Группы 112 А,Б,В 115 А,Б

2016 г.

вирусов, паразитирующих в бактериальных клетках.

воды из Ганга и Джамны в отношении холерного вибриона. Эти

свойства сохранялись после пропускания через бактериальные фильтры, но исчезали при кипячении.
Хэнкин предположил, что подобные свойства воды из этих рек ограничивают распространения эпидемий холеры, но не смог объяснить этот феномен.
Впервые перевиваемый лизис бактерий (сибиреязвенной палочки) наблюдал Н.Ф. Гамалея (1898). При изучении свойств фильтратов сибиреязвенных бацилл, он установил его способность лизировать свежие культуры этих бактерий.

золотистого стафилококка, получившее название «стеклистое перерождение колоний». Под действием некоего

фактора белые или желтые, непрозрачные колонии бактерий становились прозрачными и исчезали. Исследователи установили способность фильтратов переродившихся колоний заражать и убивать новые колонии бактерий. Это явление получило название «феномена Туорта», но его природа оставалась неизученной.
Истинным открывателем бактериофагов стал Феликс д'Эрель, выделивший от больных дизентерией «анти-шигеллезный микроорганизм». Именно Ф. д'Эрель, канадский сотрудник Института Пастера в Париже, ввел в практику термин «бактериофаги» - используя суффикс «фаг» не в прямом смысле «поглощать, поедать», а в смысле развития за счет чего-то. Он исследовал действие фильтратов испражнений больных дизентерией на шигеллы. После культивирования в термостате культура бактерий обычно вырастала, но однажды она не выросла, а растворилась, что совпало, по времени, с началом выздоровления больного. Это позволило Ф. д'Эрелю сделать вывод, что бактерии растворяет некий живой агент, проходя­щий через бактериальные фильтры, то есть вирус. Путем многочисленных пассажей на культурах шигелл в качестве «клеток-хозяев», Ф. д'Эрель размножил популяцию бактериофагов и установил их способность образовывать зоны лизиса культурах шигелл, засеянных «газоном» на чашках Петри.

для:
Диагностики
Лечения
Профилактики бактериальных инфекций
Получают фаги культивированием инфицированных ими бактерий с последующей

очисткой дочерних популяций вирусов.

действия выделяют:
поливалентные (лизирующие родственные бактерии, в том числе близких видов),

моновалентные (лизирующие бактерии одного вида)
типоспецифические (лизируюшие отдельные штаммы бактерий одного вида) фаги.
Стандартные наборы фагов применяют для фаготипирования возбудителей холеры, брюшного тифа, дифтерии, сальмонеллёзов, стафилококковых инфекций и др. Фаготипирование проводят с целью выявления чувствительности патогенных бактерий к препаратам на основе этих фагов; а также для установления характера и скорости изменения микробных пейзажей в ЛПУ.
Высокая чувствительность бактерий к специфическому фагу позволяет отличить близкородственные виды. Фагодиагностику используют в диагностике чумы, холеры, кишечных инфекций. Фагодиагностика относится к ускоренным методам диагностики и позволяет дать предварительный положительный ответ, но не исключает проведение основного метода исследования для диагностики данного инфекционного заболевания.

«газоном», подсушивают и наносят каплю стандартного диагностического фага и наклоном

чашки дают капле стечь по поверхности агара. Инкубируют посевы в термостате при 37°C в течение суток. В случае отсутствия роста на месте населения капли фага («стерильное» пятно) делают вывод о соответствии испытуемой культуры нанесенному фагу.

Фагоидентификация
бактерий по методу Отто

известных фагов. Для выполнения этого метода каплю испытуемой суточной бульонной

культуры наносят на МПА и шпателем распределяют по поверхности агара (посев «газоном»). Затем чашку условно делят на квадраты (расчерчивая их по дну чашки маркером по стеклу). В каждый квадрат наносят по капле суспензии разных фагов. После суточного культивирования в термостате учитывают результаты. При соответствии бактерий и фага обнаруживаются зоны лизиса.

известных фагов. При выполнении этого метода в расплавленный и остуженный

до 45-50°С агар добавляют суспензию известного бактериофага и тщательно перемешивают. Полученную смесь разливают в чашки Петри. Каждую чашку условно делят на несколько секторов, в которые высевают штрихом исследуемые культуры. Чашки инкубируют в термостате в течение суток, после чего учитывают результаты. Рост культуры будет отсутствовать в том секторе, в котором бактерии и фаг соответствуют друг другу.

