосфатом (на щелочную фосфатазу)
МПБ.
Инкубация (36 +/- 1) °С

на 18 - 20 ч (до 48 ч)
Через 24 часа
Оценка характера роста
Бактериоскопия
Оценка активности щелочной фосфатазы (нет розовых колоний при обработке аммиаком)
МФА и ПЦР с материалом из типичных колоний
Высев для накопления чистой культуры

на полужидком агаре по следу укола)
Капсулообразование (слизистый рост на сывороточных

средах, бактериоскопия)
Чувствительность к бактериофагам
Гемолиз эритроцитов барана (рост на кровяном агаре)
Чувствительность к пенициллину («жемчужное ожерелье», диско-диффузионный метод)

Желатин
Казеин
Альбумин
Гемоглобин
Лецитиназная активность
Рост на минимальной среде
Оценка вирулентности на среде с противосибиреязвенным иммуноглобулином
(слизистые колонии, капсула в мазке, преципитация вокруг колоний)

морские свинки,

золотистые хомячки.

Инфицирование - внутренняя поверхность бедра

Гибель - чаще через 1 - 3 сут.

Студенистый геморрагический отек подкожной клетчатки на месте введения материала, гиперемия внутренних органов, увеличение селезенки, несвернувшаяся кровь.

Из тканей и органов - мазки-отпечатки,
посевы.

колоний;
с материалом от биопробных животных
с пробами из объектов внешней среды,

продуктов

болезни,
титр нарастает до 21 и более суток.
Увеличение титра

в парных сывороток с интервалом 5 - 7 дней.

В МФА: диагностические титры 1:16 - 1:32 или
4-кратное нарастание при повторном исследовании.

строго внутрикожно.
Результат положительный: через 24 - 48 ч участок

гиперемии с инфильтрацией не менее 16-25 мм в диаметре.

Реакция сомнительная - до 15 мм,
требует повторения через 5-7 дней. 

живые споры вакцинного сибиреязвенного штамма СТИ, лиофилизированные.

Схема вакцинации:
двукратная

0 день – 20 день или 30 день.
Ревакцинация ежегодно однократно.