Разделы презентаций


ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Содержание

Измерение флуоресценции зондов

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ АНАЛИЗ ДАЕТ ВОЗМОЖНОСТЬ ИССЛЕДОВАТЬ ПОДВИЖНОСТЬ ФОСФОЛИПИДОВ В

МЕМБРАНЕ, ОЦЕНИТЬ МИКРОВЯЗКОСТЬ МЕМБРАН
ПРИМЕРЫ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫХ ЗОНДОВ
пирен

ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ АНАЛИЗ ДАЕТ ВОЗМОЖНОСТЬ ИССЛЕДОВАТЬ ПОДВИЖНОСТЬ ФОСФОЛИПИДОВ В МЕМБРАНЕ, ОЦЕНИТЬ МИКРОВЯЗКОСТЬ МЕМБРАН ПРИМЕРЫ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫХ ЗОНДОВпирен

Слайд 2Измерение флуоресценции зондов

Измерение флуоресценции зондов

Слайд 5Влияние препаратов на спектры флуоресценции пирена в мембранах эритроцитов

Влияние препаратов на спектры флуоресценции пирена в мембранах эритроцитов

Слайд 6СПИНОВЫЕ ЗОНДЫ
НИТРОКСИЛЬНЫЕ РАДИКАЛЫ
устойчивы в широком интервале температур (до 100-200

СС)
способны вступать в хим. реакции без потери парамагнитных свойств

хорошо растворимы в водных и органических средах.
СПИНОВЫЕ ЗОНДЫНИТРОКСИЛЬНЫЕ РАДИКАЛЫ устойчивы в широком интервале температур (до 100-200 СС) способны вступать в хим. реакции без

Слайд 7СПИНОВЫЙ ЗОНД ТЕМПО

СПИНОВЫЙ ЗОНД ТЕМПО

Слайд 8Химическая "прививка" метки к макромолекулам с реакционно способными группами

Химическая

Слайд 9Реакции макромолекул с бирадикалами и спиновыми ловушками.

Спиновая ловушка -

соединение, образующее стабильные радикалы при взаимодействии с активными радикалами.

Реакции макромолекул с бирадикалами и спиновыми ловушками. Спиновая ловушка - соединение, образующее стабильные радикалы при взаимодействии с

Слайд 10Спектры ЭПР
Спектры ЭПР нитроксильных радикалов в вязких средах при временах

корреляции вращения
5·10-10 с (a)
2·10-9 с (б)
1·10-7 с (в).

Спектры ЭПРСпектры ЭПР нитроксильных радикалов в вязких средах при временах корреляции вращения 5·10-10 с (a)2·10-9 с (б)1·10-7

Слайд 12ИЗМЕНЕНИЕ СПЕКТРА ЭПР ПРИ УМЕНЬШЕНИИ МИКРОВЯЗКОСТИ η


Н
Н

I

ИЗМЕНЕНИЕ СПЕКТРА ЭПР ПРИ УМЕНЬШЕНИИ МИКРОВЯЗКОСТИ ηННI

Слайд 13ДВА СПОСОБА ПРИКРЕПЛЕНИЯ СПИНОВОЙ МЕТКИ К МОЛЕКУЛЕ ФОСФОЛИПИДА И РАЗЛИЧИЕ

СПЕКТРОВ ЭПР


ДВА СПОСОБА ПРИКРЕПЛЕНИЯ СПИНОВОЙ МЕТКИ К МОЛЕКУЛЕ ФОСФОЛИПИДА И РАЗЛИЧИЕ СПЕКТРОВ ЭПР

Слайд 14 Спектры 2Н-ЯМР
димиристоилфофатидилхолина,
дейтерированного по разным
положениям ацильной цепи


ЯМР

Спектры 2Н-ЯМР димиристоилфофатидилхолина, дейтерированного по разным положениям ацильной цепи ЯМР

Слайд 15Величины подвижности Т1 для различных атомов углерода в молекуле фосфатидилхолина