также для выявления источника и путей распространения инфекции (эпидемиологическое маркирование).

При этом выделение бактерий одного фаговара от разных больных указывает на общий источник их заражения.

фага используют при диагностике дизентерии и брюшного тифа, для выявления

бактерионосительства при брюшном тифе, для обнаружения брюшнотифозных и дизентерийных бактерий в воде и молоке, для обнаружения дизентерийных микробов на предметах внешней среды, для выявления чумного микроба и холерного вибриона в воде.
Для установления присутствия определенных бактерий в исследуемую пробу добавляют известное количество специфического фага. При наличии гомологичных бактерий фаг размножается, в результате чего нарастает его титр (количество). Следовательно, реакция нарастания титра фага основана на увеличении количества фага* при его контакте с возбудителем непосредственно в исследуемом материале.
* - методом титрования фага.

пробирке с 0,5 мл бактериальной культуры и добавляют в эту

же пробирку расплавленный агар. Все содержимое выливают в чашку с мясопептонным агаром. Дают застыть верхнему тонкому слою и ставят в термостат. При встрече фага с бактерией, происходит лизис последней и образуется негативная колония фага. Такие негативные колонии затем подсчитывают для определения титра. Титром фага называют количество фаговых частиц в 1 мл препарата фага.

профилактических целях бактериофаг используется в тех случаях, когда возбудитель известен.

Фагопрофилактика проводится в комплексе с другими методами. В настоящее время по эпидемическим показаниям фагопрофилактику проводят только при дизентерии и брюшном тифе. Фагопрофилактика имеет ряд преимуществ: возможность широкого использования, быстрота действия, легкость введения, безвредность.

дизентерии, холеры и др.) специфическими бактериофагами. При использовании бактериофагов в

лечебных целях предварительно определяют чувствительность возбудителей к данному бактериофагу. При лечении часто используют смесь из разных фагов: против протея, кишечной палочки и энтерококка; против синегнойной палочки и других гноеродных микробов. Поливалентные препараты могут включать бактериофаги против различных вариантов бактерий одного вида (например, против пяти серологических групп сальмонелл). Для профилактического и терапевтического применения бактериофаги выпускаются в виде таблеток, жидких форм и др. В последние годы фаги находят широкое применение в косметологии в виде гелей (а также зубные пасты с фагами).

из вирулентных бактериофагов широкого спектра действия, активных против антибиотикорезистентных бактерий.

Их выпускают жидкими и лиофильно высушенными. Перед применением необходимо определить фагочувствительность возбудителя инфекции
Наиболее употребляемые препараты бактериофагов:
Сальмонеллезный
Коли бактериофаг, колипротейный
Стрептококковый (для приема внутрь, местного и наружного применения)
Клебсиелл поливалентный
Клебсифаг (клебселл пневмонии)
Дизентерийный поливалентный
Протейный бактериофаг
Синегнойный бактериофаг/псевдомонас
А также комплексные бактериофаги:
ИНТЕСТИ комплексный бактериофаг
Пиобактериофаг поливалентный (стафилококков, стрептококков, энтерококков, кишечной палочки, протея мирабилис и протея обыкновенного, псевдомонад и клебсиелл).
Секстафаг Пиобактериофаг поливалентный
И др.

и экстренной профилактики путём создания искусственного пассивного иммунитета.
Иммунные сыворотки получают

от животных (гетерологичные сыворотки) и от человека (гомологичные сыворотки).
Обычно сывороточные препараты вводят парентерально, что обуславливает быстрое развитие невосприимчивости, но оно длится не долго (около 2-3 нед).

лошадей), т.е. путем многократного введения им больших доз АГ по

разработанной схеме. На пике антителообразования у иммунных животных забирают кровь, освобождают её от форменных элементов и фибрина, фильтруют и стандартизируют по концентрации АТ (антитоксинов, агглютининов, вируснейтрализующих антител и т.д.), содержанию белка и другим свойствам. Полученная таким образом нативная иммунная сыворотка содержит много балластных белков, и имеет относительно низкую концентрацию АТ. Поэтому часто из нее получают иммуноглобулины:
Методом выделения, очистки и концентрирования их ферментативным способом в сочетании диализом.
Осаждением спиртом на холоде.
Хроматографией
или иными способами. Иммуноглобулины содержат меньше балластного белка и имеют более высокую концентрацию АТ.

предварительно смешивают сыворотки, полученные из крови разных лиц, и концентрация

в них АТ невелика.
Для получения препаратов иммуноглобулинов (гомологичных) с повышенным содержанием АТ производят предварительный отбор сырья – используют сыворотки реконвалесцентов или доноров, подвергнутых иммунизации. Такие препараты чаще используют для групп риска: новорожденных, тяжелобольных и т.п.
Препараты иммуноглобулинов, полученные из человеческой крови, для человека не иммуногены и в этом их преимущество перед гетерологичными сыворотками и глобулинами.

сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыворотки, содержащие

в качестве АТ антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.

2. Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие и другие АТ к возбудителям таких болезней, как брюшной тиф, дизентерия, чума, коклюш и др.

3. Противовирусные - сыворотки (коревая, гриппозная, антирабическая и др.), содержащие вируснейтрализующие АТ.

из крови нескольких тысяч доноров и используют для профилактики респираторных

инфекций у детей, для профилактики гепатита А, эпидемического паротита, кори, ветряной оспы. Они содержат кроме специфичных антител и большое кол-во других иммуноглобулинов.

2. Иммунные сыворотки – содержат иммуноглобулины направленного действия (антистафилококковый, против синегнойной палочки). Их получают путем очистки от неспецифических антител.

против ветряной оспы, против гепатита А, противостафилококковый, противоботулинические.

– лошадиные, антирабический иммуноглобулин, противосибиреязвенный иммуноглобулин, пролученные из сыворотки лошадей,

иммуноглобулин против клещевого энцефалита.

реакциях нейтрализации, агглютинации, преципитации и т.д. Профилактическое и лечебное действие

оценивают в опытах на экспериментальных животных (белые мыши, кролики, морские свинки). Например, активность антитоксических сывороток выражают в международных антитоксических единицах (МЕ): 1МЕ — это количество антител, нейтрализующее определенное количество Dlm* - специфического токсина. Например, 1МЕ противостолбнячной сыворотки— это количество антитоксина, нейтрализующее 100 Dlm токсина для белой мыши. Противостолбнячная сыворотка обычно содержит 3000МЕ/мл.
*- Сила токсина измеряется в DLM.
DLM – это минимальное количество токсина, которое при подкожном введении морской свинке весом 250 г вызывает ее гибель на 4—5-е сутки при характерной патолого-анатомической картине: надпочечники увеличены, резко гиперемированы, в полостях геморрагический экссудат.
Иммунные сыворотки и иммуноглобулины создают пассивный специфический иммунитет практически сразу же после их введения. Этот иммунитет сохраняется при введении гомологичных сывороток до 1-1,5 мес и гетерологичных — до 10—20 сут (в организме чужеродные белки быстрее разрушаются). Иммунные сывороточные препараты вводят, как правило, внутримышечно в больших дозах и как можно раньше после вероятного инфицирования. Разработаны препараты и для внутривенного введения.

в виде анафилактического шока или сывороточной болезни. При первом введении

таких препаратов происходит сенсибилизация, а при повторном – развитие аллергических реакций немедленного типа.
Для профилактики анафилактического шока перед введением гетерологической сыворотки ставят внутрикожную пробу с разведенной 1:100 сывороткой лошади (ампула прилагается в наборе с сывороткой и маркирована красным цветом). Такую сыворотку вводят внутрикожно в сгибательную поверхность предплечья в объеме 0,1 мл. Учет результата проводят через 20 мин. Проба считается отрицательной, если диаметр отека (гиперемии) в месте инъекции, менее чем 1 см. Проба считается положительной, если диаметр отека 1 см и более.
При отрицательной кожной пробе неразведенную сыворотку (ампула маркирована синим цветом и входит в набор) вводят в объеме 0,1 мл подкожно в области средней трети плеча. При отсутствии местной и общей реакции через 30-60 мин внутримышечно вводят необходимую дозу сыворотки.
Если кожная проба положительная, а также при развитии реакции на подкожную инъекцию, препарат используют только при жизненной необходимости. Обязательны мероприятия по десенсибилизации – введение сыворотки по Безредке. Для этого сыворотку разведенную 1:100 вводят подкожно в объеме 0,5 мл, 2 мл, 5 мл с интервалом 15-20 мин, затем с такими же интервалами вводят подкожно 0,1 мл, и 1,0 мл неразведенной сыворотки. При отсутствии реакции вводят назначенную дозу сыворотки.

