Карагандинский Государственный Медицинский Университет Кафедра микробиологии

инженерия. Современные молекулярно-генетические методы исследования.
Выполнил: ст 2-063 группы Жакупов.

С
Проверила: Назаренко Г. А

генетики изучаются на микроорганизмах. Молекулярная биология обязана своими достижениями успехам

генетики бактерий и вирусов. Многие открытия в области генетики микроорганизмов были весьма эффективно использованы в биологии и медицине.

локализация различных нуклеотидных последовательностей ДНК и определение их взаимного расположения

в геноме
основанная на методах классической генетики: определение групп сцепления, частоты рекомбинации, построение генетических карт, где единицей измерения служат проценты рекомбинации или сантиморганы

органелл.
 Картирование генов бактерий.
Картирование генов актиномицетов.
Картирование плазмид.

[лат. charta — бумага, грамота] — одномерная схема взаиморасположения локусов генов (генетических

маркеров) в группах сцепления (на индивидуальных хромосомах) данного организма с указанием расстояний между ними в парах нуклеотидов, определенных с помощью секвенирования, или в сантиморганах, установленных по частоте кроссинговера.

однако полученные при этом значения расстояний между ними не соответствуют

реальным физическим расстояниям.
Обычно данный факт связывают с тем, что эффективность рекомбинации между хроматидами на отдельных участках хромосом может сильно различаться. В частности, она подавлена в гетерохроматиновых участках хромосом. С другой стороны, в хромосомах часто встречаются "горячие точки" рекомбинации.
Использование частот рекомбинации для построения физических генетических карт без учета этих факторов будет приводить к искажениям реальных расстояний между генетическими маркерами.

рестриктаз ; заключается в получении фрагментов анализируемой последовательности (гена),

вырезанных разными рестриктазами и электрофоретические разделенных с последующим сопоставлением их размеров и определением расстояний на генетической карте; также
 Р.к. - определение с помощью рестриктаз соотношения экзонов и интронов в составе гена (в этом случае один из вариантов - картирование по методу Берка-Шарпа
разрешающая способностьР.к. - около 20 пар нуклеотидов.

генетики официально в 1972 г., когда в лаборатории П. Берга

(Стенфордский университет, США) была получена первая рекомбинантная (гибридная) ДНК на базе объединения генетического материала, полный геном вируса обезьян 40, часть генома измерного бактериофага и гены галактозного оперона.

пу­тем конструирования функционально-активных генетических структур в форме рекомбинантных ДНК из

фрагментов гено­мов разных организмов, которые вводились в клетку.

свойства организмов в нужном направлении, пересаживать гены из одного организма

в другой и привносить в него новые признаки. Например, уже создаются новые организмы, сочетающие в себе свойства животных и растений. Однако довольно сложно определить долговременные последствия генных манипуляций.

Проблемы и перспективы генной инженерии.

как она не в состоянии управлять процессом встраивания нового гена.

Поэтому невозможно предвидеть место встраивания и эффекты добавленного гена. Даже в том случае, если местоположение гена окажется возможным установить после его встраивания в геном, имеющиеся сведения о ДНК очень неполны для того, чтобы предсказать результаты.

Устойчивость к действиям антибиотиков.
4. Возникновение новых и более опасных вирусов.

сохранить наиболее желательные признаки сорта и привить два-три новых полезных 2.     С

помощью применения ГМР создают более дешевые лекарства (инсулин), обеспечивают промышленность сырьем 3.     Генетически модифицированные продукты в силу своих качеств адаптации к среде, высокой стабильной урожайности могут решить проблему «голодающих стран» 4.     С помощью методов генетической инженерии возможно лечение тяжелых заболеваний человека: онкологических, наследственных заболеваний мозга и нервной системы, для исследования воспалительных и иммунологических заболеваний человека.

развития генной инженерии. Успех в этой отрасли науки сможет радикально

поднять производительность труда и способствовать решению многих существующих проблем, прежде всего, подъему уровня жизни каждого человека, но, в то же время, и создать новые разрушительные средства.

анализ.
ИФА (иммуноферментный анализ) – выявление антител (иммуноглобулинов – IgM, IgA, IgG),

выработанных организмом человека в ответ на присутствие возбудителей,
Микробиологический метод выделения культур возбудителей с определением их чувствительности к антибиотикам.

лабораторных диагностических методов, позволяющий специфично выявлять ДНК единичных клеток возбудителей

инфекционных заболеваний в образце.
Можно сказать, что ПЦР достигает предельно возможной чувствительности. Чувствительность ПЦР-тест-систем составляет 10-1000 клеток в пробе, в то время как чувствительность иммунологических и микроскопических методов – 1000-100000 клеток в пробе. Благодаря высокой чувствительности, тест-системы на основе ПЦР незаменимы в тех случаях, когда исследуемого материала (возбудителя заболевания) очень мало.

эндонуклеазы, которые расщепляют молекулы ДНК, разрывая фосфатные связи не в

произвольных местах, а в определенных последовательностях нуклеотидов. Особое значение для методов молекулярной генетики имеют рестриктазы, которые узнают последовательности, обладающие центральной симметрией и считывающиеся одинаково в обе стороны от оси симметрии. Точка разрыва ДНК может или совпадать с осью симметрии, или быть сдвинута относительно нее.
В настоящее время из различных бактерий выделено и очищено более 175 различных рестриктаз, для которых известны сайты (участки) узнавания (рестрикции). Выявлено более 80 различных типов сайтов, в которых может происходить разрыв двойной спирали ДНК.
В геноме конкретной таксономической единицы находится строго определенное (генетически задетерминированное) число участков узнавания для определенной рестриктазы.

количественного определения различных соединений, макромолекул, вирусов и пр., в основе

которого лежит специфическая реакция антиген-антитело. Выявление образовавшегося комплекса проводят с использованием фермента в качестве метки для регистрации сигнала.

точно понять природу инфекционного процесса, определить направление создания вакцин, уточнить

патогенные мишени микроорганизмов для создания лекарств. На основе выше сказанного я пришел к выводу, знание генетики микроорганизмов крайне необходимо для компетентной деятельности врача.