в составе мембраны при температуре выше критической (рассчитаны по данным

ЯМР-спектроскопии)
Величины подвижности Т1 для различных атомов углерода в молекуле фосфатидилхолина в составе мембраны при температуре выше критической

Слайд 16БЕЛКИ МЕМБРАН

БЕЛКИ  МЕМБРАН

Слайд 171.СОДЕРЖАНИЕ БЕЛКОВ В МЕМБРАНЕ
2. КЛАССИФИКАЦИЯ МЕМБРАННЫХ БЕЛКОВ
3. ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВ В

МЕМБРАНЕ
4. БЕЛОК – ЛИПИДНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ
5. ФУНКЦИИ МЕМБРАННЫХ БЕЛКОВ

1.СОДЕРЖАНИЕ БЕЛКОВ В МЕМБРАНЕ2. КЛАССИФИКАЦИЯ МЕМБРАННЫХ БЕЛКОВ3. ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВ В МЕМБРАНЕ4. БЕЛОК – ЛИПИДНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ5. ФУНКЦИИ МЕМБРАННЫХ

Слайд 18СОДЕРЖАНИЕ БЕЛКОВ В МЕМБРАНАХ
МЕМБРАНЫ СОДЕРЖАТ ОТ 20 ДО 80% БЕЛКА

ПО ВЕСУ. В РАЗНЫХ МЕМБРАНАХ СОДЕРЖАНИЕ БЕЛКА РАЗЛИЧНО.
В МЕМБРАНАХ МИТОХОНДРИЙ

БЕЛКА ДО 75%

В МИЕЛИНОВОЙ ОБОЛОЧКЕ ОКОЛО 25%

СОДЕРЖАНИЕ БЕЛКОВ В МЕМБРАНАХМЕМБРАНЫ СОДЕРЖАТ ОТ 20 ДО 80% БЕЛКА ПО ВЕСУ. В РАЗНЫХ МЕМБРАНАХ СОДЕРЖАНИЕ БЕЛКА

Слайд 19КЛАССИФИКАЦИЯ МЕМБРАННЫХ БЕЛКОВ
основана на прочности взаимодействия белка с мембраной
Топологическая классификация


Биохимическая классификация
основана на локализации белка по отношению к липидному

бислою



КЛАССИФИКАЦИЯ МЕМБРАННЫХ БЕЛКОВоснована на прочности взаимодействия белка с мембранойТопологическая классификация Биохимическая классификация основана на локализации белка по

Слайд 20ТОПОЛОГИЧЕСКАЯ КЛАССИФИКАЦИЯ БЕЛКОВ
А- МОНОТОПИЧЕСКИЕ БЕЛКИ


Б – БИТОПИЧЕСКИЕ


В - ПОЛИТОПИЧЕСКИЕ

ТОПОЛОГИЧЕСКАЯ КЛАССИФИКАЦИЯ БЕЛКОВА- МОНОТОПИЧЕСКИЕ БЕЛКИБ – БИТОПИЧЕСКИЕВ - ПОЛИТОПИЧЕСКИЕ

Слайд 21Связывание белков с мембраной за счёт
единичной трансмембранной альфа-спирали
множественных трансмембранных

альфа-спиралей
бета-складчатой структуры

Связывание белков с мембраной за счёт единичной трансмембранной альфа-спиралимножественных трансмембранных альфа-спиралейбета-складчатой структуры

Слайд 22БЕЛКИ МЕМБРАН
ИНТЕГРАЛЬНЫЕ
ПЕРИФЕРИЧЕСКИЕ
БИОХИМИЧЕСКАЯ КЛАССИФИКАЦИЯ


МЕНЯЮТ СВОЙ СТАТУС, ПРИКРЕПЛЯЯСЬ К МЕМБРАНЕ НА

ОПРЕДЕЛЕННОЕ ВРЕМЯ
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ СИГНАЛЫ СТИМУЛИРУЮТ ИХ АССОЦИАЦИЮ С МЕМБРАНОЙ, НАПРИМЕР,

ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ

АМФИПАТИЧЕСКИЕ


ГЛУБОКО ПРОНИКАЮТ В БИСЛОЙ

ИМЕЮТ МЕНЬШУЮ ГЛУБИНУ ПРОНИКНОВЕНИЯ, БОЛЕЕ СЛАБО СВЯЗАНЫ С БИСЛОЕМ, ЧАСТО ГЛИКОЗИЛИРОВАНЫ

БЕЛКИ МЕМБРАНИНТЕГРАЛЬНЫЕПЕРИФЕРИЧЕСКИЕБИОХИМИЧЕСКАЯ КЛАССИФИКАЦИЯ МЕНЯЮТ СВОЙ СТАТУС, ПРИКРЕПЛЯЯСЬ К МЕМБРАНЕ НА ОПРЕДЕЛЕННОЕ ВРЕМЯ СПЕЦИФИЧЕСКИЕ СИГНАЛЫ СТИМУЛИРУЮТ ИХ АССОЦИАЦИЮ

Слайд 23ДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВ НА ИНТЕГРАЛЬНЫЕ И ПЕРИФЕРИЧЕСКИЕ ОПРЕДЕЛЯЕТСЯ
СТРУКТУРОЙ
КОЛИЧЕСТВОМ И РАСПОЛОЖЕНИЕ ГИДРОФОБНЫХ

ОСТАТКОВ

ДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВ НА ИНТЕГРАЛЬНЫЕ И ПЕРИФЕРИЧЕСКИЕ ОПРЕДЕЛЯЕТСЯСТРУКТУРОЙКОЛИЧЕСТВОМ И РАСПОЛОЖЕНИЕ ГИДРОФОБНЫХ ОСТАТКОВ

Слайд 24МЕМБРАННЫЕ БЕЛКИ СОСТОЯТ ИЗ ДВУХ ЧАСТЕЙ:
УЧАСТКИ, БОГАТЫЕ ПОЛЯРНЫМИ АМИНОКИСЛОТНЫМИ ОСТАТКАМИ,

ОБРАЩЕННЫЕ ВО ВНЕКЛЕТОЧНУЮ СРЕДУ ЧАСТО ГЛИКОЗИЛИРОВАНЫ, ЧТО УВЕЛИЧИВАЕТ ИХ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ

К ПРОТЕОЛИЗУ
УЧАСТКИ, ОБОГАЩЕННЫЕ НЕПОЛЯРНЫМИ ОСТАТКАМИ АМИНОКИСЛОТ



МЕМБРАННЫЕ БЕЛКИ СОСТОЯТ ИЗ ДВУХ ЧАСТЕЙ:УЧАСТКИ, БОГАТЫЕ ПОЛЯРНЫМИ АМИНОКИСЛОТНЫМИ ОСТАТКАМИ, ОБРАЩЕННЫЕ ВО ВНЕКЛЕТОЧНУЮ СРЕДУ ЧАСТО ГЛИКОЗИЛИРОВАНЫ, ЧТО

Слайд 25ИНТЕГРАЛЬНЫЕ БЕЛКИ
1- ГЛИКОФОРИН,
2 – РЕЦЕПТОР АДРЕНАЛИНА

ИНТЕГРАЛЬНЫЕ БЕЛКИ  1- ГЛИКОФОРИН, 2 – РЕЦЕПТОР АДРЕНАЛИНА

Слайд 26ПРИМЕРЫ ИНТЕГРАЛЬНЫХ БЕЛКОВ, СОДЕРЖАЩИХ ОТ 1 ДО 12 ТРАНСМЕМБРАННЫХ ДОМЕНОВ
С

БИСЛОЕМ КОНТАКТИРУЮТ НЕПОЛЯРНЫЕ УЧАСТКИ БЕЛКОВ

ПРИМЕРЫ ИНТЕГРАЛЬНЫХ БЕЛКОВ, СОДЕРЖАЩИХ ОТ 1 ДО 12 ТРАНСМЕМБРАННЫХ ДОМЕНОВС БИСЛОЕМ КОНТАКТИРУЮТ НЕПОЛЯРНЫЕ УЧАСТКИ БЕЛКОВ