происхождения, обладающие специфической способностью стимулировать (или иногда супрессировать) иммунные процессы,

а также активировать иммунокомпетентные клетки (Т- и В-лимфоциты) и дополнительные факторы иммунитета (макрофаги и др.).
По оказывемому действию иммуномодуляторы делт на 3 группы:
Иммуностимуляторы
Иммунодепрессанты
Средства заместительной терапии
По механизму действия делят на:
Вещества, влияющие на Т-систему иммунитета
Вещества, влияющие на В-систему иммунитета
Вещества, влияющие на систему мононуклеарных фагоцитов

на иммунную систему, представлены широкой группой химических препаратов и биологически

активных веществ, стимулирующих или подавляю­щих иммунитет (продигиозан, сальмозан, левамизол или декарис, левакадин, циклоспорин А, пирогенал и др). Продигиозан — высокополимерный липополисахаридный комплекс, выделенный из непатогенного микроорганизма — палочки Васterium рrodigiosum. Продигиозан оказывает на организм неспецифическое стимулирующее действие по отношению к ряду патогенных воздействий, действие препарата в значительной степени связано с тем, что им стимулируются защитные приспособительные реакции организма — активируются иммунные реакции, образование интерферона (интерфероногенная активность), репаративные процессы. Сальмозан - полисахаридный компонент О-соматического антигена сальмонелл. Активирует макрофаги, повышает неспецифическую резистентность организма к инфекциям, обладает адьювантным действием, стимулирует клеточный и гуморальный иммунитет. Стимулирующий эффект сохраняется в течение длительного времени. Левамизол - препарат из группы имидазотиазола, при некоторых сравнительно нетяжелых иммунодефицитных состояниях проявляет иммуностимулирующие свойства, при некоторых аутоиммунных заболеваниях — умеренные иммуносупрессивные свойства.

организме.
Эндогенные иммуномодуляторы представлены цитокинами -интерлейкинами, интерферонами, пептидами вилочковой железы, миелопептидами

костного мозга, фактором некроза опухолей, факторами активации моноцитов и др. Эндогенные иммуномо­дуляторы принимают участие в активации, супрессии или нормализации деятельности иммунной системы. Многие такие препараты используют при лечении различных инфекций, онкологических заболеваний, нарушений иммунного статуса и т.д. Например, α-интерферон и γ-интерферон применяют для лечения вирусного гепатита В, С, D, герпетических инфекций и острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ), он­кологических болезней и некоторых форм иммунной патологии. Препараты вилочковой железы широко используют для коррекции иммунодефицитных состояний.

сопротивляемость организма к широкому спектру вредных воздействий физической, химической и

биологической природы. Растительного происхождения: родиола розовая, женьшень, элеутерококк, лимонник, и др.;

на основе микробов, либо вирусов, токсинов, грибов и пр. (микробо-вирусо-токсинные

препараты), предназначенные для определения АТ в прямых иммунологических реакциях (либо АГ в непрямых).

Антительные диагностикумы - это диагностические препараты на основе глобулинов иммунных сывороток или АТ, предназначенные для обнаружения АГ в прямых иммунологических реакциях (или АТ в непрямых).

Иммуноглобулиновые диагностикумы - это препараты на основе иммуноглобулинов нормальных сывороток, основанные на эффекторных свойствах молекулы ИГ. У ИГ на Fc- фрагменте есть рецепторы для связывания, например, С3-компонента системы комплемента, белка А золотистого стафилококка, Т- и В- лимфоцитов, макрофагов и антител к иммуноглобулинам и пр. Эта связь осуществляется не по типу антиген-антитело, но позволяет определять С-реактивный белок, проводить быструю индикацию стафилококка по белку А и пр. Для этих целей готовят иммуноглобулиновый диагностикум.

по методу Грациа
Гетерологичные сыворотки
Гомологичные сыворотки
Нормальные сыворотки
DLM (сила

токсина)
введение сыворотки по Безредке