Современные методы иммунодиагностики инфекционных заболеваний

защитных функций организма.
Методы иммунодиагностики основаны на специфическом взаимодействии антигена

с антителами, иногда в присутствии других (индикаторных) компонентов реакции.
Иммунодиагностика наиболее широко применяется в области инфекционной патологии, аллергологии, гематологии, в онкологии и при переливании крови, а также при изучении трансплантационного иммунитета и аутоиммунных заболеваний.

этиологическую или патогенетическую роль.
Выявление антигенов имеет важное значение в

иммунодиагностике инфекционных (бактериальных, вирусных, грибковых, паразитарных) заболеваний. 

один из компонентов которой несёт радиоактивную метку. Метод позволяет обнаруживать

как антигены, так и антитела и определять их концентрацию в исследуемой пробе.

Этот метод основан на использовании реагентов, меченных флюоресцентным красителем. Антитела

чаще всего метят флюоресцеина изотиоцианатом. Меченые антитела связываются с антигеном, образуя комплексы, которые можно выявить с помощью флюоресцентной микроскопии.

Он основан на непосредственном связывании антигена, сорбированного на твёрдой подложке,

с мечеными антителами. Реакцию оценивают с помощью флюоресцентного микроскопа.
Метод непрямой иммунофлюоресценции позволяет выявить антитела к известному антигену. Антиген, сорбированный на твёрдой подложке, связывается с немечеными антителами. Комплексы антиген-антитело выявляются с помощью меченых антител к иммуноглобулинам.
Метод конкурентной иммунофлюоресценции основан на связывании стандартного меченого и присутствующего в исследуемой пробе немеченого антигенов с антителами, сорбированными на твёрдой подложке. Поскольку меченый и немеченый антигены конкурируют за связывание с антителами, по количеству связанного меченого антигена можно определить концентрацию антигена в исследуемой пробе.

образуются высокомолекулярные комплексы антиген-антитело, которые выпадают в виде осадка в

растворе или откладываются в виде полос преципитации в геле.
Использование очищенных антигенов позволяет определить концентрацию антител в исследуемой пробе.

и тому же количеству антител выпадает разное количество преципитата. Можно

построить график - кривую преципитации, - который отражает зависимость между концентрацией антигена и количеством преципитата: при избытке антител количество преципитата возрастает с увеличением концентрации антигена; в зоне эквивалентности (количество антигена примерно равно количеству мест связывания на антителах) образуется максимальное количество преципитата; при избытке антигена - количество преципитата уменьшается с увеличением концентрации антигена.

радиальная иммунодиффузия. Суть метода заключается в следующем: 1) в тонком слое

геля, содержащего антитела в известной концентрации, вырезают лунки; 2) антиген, помещенный в эти лунки, диффундирует в гель; 3) вокруг лунок образуются кольца преципитации, диаметр которых пропорционален концентрации антигена. Метод обычно применяется для определения концентрации иммуноглобулинов.
Двойная радиальная иммунодиффузия. Суть метода заключается в следующем: 1) в тонком слое геля вырезают лунки для антигена и антител; 2) антиген и антитела диффундируют навстречу друг другу, образуя линии преципитации на некотором расстоянии от лунок. По расстоянию от лунки с антигеном до линии преципитации можно определить концентрацию антигена.

в основном для исследования сывороточных белков. Суть метода заключается в

следующем: 1) в лунку, вырезанную в тонком слое геля, помещают исследуемую сыворотку; 2) проводят электрофоретическое разделение белков сыворотки; 3) в геле вырезают бороздку, параллельную направлению миграции белков при электрофорезе, и заполняют её смесью антител к сывороточным белкам; 4) разделённые при электрофорезе белки (антигены) и антитела диффундируют навстречу друг другу. В местах связывания антител с антигенами образуются дуги преципитации.

антител помещают в лунки, расположенные на противоположных концах пластины с

гелем; 2) вдоль линии, соединяющей лунки, пропускают постоянный электрический ток; 3) в электрическом поле антитела и антигены быстро перемещаются по направлению друг к другу; 4) в месте связывания антигенов с антителами образуются линии преципитации.
Встречный электрофорез применяют в тех случаях, когда антигены и антитела обладают разной электрофоретической подвижностью. Этот метод позволяет быстро определить антигены или антитела в исследуемой пробе и применяется в экспресс-диагностике инфекционных заболеваний.

антигенов на поверхности клеток или частиц и полуколичественного определения антител

к этим антигенам.
Суть методов заключается в следующем: при связывании клеток или частиц, покрытых антигеном, с антителами образуются крупные агрегаты. Для определения титра антител к поверхностным антигенам клеток или к антигенам, сорбированным на поверхности частиц, смешивают известное количество клеток или частиц, покрытых антигеном, с разными разведениями исследуемой пробы, например, сыворотки.

крови и антител к этим антигенам.
Суть метода заключается в

следующем: серийные разведения исследуемой пробы (например, сыворотки) смешивают с клетками, за титр антител принимают величину, обратную максимальному разведению сыворотки, которое вызывает агглютинацию.
Этот метод более чувствителен, чем методы, основанные на преципитации, поскольку при равной концентрации антигена объем агглютината больше объема преципитата.
Реакция агглютинации не зависит от температуры, если только не обусловлена холодовыми агглютининами, которые более эффективны при температуре ниже 37°C.

(например, латекса), покрытых антигеном. Для определения титра антител серийные разведения

сыворотки в физиологическом растворе смешивают с известным количеством покрытых антигеном клеток или частиц.
Реакция непрямой агглютинации - чувствительный метод, позволяющий определять растворимые антигены в низких концентрациях.

антителами; 2) к образовавшимся комплексам антиген-антитело добавляют известное количество комплемента, который

связывается с этими комплексами; 3) количество несвязанного комплемента оценивают в реакции гемолиза с эритроцитами барана.

относящийся к бета-глобулинам. C-реактивный белок, как и другие белки острой

фазы воспаления, появляется в сыворотке вскоре после повреждения тканей и начала воспаления. Повышение уровня C-реактивного белка наблюдается при острых бактериальных и вирусных инфекциях, инфаркте миокарда, злокачественных новообразованиях и аутоиммунных заболеваниях.

агглютинацию эритроцитов при 4°C. Холодовые агглютинины появляются при некоторых заболеваниях,

например, при микоплазменной пневмонии, реже при гриппе, аденовирусной инфекции и других острых респираторных заболеваниях, а также при сонной болезни. Диагностически значимым считается выявление холодовых агглютининов в титре 1:32 или четырёхкратное повышение их титра в течение 7-14 суток.

при многих инфекционных заболеваниях: сальмонеллёзе, паратифе, бруцеллёзе, туляремии, риккетсиозе и

других. Титр этих антител можно определить в реакции агглютинации инактивированных бактерий при добавлении разных разведений сыворотки. Сыворотку для исследования обычно собирают дважды: в период разгара и в период выздоровления (через 10-21 суток). Диагностически значимым считают четырёхкратное повышение титра антител.

типоспецифическим капсульным полисахаридам, видимое при световой микроскопии. Эту реакцию можно

наблюдать при добавлении антител, направленных против полисахаридов клеточной стенки Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae и Neisseria meningitidis, к этим бактериям.

прежде всего сепсиса и менингита, вызванных грамотрицательными бактериями. Метод основан

на том, что при добавлении бактериальных эндотоксинов жидкий лизат амебоцитов меченосца превращается в гель.