Слайд 271. КОЛИЧЕСТВО ГИДРОФИЛЬНЫХ АМИНОКИСЛОТ ПРИМЕРНО ТАКОЕ ЖЕ, КАК И В

ОБЫЧНЫХ ВОДОРАСТВОРИМЫХ БЕЛКАХ, НО В ВОДЕ ОНИ РАСТВОРЯЮТСЯ ОЧЕНЬ ПЛОХО.
ПРИЧИНА:ГИДРОФОБНЫЕ

АМИНОКИСЛОТНЫЕ ОСТАТКИ СКОНЦЕНТРИРОВАНЫ В ГИДРОФОБНЫЕ ДОМЕНЫ, А НЕ РАССЕЯНЫ ВДОЛЬ ПОЛИПЕПТИДНОЙ ЦЕПИ.
НЕКОТОРЫЕ БЕЛКИ УВЕЛИЧИВАЮТ ГИДРОФОБНОСТЬ, КОВАЛЕНТНО СОЕДИНЯЯСЬ С ЛИПИДАМИ МЕМБРАН

ОСОБЕННОСТИ ИНТЕГРАЛЬНЫХ БЕЛКОВ

1. КОЛИЧЕСТВО ГИДРОФИЛЬНЫХ АМИНОКИСЛОТ ПРИМЕРНО ТАКОЕ ЖЕ, КАК И В ОБЫЧНЫХ ВОДОРАСТВОРИМЫХ БЕЛКАХ, НО В ВОДЕ ОНИ

Слайд 282. В СТРУКТУРЕ ИНТЕГРАЛЬНЫХ БЕЛКОВ ЧЕТКО ВЫДЕЛЯЮТСЯ УЧАСТКИ, ОТВЕТСТВЕННЫЕ ЗА

ИХ БИОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ.
ЭТИ УЧАСТКИ СОСТОЯТ ИЗ ПОЛЯРНЫХ АМИНОКИСЛОТНЫХ ОСТАТКОВ.
ДОМЕНЫ ИЗ

НЕПОЛЯРНЫХ ОСТАТКОВ ОБЕСПЕЧИВАЮТ СТРУКТУРНУЮ УСТОЙЧИВОСТЬ МОЛЕКУЛЫ, ЗАКРЕПЛЯЯ ЕЕ В ЛИПИДНОМ БИСЛОЕ
2. В СТРУКТУРЕ ИНТЕГРАЛЬНЫХ БЕЛКОВ ЧЕТКО ВЫДЕЛЯЮТСЯ УЧАСТКИ, ОТВЕТСТВЕННЫЕ ЗА ИХ БИОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ.ЭТИ УЧАСТКИ СОСТОЯТ ИЗ ПОЛЯРНЫХ

Слайд 29амфипатической альфа-спирали, параллельной плоскости мембраны
гидрофобной петли (ЦИТОХРОМ b5)
ковалентно

соединённого жирнокислотного остатка
электростатического взаимодействия (прямого или кальций-опосредованного) (ПРОТЕИНКИНАЗА С).
Связывание

поверхностных белков с мембраной за счёт

ПОВЕРХНОСТНЫЕ БЕЛКИ

амфипатической альфа-спирали, параллельной плоскости мембраны гидрофобной петли (ЦИТОХРОМ b5) ковалентно соединённого жирнокислотного остатка электростатического взаимодействия (прямого или

