Разделы презентаций


Презентация на тему Основные методы оценки иммунной системы

Содержание

МетодыИФАМетод моноклональных антителПЦРПроточная лазерная цитометрия

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1Основные методы оценки иммунной системы
Чибулаева В.В. 340гр

Основные методы оценки иммунной системыЧибулаева В.В. 340гр

Слайд 2Методы
ИФА
Метод моноклональных антител
ПЦР
Проточная лазерная цитометрия


МетодыИФАМетод моноклональных антителПЦРПроточная лазерная цитометрия

Слайд 3ИФА
Это выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой

(пероксидазой хрена, бета-галактозидазной и или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченой ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции - интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.
ИФАЭто выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазной и или щелочной

Слайд 4Твердофазный ИФА - вариант теста, когда один из компонентов иммунной -реакции

(антиген или антитело ) сорбирован на твердом носителе. Компоненты выявляют добавлением меченых антител или антигенов. При положительном результате изменяется цвет хромогена. Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют не связавшиеся реагенты путем промывания.

Твердофазный ИФА - вариант теста, когда один из компонентов иммунной -реакции (антиген или антитело ) сорбирован на

Слайд 5НЕПРЯМАЯ РЕАКЦИЯ

ПРЯМАЯ РЕАКЦИЯ

ПРЯМАЯ РЕАКЦИЯ
Ингредиенты:
Антиген-чистая культура
Антитело1 – диагностическая сыворотка на твердом носитиле


Антитело2 – диагностическая специфическая сыворотка меченная пероксидазой хрена
Субстрат для фермента
НЕПРЯМАЯ РЕАКЦИЯ
Ингредиенты:
Антиген – диагностикум на твердом носителе
Антитело1 – парные сыворотки
Антитело2 – антиглобулиновая сыворотка
Субстран для фермента

НЕПРЯМАЯ РЕАКЦИЯПРЯМАЯ РЕАКЦИЯПРЯМАЯ РЕАКЦИЯИнгредиенты:Антиген-чистая культураАнтитело1 – диагностическая сыворотка на твердом носитиле Антитело2 – диагностическая специфическая сыворотка меченная

Слайд 6Моноклональные антитела
Моноклональные антитела (МАТ) секретируются иммунными клетками, происходящими от единственной антителообразующей

клетки. Поэтому МАТ направлены только против определенного эпитопа иммуногенного вещества, так называемой "антигенной детерминанты". Для получения МАТ:
1.изолируют лимфоциты из селезенки иммунизированной мыши.
2.производят их слияние с опухолевыми клетками мыши (клетками миеломы).
Это необходимо, так как жизнеспособность антителопродуцирующих лимфоцитов в культуре ограничена лишь несколькими неделями. При слиянии с опухолевой клеткой возникают гибридные клетки, так называемые гибридомы, которые являются потенциально бессмертными.

Моноклональные антителаМоноклональные антитела (МАТ) секретируются иммунными клетками, происходящими от единственной антителообразующей клетки. Поэтому МАТ направлены только против

Слайд 7ПЦР
Это метод получения множества копий определенных фрагментов ДНК (генов) в биологическом

образце. Сущность метода заключается в многократном избирательном копировании определённого гена при помощи специальных ферментов в условиях in vitro. Получение копий конкретного участка ДНК.
ПЦРЭто метод получения множества копий определенных фрагментов ДНК (генов) в биологическом образце. Сущность метода заключается в многократном

Слайд 8Образование нуклеотидной цепи осуществляется ферментом ДНК-полимеразой. Для начала работы ферменту необходима

стартовая площадка - "праймеры" (затравки) - синтетические олигонуклеотиды длиной 15-20 нуклеотидов. Праймеров должно быть два:
прямой
обратный
Они комплементарны участкам ДНК-матрицы и именно фрагмент ДНК, ограниченный праймерами, будет многократно копироваться ДНК-полимеразой. Работа полимеразы заключается в последовательном добавлении нуклеотидов, комплементарных последовательности ДНК-матрицы. Тем самым в одном температурном цикле вновь синтезируется два новых фрагмента ДНК. Таким образом, за 25-35 циклов в пробирке накапливаются миллиарды копий участка ДНК, определенного праймерами.

Образование нуклеотидной цепи осуществляется ферментом ДНК-полимеразой. Для начала работы ферменту необходима стартовая площадка -

Слайд 9Диагностика
диагностика инфекционных заболеваний
диагностика наследственных заболеваний
выявление мутаций
генотипирование
клеточные технологии
создание генетических паспортов

Диагностикадиагностика инфекционных заболеванийдиагностика наследственных заболеванийвыявление мутацийгенотипированиеклеточные технологиисоздание генетических паспортов

Слайд 10Проточная лазерная цитометрия
Метод оптического измерения параметров клетки, клеточных органелл и процессов,

происходящих в клетке. Методика заключается в выявлении рассеяния света лазерного луча при прохождении через него клетки в потоке жидкости. При этом степень световой дисперсии позволяет получить представление о размерах и структуре клетки, кроме того учитывается уровень флуоресценции химических соединений, входящих в состав клетки (аутофлуоресценция) или внесенных в образец перед проведением проточной цитометрии.

Проточная лазерная цитометрия Метод оптического измерения параметров клетки, клеточных органелл и процессов, происходящих в клетке. Методика заключается

Слайд 11Проточная лазерная цитометрия
В ходе анализа на цитометре возможно определять 5-10 различных

параметров клетки:
размер
содержание ДНК, белков и липидов
антигенные свойстваи активность ферментов
возможны исследование клеточного цикла
мониторинг состояния вирусного процесса
количественный анализ внутриклеточных компонентов
количественные измерения путем дифференцировки интенсивности рассеяния/флуоресценции при различных длинах волн.
Проточная лазерная цитометрия В ходе анализа на цитометре возможно определять 5-10 различных параметров клетки:размерсодержание ДНК, белков и

Слайд 12Литература
Борисов А.Г. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАРУШЕНИЯ ФУНКЦИИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ 2013г.
Хаитов, Ярилин, Пинегин,

Руководство по клинической иммунологии
ЛитератураБорисов А.Г. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАРУШЕНИЯ ФУНКЦИИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ 2013г.Хаитов, Ярилин, Пинегин, Руководство по клинической иммунологии

Обратная связь

Если не удалось найти и скачать доклад-презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое TheSlide.ru?

Это сайт презентации, докладов, проектов в PowerPoint. Здесь удобно  хранить и делиться своими презентациями с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика