Слайд 1Современная лабораторная диагностика туберкулеза
Опережая время
Слайд 2Роберт Кох
Открытие 1882 года
Во времена Коха от
туберкулеза умирал
каждый
7 человек.
Успех открытию
принес 271-ый по
счету окрашенный
ученым
препарат
пораженной инфекцией
ткани.
Слайд 3В настоящее время известно, что туберкулез вызывают 7 видов микроорганизмов,
объединенных в микобактерии туберкулезного комплекса
( Mycobacterium tuberculosis complex ),
которые эволюционировали от общего предка
15 – 20 тысяч лет назад.
M. tuberculosis, M. africanum – выделены от людей
M. microti - от мелких млекопитающих (грызунов)
M. pinipedii - от морских млекопитающих
M. caprae, M. bovis- от диких и сельскохозяйственных животных, фермеров
canettii - выделен от людей в Африке.
Слайд 4Эти виды микобактерий отличаются друг от друга по патогенности, географическому
распространению, некоторым физиологическим свойствам, таким как морфология колоний, чувствительность к
антимикробным препаратам, эпидемиология и
спектр хозяев.
МБТК являются неподвижными, палочковидными бактериями с низкой скоростью роста и со специфическим строением клеточной стенки.
Слайд 5Победить возбудителя трудно. Пациентам приходится принимать много антибактериальных препаратов курсом
от полугода до двух лет.
Слайд 6Мокрота — секрет трахей и бронхов с примесью
слюны, характерный
при легочных формах
туберкулеза и ряде других болезней, отделяется
при
отхаркивании.
Слайд 7Показанием к исследованию мокроты
лабораторными методами являются признаки туберкулёза:
гипертермия;
длительный продуктивный
кашель;
изменения на флюорографии.
Слайд 8Что нужно знать при сборе мокроты?
Чтобы правильно сдать анализ мокроты,
необходимо:
Сдавать натощак, желательно рано утром часов в восемь.
Зубы перед сбором
мокроты не чистить.
Тщательно прополоскать рот тёплой и заранее прокипячённой водой.
Собирать следует в специально заготовленную стерильную
ёмкость.
Слайд 9Емкость для сбора мокроты должна отвечать
следующим требованиям :
иметь широкое
горло с диаметром более 3 см;
обладать высокой прозрачностью и прочностью;
быть
с крышкой, которая плотно и легко закрывается;
из материала, позволяющего без труда нанести данные
о пациенте;
стерильной и одноразовой.
Слайд 10Правила сбора мокроты на туберкулёз:
Для этой процедуры требуется отдельная комната
(кашлевая
кабина).
В помещении должна быть предусмотрена хорошая
вентиляция.
Необходимое количество мокроты 3 или
5 мл.
При сборе важно избегать касания ртом или руками краёв стерильной ёмкости. Это может исказить результаты исследования.
Слайд 11При сборе мокроты на туберкулёз представляет трудность именно откашливание отделяемого.
Существует несколько способов:
Первое что необходимо сделать просто попробовать покашлять.
Для создания
продуктивного кашля можно сделать 2-3 глубоких вдоха.
При успешном отхождении мокроты следует собрать её в чистый контейнер.
Слайд 12Если таким способом не получилось собрать материал, то можно
попробовать
постучать несколько раз в грудь.
Это поможет спровоцировать кашель.
Также следует
сделать два глубоких вдоха. Затем на несколько секунд
задержать дыхание, после чего медленно выдыхать. Далее вдохнуть в
третий раз и резко выдохнуть воздух.
При отсутствии эффекта можно провести обычные дыхательные упражнения.
В последнюю очередь сделать ингаляцию. В домашних условиях подышать
можно над тёплой водой. В неё добавляют 1 столовую ложку соли или
пищевой соды.
Слайд 13Мокроту для исследования на туберкулез необходимо доставить сразу же после
ее забора. В крайнем случае, она хранится не более семи
дней в холодильнике при температуре +3°С.
При транспортировке все контейнеры плотно упаковывают в
специальные биксы, фиксируя их в вертикальном положении.
Должна быть защита от УФ лучей.
А так же прилагается направление.
Слайд 17БАКТЕРИОСКОПИЯ В ДИАГНОСТИКЕ
Световой метод:
на сегодняшний день, относится к ведущему методу
диагностики туберкулеза. Он помогает визуально определить микобактерии, и сделать выводы
о том – есть он в образцах или нет.
Методика доступная и простая, экономичная и может применяться в любой клинике.
Мазок окрашивается специальными красителями;
Просматриваются на предметном стекле под микроскопом, используя иммерсионную систему.
В приготовленном мазке микобактерии, устойчивые к кислоте, приобретают красное окрашивание.
Результаты определяются на протяжении часа.
Слайд 18Туберкулезные микобактерии имеют вид тонких, слегка
изогнутых палочек различной длины
с утолщениями на
концах или посередине, располагаются группами и
поодиночке.
Слайд 19Люминесцентный метод:
Для этого исследования мокрота готовится так же, как для
обычной
микроскопии, но используется особый микроскоп, который выявляет
свечение микобактерий
желтым цветом, когда весь фон при этом окрашен в синий цвет.
Число кислотоустойчивых бактерий (КУБ), обнаруживаемых при
микроскопическом исследовании, важный показатель, характеризующий
степень эпидемической опасности больного и тяжесть заболевания.
Слайд 20Культуральные методы
Посев мокроты на туберкулёз проводится путём нанесения материала на
специальные питательные среды.
Для 100% выявления возбудителей необходимо всего 20
жизнеспособных КУМ. Растут бактерии в течение нескольких месяцев.
Среднее время бактериологического обследования, по классической методике, составляет 50 – 55 дней.
Слайд 21На питательной среде растут в виде колоний, которые отличаются своей
шероховатостью и грубоватостью на поверхности. С помощью этого метода судят
о наличии бактериовыделения.
Результат определяют по 3 баллам:
«+» говорит о скудной картине;
«++» свидетельствует об умеренном выделении;
«+++» обильное.
Последнее представляет собой наибольшую опасность как для самого человека, так и окружающих его людей.
Слайд 22Ускоренные методы
выявления возбудителя
Культуральные
Молекулярно-
генетические
BACTEC MGIT 960 7-14 дней
Культивирование на жидких
питательных средах
с
автоматической регистрацией
роста культуры
Выявление ДНК возбудителя
в диагностическом материале
ПЦР 1-2 дня
Слайд 25 Определение ЛЧ МБТ методом абсолютных концентраций на среде Левенштейна-Йенсена
к
4 ПТП 1-го ряда: к изониазиду, рифампицину, этамбутолу, стрептомицину;
к 7
ПТП 2-го ряда: к канамицину, офлоксацину, этионамиду, капреомицину, циклосерину, ПАСКу, амикацину.
Определение ЛЧ МБТ в системе BACTEC MGIT
к 5 ПТП 1-го ряда: к изониазиду, рифампицину, этамбутолу, стрептомицину, пиразинамиду;
к 8 ПТП 2-го ряда: к амикацину, капреомицину, офлоксацину, левофлоксацину, этионамиду, канамицину, ПАСКу, рифабутину.
Слайд 26Молекулярно-генетические методы :
ПЦР (полимеразная цепная реакция) на туберкулёз – это
точный анализ,
способный выявить палочку Коха за несколько часов.
Диагностика
основана на методах генной инженерии. В лаборатории
выделяют клетку ДНК, при помощи генно-молекулярных тестов определяют тип возбудителей.
Слайд 27
Картриджная технология GeneXpert MTB/RIF
Использование этой системы позволяет непосредственно из нативной
мокроты в очень короткие сроки (в течение 2,5 часов) одновременно
проводить выявление ДНК МБТ и с высокой достоверностью определять устойчивость МБТ к рифампицину.
После регистрации анализа фтизиатр может назначить больному режим лечения.
Это очень важно для дальнейшего хода выздоровления.
Слайд 28Струйная система GeneXpert Dx – ПЦР в режиме реального времени
Слайд 29 Задачи молекулярно-генетических методов
исследования для фтизиатрии
- выявление и идентификация
микобактерий туберкулеза
- определение лекарственной чувствительности штаммов
- типирование штаммов
Внедрение ПЦР позволило:
- значительно сократить сроки (до одного дня) подтверждения диагноза туберкулеза
- контролировать эффективность химиотерапии у больных туберкулезом легких с отрицательными результатами бактериоскопии и посева.