Слайд 305 – БЕЛКИ, СВЯЗАННЫЕ С ИНТЕГРАЛЬНЫМИ БЕЛКАМИ,

5 – БЕЛКИ, СВЯЗАННЫЕ С ИНТЕГРАЛЬНЫМИ БЕЛКАМИ,

Слайд 32СИЛЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ БЕЛКОВ С ЛИПИДНЫМ БИСЛОЕМ
ЭЛЕКТРОСТАТИЧЕСКИЕ – НА УРОВНЕ ГОЛОВОК

ЛИПИДОВ
ГИДРОФОБНЫЕ И ДИСПЕРСИОННЫЕ – В ТОЛЩЕ БИСЛОЯ



СИЛЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ БЕЛКОВ С ЛИПИДНЫМ БИСЛОЕМЭЛЕКТРОСТАТИЧЕСКИЕ – НА УРОВНЕ ГОЛОВОК ЛИПИДОВГИДРОФОБНЫЕ И ДИСПЕРСИОННЫЕ – В ТОЛЩЕ БИСЛОЯ

Слайд 33ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВ В БИСЛОЕ
I - ЛАТЕРАЛЬНАЯ ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВЫХ МОЛЕКУЛ
II

– ВРАЩАТЕЛЬНАЯ ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВЫХ МОЛЕКУЛ

ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВ В БИСЛОЕI - ЛАТЕРАЛЬНАЯ ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВЫХ МОЛЕКУЛ II – ВРАЩАТЕЛЬНАЯ ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВЫХ МОЛЕКУЛ

Слайд 34Латеральная подвижность мембранных белков, демонстрируемая в эксперименте

Латеральная подвижность мембранных белков, демонстрируемая в эксперименте

Слайд 35ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВ В БИСЛОЕ И ИХ ВЛИЯНИЕ НА ЛИПИДЫ МЕМБРАН
БОЛЕЕ

ПОДВИЖНЫМИ ОКАЗЫВАЮТСЯ ПЕРИФЕРИЧЕСКИЕ БЕЛКИ. ОНИ ОКАЗЫВАЮТ МЕНЬШЕЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ НА ЖИРНОКИСЛОТНЫЕ

ЦЕПИ ЛИПИДОВ
ПОДВИЖНОСТЬ БЕЛКОВ В БИСЛОЕ И ИХ ВЛИЯНИЕ НА ЛИПИДЫ МЕМБРАНБОЛЕЕ ПОДВИЖНЫМИ ОКАЗЫВАЮТСЯ ПЕРИФЕРИЧЕСКИЕ БЕЛКИ. ОНИ ОКАЗЫВАЮТ МЕНЬШЕЕ

Слайд 36ЛАТЕРАЛЬНАЯ ДИФФУЗИЯ ИНТЕГРАЛЬНЫХ БЕЛКОВ ОГРАНИЧЕНА ИХ РАЗМЕРАМИ, ВЗАИМОДЕЙСТВИЕМ С ДРУГИМИ

БЕЛКАМИ И ЭЛЕМЕНТАМИ ЦИТОСКЕЛЕТА
Времена вращательной релаксации для интегральных белков лежат

в диапазоне от 20 до 500 мкс

Коэффициент латеральной диффузии (вдоль бислоя) варьирует от 7.10-9 до 10-12см2.с-1.

ЛАТЕРАЛЬНАЯ ДИФФУЗИЯ ИНТЕГРАЛЬНЫХ БЕЛКОВ ОГРАНИЧЕНА ИХ РАЗМЕРАМИ, ВЗАИМОДЕЙСТВИЕМ С ДРУГИМИ БЕЛКАМИ И ЭЛЕМЕНТАМИ ЦИТОСКЕЛЕТАВремена вращательной релаксации для

