АО Медицинский университет Астана Кафедра урологии и андрологии Лабораторная

Выполнила: Байгожа Г. 527 ОМ
Проверил: Шерханов Р. Т.






Астана 2016

АО «Медицинский университет Астана» Кафедра урологии и андрологии Лабораторная диагностика заболеваний передающиеся половым путем

ЗППП

(ИППП) (англ. Sexually Transmitted Diseases (STD)) — под этими терминами

понимают инфекционные заболевания, наиболее частым путём заражения которыми является половой контакт.

Диагностика
Для диагностики используется осмотр пациента, выявление клинических симптомов (боль при мочеиспускании, выделения из половых органов) и анализ мазков и образцов крови. Физические симптомы (боль, выделения) для некоторых заболеваний (остроконечные кондиломы) могут отсутствовать вовсе. Все инструментальные методы исследования обладают погрешностью, поэтому диагноз ставится обычно на основании нескольких видов исследований.

(прямая и люминесцентная),
культуральный метод (нанесение образца на питательную поверхность,

затем анализ лекарственной устойчивости),
выявление антигенов к возбудителю (методами ИФА — иммунно-ферментного анализа и ПИФ — прямой иммунофлюоресценцией),
выявление ДНК возбудителя (методом ПЦР — полимеразной цепной реакции),
выявление антител в крови (иммунного ответа организма на возбудителя).

можно разделить на несколько основных групп.
Первая группа – микроскопия выделений

из мочеиспускательного канала, слизистой пробки цервикального канала, эпителия стенки влагалища, уретры и т.д., все то, что по-простому называют «мазок». Таким методом можно обнаружить: гонококки, трихомонады, гарднереллы, реже хламидии и уреаплазмы.
Вторая группа методов связана с исследованиями крови. Существуют различные способы, нацеленные на выявление возбудителя ЗППП или его «следов» (антигенов или антител) в крови человека
Третья группа диагностических методов – это культуральные методы, или посевы. Смысл этих методов исследования заключается в следующем. Исследуемый материал (как правило, выделения или соскобы из уретры или влагалища) наносится на питательную для микроорганизмов среду. Через сутки на ней вырастает колония микроорганизмов. По виду, цвету, форме и консистенции этой колонии можно точно идентифицировать возбудителя, а также провести определение его чувствительности к различным антибиотикам.

Эти методы основаны на обнаружении ДНК микроорганизмов в исследуемом материале.

Не нужно путать их с ДНК-диагностикой человека, которая проводится для определения родства или различных генетических заболеваний, все это не имеет никакого отношения к нашему разговору.
Наиболее распространенным методом ДНК диагностики является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Под действием ряда реактивов ДНК возбудителя многократно увеличивается и становится заметной для оборудования, проводящего диагностику. Достаточно находиться всего нескольким возбудителям в пробирке, чтобы тест дал положительный результат. Точность метода ПЦР на сегодняшний день составляет 97% - высочайшая точность по сравнению с микроскопией, которая не всегда может дать правильный ответ даже на 60%.
Еще одним положительным моментом ПЦР-диагностики относится то, что может проводиться исследование любого материала - крови, мочи, соскобов и выделений.

Лабораторная диагностика сифилиса
Для анализа на выявление бледных трепонем

исследуют отделяемое твердого шанкра, розеол, папул, любых эрозий и язв, которые могут иметь сифилитическое происхождение.
Серологический анализ крови
Этот анализ основан на поиске антител, которые вырабатываются организмом для борьбы с бледной трепонемой. Для анализа используют кровь больного, освобожденную от кровяных шариков — сыворотку (серум), поэтому анализ и называется серологическим. Этот анализ проводится при массовых диспансеризациях населения, трижды в течение беременности и в некоторых других случаях.
Реакция Вассермана (РВ)
Для пробы на реакцию Вассермана исследуется кровь из локтевой вены. При заражении больного сифилисом проба на реакцию Вассермана дает положительный результат не сразу, а только через 6—7 недель.
Исходя из этого, первичный сифилис, принято делить на сероотрицательную (серонегативную) и сероположительную (серопозитивную) стадии.
При сероотрицательной стадии первичного сифилиса отрицательная реакция Вассермана не может служить показателем отсутствия болезни и для того, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз, используются более точные методы диагностики.
Положительная реакция Вассермана может быть разной степени выраженности, условно степень выраженности реакции Вассермана обозначают знаком «+» с определенным индексом:
1+ 2+ — результат слабо положительный
3+ — положительный
4+ — резко положительный
Анализ на РВ может дать и ЛОЖНЫЕ положительные результаты при беременности, после перенесенного и полностью вылеченного сифилиса, при некоторых других обстоятельствах.

которые берут от зараженного сифилисом кролика, при взаимодействии с сывороткой

больного сифилисом человека дают желто-зеленоватое свечение при микроскопировании в люминесцентном микроскопе. Если сифилиса у испытуемого человека нет, то свечения не наблюдается. Если же свечение выявлено, то его интенсивность оценивается так же, как при пробе на реакцию Вассермана:
1+ или отсутствие свечения — отрицательная проба
2+, 3+, 4+ — положительная проба
Важно то, что РИФ дает положительный результат на более ранних стадиях сифилиса, чем РВ, из-за ее большей чувствительности.
Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
Эта проба позволяет распознать ложноположительный результат РВ, который иногда может быть у здорового человека, поэтому обычно при положительном анализе на РВ его подтверждают или опровергают при помощи анализа на РИБТ.

посева флоры генитальных выделений.
Посев флоры. Суть этой методики состоит в

помещении исследуемого материала на специальные питательные среды, пригодные для роста микроорганизмов. В качестве лабораторного материала могут использоваться выделения из мочеиспускательного канала, шейки матки, влагалища, глотки и прямой кишки, причем для точной диагностики гонореи требуется минимальное количество выделений. Точность метода посева очень высока — 95—100%, и единственным недостатком этого метода является длительность анализа: исследование занимает около недели.
Кроме посева, может использоваться метод Полимеразной цепной реакции (ПЦР), представляющий собой ДНК-диагностику возбудителя гонореи
ПЦР хорошо зарекомендовала себя в диагностике хронических и бессимптомных инфекций, то есть именно в тех случаях, когда традиционные методы диагностики гонореи оказываются бессильны. И, наоборот, при обильных (особенно гнойных) выделениях точность ПЦР-метода существенно снижается. Достоинства метода ПЦР — его высокая точность (90—95%) и быстрота исполнения: результаты анализов готовы уже через 1—2 дня.
Для диагностики гонореи применяется также метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ).
Это исследование проводится быстро, но точность его менее высока (около 70%), поэтому анализ на посев или ПЦР представляется более предпочтительным.

из уретры либо из секрета простаты. Мазок выявляет болезнь лишь

при наличии воспалительных изменений на каком-либо участке. Увеличение объема лейкоцитов сигнализирует о вероятности присутствия заболевания, но точно подтвердить этот факт не в состоянии
Реакция иммунофлюоресценции(РИФ) базируется на исследовании биологического материала из уретры. Его окрашивают особыми реагентами и изучают под флюоресцентным микроскопом. Имеющиеся в материале хламидии выдают себя определенным свечением. Данный метод более точен, чем вышеуказанные. Выявляются порядка 70 случаев заболевания в активной стадии развития из ста вероятных, правда, одного типа. К тому же, материала при этом требуется много..
Иммуноферментный анализ (ИФА) обнаруживает в крови антитела IgG, IgA, IgM, которые вступают в противоборство с хламидиями. Появление данных антител в организме является свидетельством того, что имеется инфицирование хламидиозом. Данный анализ крови на хламидиоз представляет собой взаимодействие биологического материала человека со специальными препаратами, в состав которых входят хламидийные антигены. В процессе реакции формируется тесный комплекс с антителами. В качестве биологического материала может выступать соскоб с различных участков и кровь.Данный анализ крови на хламидиоз признан медиками, ведь он позволяет выявить и саму болезнь, и этап ее распространения в организме с большой долей точности. Антитела появляются у человека в первые две-три недели после заражения. Они отличаются от тех, что проявляются на последующих стадиях. Поэтому ИФА легко устанавливает острую и хроническую форму хламидиоза, рецидив и повторное заражение. Точность этого анализа приближается к 60 процентам. Особенно он незаменим при диагностике артритов, пневмоний, глазных болезней, которые могут иметь хламидийную этиологию.

исследования считается одним из наиболее успешных и достоверных. Материала для

его проведения нужно мало, а эффективность исследования высока. ПЦР выявляет как хламидиоз, так и остальные половые инфекции. Он помогает установить точный диагноз. Правда, в ряде случаев возникает «ложное срабатывание». Поэтому анализ либо регулярно повторяют, либо сочетают с другими методами диагностики.
Культуральный метод — посев — выявляет чувствительность к антибиотикам. Собранный биологический материал высевают в особую среду и выращивают. Объем и признаки микробов дают полную картину о развитии болезни и ее возбудителе. Данный анализ относится к дорогостоящим и трудоемким. Но эти сложности компенсируются высокой точностью результата, почти 90 процентов. Посев обнаруживает хламидий и указывает, какие лекарства в состоянии справится с ними в организме пациента. Следует помнить, однако, что хламидиоз в хронической форме посевом выявляется достаточно слабо.

иммуноблоттинг .
Диагноз ВИЧ-инфекции ставят при обнаружении антител к ВИЧ

с помощью твердофазного иммуноферментного анализа и иммуноблоттинга. Среди других способов лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции следует отметить выделение вируса из крови, выявление вирусных антигенов и вирусной РНК, Такие признаки, как снижение числа лимфоцитов CD4 и изменение соотношения CD4/CD8 , также указывают на ВИЧ-инфекцию, однако неспецифичны для нее и наблюдаются и при других заболеваниях. Наиболее распространенный метод лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции - твердофазный иммуноферментный анализ. Его чувствительность и специфичность достигает 99%. Ложноположительные результаты чаще всего наблюдаются в группах населения с низкой распространенностью ВИЧ. Они могут быть обусловлены вакцинацией, например против гриппа . Положительный результат, полученный с помощью твердофазного иммуноферментного анализа, должен быть подтвержден результатами иммунноблоттинга. Хотя иммунноблоттинг - высокочувствительный и специфичный метод выявления антител к ВИЧ, из-за высокой стоимости и длительности для массовых исследований он не применяется. Результаты иммунноблоттинга считаются положительными, если выявляются антитела хотя бы к 3 белкам, один из которых кодируется генами env , другой - генами gag , третий - генами pol . Если обнаруживаются антитела к одному или двум белкам, результат считается сомнительным и требует подтверждения.

к белкам р24 , р31 , gp4l и gpl20/gp160 .
Определение

антигена р24 . Твердофазный иммуноферментный анализ позволяет выявить даже несколько пикограммов антигена р24. Образование комплексов между р24 и эндогенными антителами снижает чувствительность метода. Для расщепления иммунных комплексов их обрабатывают кислотой. Этот метод используется при обследовании больных на ранней стадии ВИЧ-инфекции, когда антитела к ВИЧ отсутствуют.
Выделение вируса из крови - очень чувствительный и специфичный способ диагностики ВИЧ-инфекции. Вирус можно также определить в культуре лимфоцитов и моноцитов больного. Поскольку эти методы сложны и требуют больших материальных затрат, в настоящее время они применяются лишь в научных целях.
Полимеразная цепная реакция - относительно новый метод, основанный на амплификации ДНК или РНК вируса. Основное преимущество этого метода заключается в его чувствительности, позволяющей определить минимальное количество нуклеиновых кислот. Однако высокая чувствительность не позволяет применять этот метод для исследования проб, загрязненных другими микробами. В связи с этим полимеразную цепную реакцию проводят лишь в специализированных лабораториях, строго соблюдая условия стерильности. Полимеразная цепная реакция относится к количественным методам исследования вирусного генома, поэтому может быть использована для оценки эффективности лечения.
Другой метод анализа ДНК, так называемый метод разветвленной ДНК. основан на применении синтетической ДНК, которая содержит один участок, комплементарный фрагменту вирусной РНК, и множество участков, комплементарных искусственно созданному олигонуклеотидному зонду, меченному люминесцентным красителем. Этот метод менее чувствителен, чем полимеразная цепная реакция, однако более прост, а применение хемилюминометра позволяет быстро оценить его результаты.