Анализ нуклеиновых кислот

ДНК или при повышении pH. Расхождение цепей происходит из-за разрушения слабых

водородных связей и плоскостных взаимодействий между основаниями.
На денатурацию также влияют: ионы одно- и двухвалентных металлов, белки, нейтрализующие отрицательные заряды фосфатных групп.

Реассоциация ДНК
восстановление двухцепочечной структуры ДНК (может происходить даже при полном расхождении цепей)

в ближнем ультрафиолете (260 нм). Это поглощение обусловлено π→π переходом,

момент перехода которого лежит в плоскости основания.

В ДНК эти дипольные моменты переходов упорядочены определенным образом из-за стопкообразного расположения оснований.

Это приводит к так называемому гипохромному эффекту, т.е. уменьшению поглощения в полосе по сравнению с поглощением хаотически расположенной системой оснований(например, денатурированной ДНК).

Гипохромный эффект (Впервые теорию гипохромного эффекта в ДНК предложил И.Тихонов в 1960 году)

260 нм. (гиперхромный эффект)
Поглощение УФ-света различается для:

молекул нуклеиновых кислот,

имеющих вторичную структуру (двуцепочечной ДНК);

денатурированных молекул нуклеиновых кислот (одноцепочечная ДНК в виде статистического клубка);

свободных нуклеотидов.

ИЗМЕНЕНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПРИ ПЛАВЛЕНИИ ДНК.

нм (~ на 40%). Это явление называется гиперхромным эффектом и

основывается на том, что в результате дезэкранирования азотистых оснований при расплетании происходит увеличение степени поглощения раствором ДНК.

Температурой плавления называют ту температуру, при которой разрушается половина спиральной структуры. Т пл. зависит от длины молекулы и от нуклеотидного состава. Молекулы с высоким содержанием G≡C пар имеют более высокие Т пл. Также Т пл. зависит и от ионной силы раствора, поскольку ионы стабилизируют структуру ДНК. Чем выше ионная сила, тем выше и Т пл.

других организмов. Представляет собой кольцевую двухцепочечную молекулу ДНК, закрученную в суперспираль.

Размеры плазмид необычайно широко варьируют-от 2 тыс. до нескольких сотен тысяч пар оснований; некоторые из них содержат 1-3 гена, другие достигают 10-20% размера бактериальной хромасомы.
Плазмиды широко используются в генной инженерии для переноса генетической информации и генетических манипуляций. Для этого создаются искусственные плазмиды — ВЕКТОРЫ, состоящие из частей, взятых из разных генетических источников, а также из искусственно созданных фрагментов ДНК.

их лизис
Очистка плазмидной ДНК