Слайд 37ИНТЕГРАЛЬНЫЕ БЕЛКИ СИЛЬНО ОГРАНИЧИВАЮТ ПОДВИЖНОСТЬ АННУЛЯРНЫХ ЛИПИДОВ. ПО СВОЕЙ ПОДВИЖНОСТИ

ОНИ ОТЛИЧАЮТСЯ ОТ ОБЩИХ ЛИПИДОВ: АННУЛЯРНЫЕ ЛИПИДЫ ОКАЗЫВАЮТСЯ БОЛЕЕ УПОРЯДОЧЕННЫМИ

ИНТЕГРАЛЬНЫЕ БЕЛКИ СИЛЬНО ОГРАНИЧИВАЮТ ПОДВИЖНОСТЬ АННУЛЯРНЫХ ЛИПИДОВ. ПО СВОЕЙ ПОДВИЖНОСТИ ОНИ ОТЛИЧАЮТСЯ ОТ ОБЩИХ ЛИПИДОВ: АННУЛЯРНЫЕ ЛИПИДЫ

Слайд 38Фазовый переход приводит к увеличению подвижности ацильных цепей в бислое,

увеличению угла их наклона и уменьшению плотности упаковки.
Латеральная подвижность

мембранных белков после фазового перехода возрастает, увеличивается вероятность образования их ассоциатов
Фазовый переход приводит к увеличению подвижности ацильных цепей в бислое, увеличению угла их наклона и уменьшению плотности

Слайд 39МОДИФИКАЦИЯ БИСЛОЯ БЕЛКАМИ
ВЫДЕЛЯЮТ 4 ОСНОВНЫХ ТИПА БЕЛОК-ЛИПИДНЫХ КОНТАКТОВ

МОДИФИКАЦИЯ БИСЛОЯ БЕЛКАМИВЫДЕЛЯЮТ 4 ОСНОВНЫХ ТИПА БЕЛОК-ЛИПИДНЫХ КОНТАКТОВ

Слайд 40ЛОКАЛЬНОЕ ВОЗРАСТАНИЕ УПОРЯДОЧЕННОСТИ БИСЛОЯ


ЛОКАЛЬНОЕ ВОЗРАСТАНИЕ УПОРЯДОЧЕННОСТИ БИСЛОЯ

Слайд 41ЭЛАСТИЧЕСКАЯ ДЕФОРМАЦИЯ ОДНОЙ СТОРОНЫ БИСЛОЯ

ЭЛАСТИЧЕСКАЯ ДЕФОРМАЦИЯ ОДНОЙ СТОРОНЫ БИСЛОЯ

Слайд 42РЕЗКОЕ ИЗМЕНЕНИЕ ГРАДИЕНТА КРИВИЗНЫ И ДЕФОРМАЦИЯ БИСЛОЯ

РЕЗКОЕ ИЗМЕНЕНИЕ ГРАДИЕНТА КРИВИЗНЫ И ДЕФОРМАЦИЯ БИСЛОЯ

Слайд 43ИЗМЕНЕНИЕ ГЕОМЕТРИИ БИСЛОЯ ВСЛЕДСТВИЕ НЕСОВПАДЕНИЯ ДЛИНЫ ГИДРОФОБНЫХ УЧАСТКОВ ЛИПИДНЫХ МОЛЕКУЛ

И ВСТРАИВАЕМОГО БЕЛКА

ИЗМЕНЕНИЕ ГЕОМЕТРИИ БИСЛОЯ ВСЛЕДСТВИЕ НЕСОВПАДЕНИЯ ДЛИНЫ ГИДРОФОБНЫХ УЧАСТКОВ ЛИПИДНЫХ МОЛЕКУЛ И ВСТРАИВАЕМОГО БЕЛКА

Слайд 44НЕКОТОРЫЕ ФУНКЦИИ БЕЛКОВ В МЕМБРАНЕ

НЕКОТОРЫЕ ФУНКЦИИ БЕЛКОВ В МЕМБРАНЕ

Обратная связь

Если не удалось найти и скачать доклад-презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое TheSlide.ru?

Это сайт презентации, докладов, проектов в PowerPoint. Здесь удобно  хранить и делиться своими презентациями с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика