Разделы презентаций
- Разное
- Английский язык
- Астрономия
- Алгебра
- Биология
- География
- Геометрия
- Детские презентации
- Информатика
- История
- Литература
- Математика
- Медицина
- Менеджмент
- Музыка
- МХК
- Немецкий язык
- ОБЖ
- Обществознание
- Окружающий мир
- Педагогика
- Русский язык
- Технология
- Физика
- Философия
- Химия
- Шаблоны, картинки для презентаций
- Экология
- Экономика
- Юриспруденция
КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕМОБЛАСТОЗОВ к.м.н. Суслова Ю.В
Содержание
- 1. КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕМОБЛАСТОЗОВ к.м.н. Суслова Ю.В
- 2. ОпределениеГемобластозы-это опухоли, возникающие из кроветворных клеток и
- 3. ОпределениеГемобластозы:ЛЕЙКОЗЫ – формы с диффузным поражением костного
- 4. Материал для исследованияМатериалом для изучения при диагностике
- 5. Периферическая кровьВ лабораторной практике исследуют капиллярную кровь,
- 6. Периферическая кровьДля забора капиллярной крови используют иглы-скарификаторы
- 7. Слайд 7
- 8. Приготовление мазковКровь берут на предметное стекло, которое
- 9. Приготовление мазковВслед за этим мазок фиксируют. Фиксация
- 10. Для подсчета форменных элементов применяется
- 11. Подсчет форменных элементовПодсчет эритроцитов производят в 5
- 12. Подсчет лейкоцитарной формулыЛейкоцитарной формулой называют процентное соотношение
- 13. Электронный счетчик лейкоцитарной формулы крови
- 14. Количественное определение НвДля количественного определения гемоглобина пользуются
- 15. Цветовой показательЦветовой показатель выражает относительное содержание гемоглобина
- 16. Определение скорости оседания эритроцитов осуществляется микрометодом в
- 17. СОЭСкорость оседания эритроцитов в норме меняется в
- 18. Стернальная пункцияСтернальная пункция — один из методов
- 19. Нормальный костный мозг
- 20. Метастаз рака в костный мозг
- 21. Хроническая тромбоцитопеническая пурпура
- 22. ТрепанобиопсияТрепанобиопсия — метод прижизненного извлечения костной ткани
- 23. ТрепанобиопсияТрепанобиопсию производят специальной иглой-троакаром, которая состоит из
- 24. ИммуннофенотипированиеИммунофенотипирование – метод определения типа клеток путем
- 25. Проточная цитометрия. Возможности метода и его применение в различных областях медицины.Проточный цитометр
- 26. ИммуннофенотипированиеПроточный цитометр – прибор, позволяющий классифицировать тысячи
- 27. АЛГОРИТМ фенотипированияCD45SSCВыявление на поверхности и в цитоплазме
- 28. Образцы для проточной цитометрии при гемобластозах:кровькостный мозгликворплевральная жидкостьасцитическая жидкостьсуспензированные клетки тканей (например, лимфоузлов)
- 29. ОСТРЫЕ ЛЕЙКОЗЫ– это злокачественные заболевания системы кроветворения, морфологическим субстратом которых являются бластные клетки.
- 30. I II III IV V VI
- 31. СИНДРОМЫ ОСТРЫХ ЛЕЙКОЗОВ- ГИПЕРПЛАСТИЧЕСКИЙ - ГЕМОРРАГИЧЕСКИЙ - АНЕМИЧЕСКИЙ - ИНТОКСИКАЦИОННЫЙ- ИНФЕКЦИОННЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ
- 32. Слайд 32
- 33. Слайд 33
- 34. Слайд 34
- 35. Слайд 35
- 36. Слайд 36
- 37. FAB (French-American-British) – классификация острых лейкозов
- 38. FAB – классификация острых лейкозов
- 39. ОСНОВНОЙ ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ КРИТЕРИЙ ОЛ– в стернальном пунктате более 20% бластных клеток
- 40. ГЕМОГРАММААНЕМИЯ (чаще нормохромная и нормоцитарная)РЕТИКУЛОЦИТОПЕНИЯТРОМБОЦИТОПЕНИЯЛЕЙКОПЕНИЯ (в 15-20%
- 41. I II III IV V VI
- 42. Слайд 42
- 43. ПЕРИФЕРИЧЕСКАЯ КРОВЬ В НОРМЕ
- 44. ПЕРИФЕРИЧЕСКАЯ КРОВЬ ПРИ ОМЛ
- 45. МИЕЛОГРАММАБЛАСТЫ составляют более 20% клеток костного мозга
- 46. Острый лейкоз (костный мозг)
- 47. Острый лейкоз (костный мозг)
- 48. Бластные клеткиЗначительно увеличены (в 2-3 раза против
- 49. Бластные клеткиЯдро неправильной формы вплоть до самых
- 50. Бласты
- 51. ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИАктивность МИЕЛОПЕРОКСИДАЗЫ (фермент, катализирующий реакции окисления)Содержание
- 52. ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИКонкретная цитохимическая реакция должна быть положительной не менее, чем в 3% клеток
- 53. Положительная реакция на МПО в бластах (костный мозг)
- 54. Положительная реакция на МПО в бластах (костный мозг)
- 55. Положительная реакция на липиды
- 56. Диффузно-гранулярная PAS-реакция в бластах
- 57. Положительная реакция на неспецифическую эстеразу
- 58. Положительная реакция на мукополисахариды
- 59. Слайд 59
- 60. ПРОТОЧНАЯ ЦИТОМЕТРИЯВыявление лейкозных бластов в периферической крови
- 61. НЕЙРОЛЕЙКЕМИЯ – поражение нервной системы у больных
- 62. менингоэнцефалическа форма - псевдотуморозная форма
- 63. Диагностика нейролейкемии: цитологическое исследование ликвора для выявления бластных клеток моноклональное исследование ликвора
- 64. Стадии острого лейкоза 1. Первая атака
- 65. Масса опухоли 1кг (1012)Ремиссия I (бласты в миелограмме
- 66. Критерии ремиссии (А.И. Воробьев, Т.В. Балакирева, 1997г.)-
- 67. Критерии рецидива (В.Г. Савченко и соавторы, 2002г.)-
- 68. Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) представляет собой группу
- 69. Формы ХЛЛ по А.И. Воробьеву с соав. (2000)ДоброкачественнаяПрогрессирующая (классическая)ОпухолеваяСелезеночнаяАбдоминальная ПролимфоцитарнаяКостномозговая
- 70. СИНДРОМЫ ХРОНИЧЕСКОГО ЛИМФОЛЕЙКОЗА - ГЕНЕРАЛИЗОВАННАЯ ЛИМФОАДЕНОПАТИЯ - ГЕПАТОСПЛЕНОМЕГАЛИЯ
- 71. Слайд 71
- 72. Слайд 72
- 73. ОСНОВНЫЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ ХЛЛ ЛЕЙКОЦИТОЗ АБСОЛЮТНЫЙ ЛИМФОЦИТОЗ ТЕНИ БОТКИНА-ГУМПРЕХТА
- 74. ГЕМОГРАММААНЕМИЯ (чаще нормохромная и нормоцитарная)ТРОМБОЦИТОПЕНИЯ ЛЕЙКОЦИТОЗ от
- 75. I II III IV V VI
- 76. Слайд 76
- 77. Слайд 77
- 78. МИЕЛОГРАММАЛИМФОЦИТЫ составляют более 30% ядросодержащих клеток костного
- 79. Критерии ответа при лечении ХЛЛ
- 80. Критерии ответа при лечении ХЛЛ
- 81. СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ
- 82. КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕМОБЛАСТОЗОВ (продолжение) к.м.н. Суслова Ю.В.
- 83. Хронический миелолейкоз (ХМЛ) – это злокачественная
- 84. При ХМЛ впервые была выявлена связь злокачественного
- 85. Слайд 85
- 86. СИНДРОМ ХРОНИЧЕСКОГО МИЕЛОЛЕЙКОЗА - МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫЙВ период бластного криза клиника, как при остром лейкозе.
- 87. Спленомегалия при ХМЛ
- 88. Размеры печени и селезенки в норме N
- 89. Фазы ХМЛХроническая фазаПрогрессирующая фаза (миелопролиферативной акселерации)Бластный криз (острая фаза)
- 90. ОСНОВНЫЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ ХМЛ ЛЕЙКОЦИТОЗ СДВИГ
- 91. I II III IV V VI
- 92. ГЕМОГРАММАЛЕЙКОЦИТОЗ от 50 до 300х10⁹НАЛИЧИЕ СОЗРЕВАЮЩИХ ФОРМ:
- 93. Мазок крови в норме
- 94. Периферическая кровь при ХМЛ: лейкоцитоз со сдвигом влево
- 95. Периферическая кровь при ХМЛ
- 96. Периферическая кровь при ХМЛ
- 97. МИЕЛОГРАММА I фаза:Увеличение количества гранулоцитовУвеличение количества мегакариоцитовБласты и промиелоциты < 10%
- 98. МИЕЛОГРАММАII фаза:Нарастает количество гранулоцитов и мегакариоцитов
- 99. МИЕЛОГРАММАIII фазаБласты составляют >20% (м.б. в
- 100. ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ: Ядросодержащие клетки костного мозга более, чем у 90% больных содержат филадельфийскую хромосому
- 101. Кариологическое исследование транслокация t (9;22)
- 102. Иммунофенотипирование:В результате реципрокной транслокации между хромосомами 9
- 103. ТРЕПАНОБИОПСИЯ: Гиперплазия миелоидной ткани Снижение содержания жировой ткани
- 104. Критерии ответа на терапию при ХМЛ
- 105. МНОЖЕСТВЕННАЯ МИЕЛОМА(болезнь Рустицкого-Калера,генерализованная плазмацитома,миеломная болезнь) –злокачественная опухоль
- 106. I II III IV V VI
- 107. 1848г. – H.Bence-Jones описал некую «живую материю»
- 108. КЛИНИЧЕСКИЕ СИНДРОМЫ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫКостно-мозговой синдромСиндром белковой патологииСиндром повышенной вязкостиГиперкальциемияГеморрагическийАнемическийСиндром висцеральных пораженийПериферическая полинейропатияСиндром недостаточности антителПараамилоидоз
- 109. КОСТНОМОЗГОВОЙ СИНДРОМ
- 110. Инфильтрация п/ж клетчатки
- 111. Инфильтрация п/ж клетчатки
- 112. ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИПлазматические клетки (плазмоциты) — основные клетки, продуцирующие антитела в организме человекаЯвляются конечным этапом развития B-лимфоцита
- 113. ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ
- 114. ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИХарактеристика плазматических клетокКрупных размеров (16—25 мкм)Ядро
- 115. Костный мозг при ММ
- 116. Костный мозг при ММ
- 117. Рентгенологически Обнаруживаются миеломатозные опухоли различных
- 118. Рентгенологически изменения костей проявляются в видеГенерализованного
- 119. R-грамма верхней конечности
- 120. Слайд 120
- 121. Слайд 121
- 122. СИНДРОМ БЕЛКОВОЙ ПАТОЛОГИИ
- 123. Миеломная нефропатия наиболее серьезное проявление парапротеинемииКлиника
- 124. СИНДРОМ ПОВЫШЕННОЙ ВЯЗКОСТИ
- 125. Синдром повышенной вязкости крови обусловлен высоким содержанием
- 126. ГИПЕРКАЛЬЦИЕМИЯ
- 127. Гиперкальциемия клинически проявляется тошнотой, рвотой, сонливостью, потерей ориентации, возможны сопорозные состояния и кома
- 128. ГЕМОРРАГИЧЕСКИЙ СИНДРОМ
- 129. Происходят нарушения тромбоцитарных, плазменных и сосудистых факторов
- 130. АНЕМИЧЕСКИЙ СИНДРОМ
- 131. Чаще развивается нормохромная анемияПри кровотечениях она носит
- 132. СИНДРОМВИСЦЕРАЛЬНЫХ ПОРАЖЕНИЙ
- 133. Опухолевые плазмоклеточные инфильтраты могут обнаруживаться во всех внутренних органах
- 134. ПЕРИФЕРИЧЕСКАЯ ПОЛИНЕЙРОПАТИЯ
- 135. Периферическая полинейропатия связана с опухолевым поражением костей
- 136. СИНДРОМ НЕДОСТАТОЧНОСТИ АНТИТЕЛ
- 137. Снижение содержания в сыворотке крови уровня
- 138. ПАРААМИЛОИДОЗ
- 139. Параамилоидоз выявляется у 15% больных миеломной болезнью
- 140. ОСНОВНЫЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ ММ В МИЕЛОГРАММЕ
- 141. План обследованияопределение общего белка и кальция в
- 142. План обследованияморфологическое исследование костного мозга, а в
- 143. Стадии множественной миеломыI стадияГемоглобин › 100 г\лКальций
- 144. Стадии множественной миеломыIII стадияГемоглобин ‹ 85 г\лКальций
- 145. ГЕМОГРАММААНЕМИЯ нормохромнаяЛЕЙКОПЕНИЯМИЕЛОМНЫЕ (ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ) КЛЕТКИ УСКОРЕНИЕ СОЭ до 80-90 мм/ч
- 146. Миеломная болезнь
- 147. МИЕЛОГРАММАПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ разной степени дифференцировки >10%
- 148. Костный мозг при ММ
- 149. ИммуноэлектрофорезИммуноэлектрофорез сыворотки крови больного с миеломой позволяет
- 150. Проточная цитометрияИммунохимические вариантыG-миелома (60%)А-миелома (20%)D-миелома (1%)E-миеломаM-миеломаБолезнь легких цепей (Бенс-Джонса)Диклоновые миеломыНесекретирующая миелома
- 151. Истинная полицитемия (болезнь Вакеза-Ослера, эритремия)
- 152. I II III IV V VI
- 153. Стадии полицитемии НачальнаяЭритремическая (развернутых клинических проявлений):2А – без
- 154. СИНДРОМЫПОЛИЦИТЕМИИ Плеторическийэритроцианотическая окраска кожи кистей рук
- 155. Плеторический синдром
- 156. Плеторический синдром
- 157. Плеторический синдром
- 158. Плеторический синдром
- 159. Плеторический синдром
- 160. Плеторический синдром
- 161. ГЕМОГРАММАЭРИТРОЦИТОЗ (эритроциты у мужчин > 6,0 х
- 162. Периферическая кровь при полицитемии
- 163. МИЕЛОГРАММА Гиперплазия красного мозга Гиперплазия гранулоцитарного и
- 164. Костный мозг при полицитемии
- 165. ТРЕПАНОБИОПСИЯ Более информативна трепанобиопсия костного мозга, где отмечается трехростковая пролиферация (панмиелоз) с вытеснением из него жира
- 166. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭРИТРОПОЭТИНА Низкий уровень эритропоэтина в крови
- 167. Классификация эритроцитозовКЛАССИФИКАЦИЯ ЭРИТРОЦИТОЗОВ(А.В. Демидова, 2001)АБСОЛЮТНЫЕ:1. Истинная полицитемия.2.
- 168. Классификация эритроцитозовПаранеопластические эритроцитозы:рак почкигемангиобластома мозжечкафибромиомамиксома предсердийопухоли желез
- 169. СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ
- 170. Скачать презентанцию
ОпределениеГемобластозы-это опухоли, возникающие из кроветворных клеток и лимфоидной тканиЧаще болеют люди в возрасте 2 – 4 года (до 30%), 10 -12 лет и 60 – 69 лет
Слайды и текст этой презентации
Слайд 2Определение
Гемобластозы-
это опухоли, возникающие из кроветворных клеток и лимфоидной ткани
Чаще болеют
Слайд 3Определение
Гемобластозы:
ЛЕЙКОЗЫ – формы с диффузным поражением костного мозга (острые и
хронические)
ЛИМФОСАРКОМЫ – формы с первоначально внекостномозговым опухолевым ростом (лимфогранулематоз и
неходжкинские лимфомы)
Слайд 4Материал для исследования
Материалом для изучения при диагностике гемобластозов служат:
Периферическая кровь
Пунктат
костного мозга
Пунктат лимфотического узла
Пунктат селезёнки
Гистологические препараты, полученные в результате трепанобиопсии
подвздошной кости
Слайд 5Периферическая кровь
В лабораторной практике исследуют капиллярную кровь, которую получают путем
укола в мякоть IV пальца левой руки или мочки уха,
у детей путем укола пятки или большого пальца стопы, у новорожденных из пуповины,или венозную кровь из локтевой вены (при работе на автоанализаторах)
Слайд 6Периферическая кровь
Для забора капиллярной крови используют иглы-скарификаторы или ланцеты. Укол
лучше производить сбоку, где более густая капиллярная сеть, на глубину
2—3 мм. Кровь из ранки должна вытекать свободно, так как при сильном надавливании на палец возможно примешивание тканевой жидкости
Слайд 8Приготовление мазков
Кровь берут на предметное стекло, которое должно быть тщательно
обезжирено. Затем шлифованным предметным стеклом, которое ставят на первое предметное
стекло под углом 45, делают на нем мазок. Хорошо сделанный мазок желтоватого цвета, просвечивает и оканчивается «метелочкой»
Слайд 9Приготовление мазков
Вслед за этим мазок фиксируют. Фиксация мазка делается для
того, чтобы уплотнить протоплазму форменных элементов крови и сделать мазок
более устойчивым. Мазок погружается в банку с метиловым спиртом на 1 - 3 мин0крашивание мазка производится, как правило, при помощи смеси нескольких красок. Наиболее широко применяется окраска мазка по Романовскому-Гимзе. Мазки заливают красителем на 30 минут. После окраски краситель смывают струей воды, а мазки ставят вертикально на фильтровальную бумагу для просушки
Слайд 10 Для подсчета форменных элементов применяется камера с выгравированной
на ней сеткой Горяева. Счетная камера представляет собой толстое предметное
стекло с особым углублением, разделена пополам глубокой канавкой и имеет на каждой половине сетку Горяева, что позволяет сразу считать 2 капли. Сетка Горяева имеет 225 больших квадратов (15Х15), 25 из которых разделены на малые, по 16 в каждом.
Слайд 11Подсчет форменных элементов
Подсчет эритроцитов производят в 5 больших квадратах, которые
разделены на малые, т. е. в 80 малых квадратах.
Подсчет
лейкоцитов необходимо провести в 100 больших квадратах.Нормальное количество эритроцитов в 1 ммЗ крови от 4000000 до 5000000, среднее количество лейкоцитов - от 4000 - 9000.
Подсчет ретикулоцитов: подсчитывают в поле зрения 1000 эритроцитов и отмечают сколько среди них ретикулоцитов. Найденное количество делят на 10. Нормальное содержание ретикулоцитов в крови 0,2 - 1,0% (2 – 10‰).
Слайд 12Подсчет лейкоцитарной формулы
Лейкоцитарной формулой называют процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов
крови. Для более точного ее вычисления необходимо просмотреть не менее
200 лейкоцитов.Для подсчета лейкоцитарной формулы используют специальный клавишный счетчик, на каждой клавише которого отмечается начальная 6yква названия лейкоцитов. Результаты подсчета лейкоцитарной формулы записываются в виде лейкограммы, имеющей в норме примерно следующий вид:
Слайд 14Количественное определение Нв
Для количественного определения гемоглобина пользуются колориметрическим способом. Принцип
определения заключается в превращении гемоглобина крови в солянокислый
гематин. Затем сравнивают цвет с имеющимся в приборе стандартом.
Прибором для определения служит
гемометр Сали. Он состоит из двух
запаянных пробирок со стандартной
цветной жидкостью. Между ними
расположена градуированная пробирка.
Существуют и другие колориметры – гемоглобинометры, в которых используется цианметгемоглобиновый метод определения уровня гемоглобина. Он тоже основан на химических реакциях крови с определенными реактивами.
Определяют гемоглобин в гематологических анализаторах.
Слайд 15Цветовой показатель
Цветовой показатель выражает относительное содержание гемоглобина в одном эритроците,
т. е. степень насыщения эритроцитов гемоглобином.
Цветовой показатель это расчетная величина.
Для его определения нужно знать уровень гемоглобина в крови и количество эритроцитов. Расчет цветового показателя проводят по формуле:
(Нb х 3)
первые 3 цифры количества Er
В норме цветовой показатель равен 0,85 - 1,05.
Слайд 16Определение скорости оседания эритроцитов осуществляется микрометодом в модификации Панченкова. Определение
производят в специальных градуированных капиллярах, имеющих просвет 1 мм
и длину 100 мм.Капилляр с цитратной кровью (соотношение крови и цитрата 4:1) ставят в штатив вертикально между двумя резиновыми прокладками и оставляют на 1 ч. Затем определяют величину оседания по столбику плазмы над осевшими эритроцитами. Деление капиллярной пипетки, соответствующее границе плазмы и эритроцитов, записывают как величину скорости оседания эритроцитов в миллиметрах в час (мм/ч).
Слайд 17СОЭ
Скорость оседания эритроцитов в норме меняется в зависимости от возраста
и пола. У новорожденных скорость оседания эритроцитов редко выше 2
мм/ч, дети имеют более низкую скорость оседания (1—8 мм/ч), чем взрослые, а лица среднего возраста меньше, чем старики. У мужчин скорость оседания эритроцитов более низкая (в среднем 5 мм/ч, колебания от 1 до 10 мм/ч), чем у женщин (в среднем 9 мм/ч, колебания от 2 до 15 мм/ч).Поскольку скорость оседания эритроцитов зависит в основном от белковых сдвигов (увеличения содержания фибриногена, а2-глобулинов, γ-глобулинов), то увеличение скорости оседания эритроцитов наблюдается при всех состояниях, сопровождающихся воспалением, деструкцией соединительной ткани, тканевым некрозом, малигнизацией, иммунными нарушениями.
Слайд 18Стернальная пункция
Стернальная пункция — один из методов прижизненного исследования костного
мозга. Предложена М.И. Аринкиным.
Проводится через переднюю стенку грудины. Можно
пунктировать подвздошную кость, а у грудных детей большеберцовую или пяточную кости. Однако грудина является наиболее удобным местом для костномозговой пункции. Стернальную пункцию делают на уровне II или III межреберья либо в области рукоятки грудины специальной иглой (игла И.А. Кассирского).Игла снабжена перемещаемым щитком, предохраняющим от прокола внутренней пластинки грудины и повреждения лежащей за ней аорты. Щиток устанавливают с таким расчетом, чтобы игла, пройдя мягкие ткани, продвинулась еще на 5 мм. Вынув мандрен, к игле присоединяют 10- или 20-граммовый шприц и производят отсасывание 0,2 мл костного мозга. Из полученного пунктата готовят мазки, которые фиксируют и окрашивают подобно мазкам крови.
Слайд 22Трепанобиопсия
Трепанобиопсия — метод прижизненного извлечения костной ткани для исследования костного
мозга. Показанием к проведению является цитопения неясной этиологии, когда стернальная
пункция не дает информации о состоянии костного мозга.При трепанобиопсии извлекают кусочек костного мозга с сохранением его структуры, что позволяет правильно оценить соотношение красного и жирового костного мозга (в норме 1:1),
выявить очаговые и диффузные изменения.
Слайд 23Трепанобиопсия
Трепанобиопсию производят специальной иглой-троакаром, которая состоит из иглы длиной 4
см и внутренним диаметром 2 мм, щитка, позволяющего установить необходимую
глубину прокола, мандрена и рукоятки. Конец иглы заточен таким образом, что игла при вращении вырезает столбик костной и костномозговой ткани.Прокол производят в гребешке подвздошной кости на 2—3 см кзади от передней верхней ости после анестезии мягких тканей и надкостницы 2% раствором новокаина. При проникновении иглы в костную ткань, что узнается по ощущению фиксации иглы, снимают ручку, вынимают мандрен, вновь надевают ручку и вращательным движением продвигают иглу вглубь. Получают кусочек костной ткани длиной 6—10 мм, который затем переносят в раствор для фиксации. В дальнейшем полученная проба обрабатывается по правилам гистологической техники.
Слайд 24Иммуннофенотипирование
Иммунофенотипирование – метод определения типа клеток путем изучения молекул, присутствующих
на их поверхности.
На клетки воздействуют моноклональными антителами к определенному
белку-антигену. При этом антитела несут флуоресцентную метку. При присоединении антитела к клетке, «меченая» клетка начинает «светиться», что можно легко различить с использованием специальных приборов.
Меченые клетки при иммунофенотипировании удобно анализировать методом проточной цитометрии.
Слайд 25Проточная цитометрия.
Возможности метода и его применение в различных областях медицины.
Проточный
цитометр
Слайд 26Иммуннофенотипирование
Проточный цитометр – прибор, позволяющий классифицировать тысячи клеток в секунду.
Суспензия клеток под давлением подается в проточную ячейку, где, за
счет разности давлений, клетки, находясь в ламинарном потоке жидкости, выстраиваются в цепочку друг за другом (т.н. гидродинамическое фокусирование).Клетки одна за другой проходят через лазерный луч, а высокочувствительные детекторы, расположенные вокруг проточной ячейки, регистрируют флюоресценцию и рассеянное лазерное излучение каждой клетки. Полученный сигнал передается в компьютер.
Слайд 27АЛГОРИТМ фенотипирования
CD45
SSC
Выявление на поверхности и в цитоплазме бластных клеток маркеров
интереса
Сопоставление морфологических, иммунофенотипических и молекулярно-генетических данных
ПОСТАНОВКА ДИАГНОЗА
Слайд 28Образцы для проточной цитометрии при гемобластозах:
кровь
костный мозг
ликвор
плевральная жидкость
асцитическая жидкость
суспензированные клетки
тканей (например, лимфоузлов)
Слайд 29ОСТРЫЕ ЛЕЙКОЗЫ
– это злокачественные заболевания системы кроветворения, морфологическим субстратом которых
являются бластные клетки.
Слайд 31СИНДРОМЫ ОСТРЫХ
ЛЕЙКОЗОВ
- ГИПЕРПЛАСТИЧЕСКИЙ
- ГЕМОРРАГИЧЕСКИЙ
- АНЕМИЧЕСКИЙ
- ИНТОКСИКАЦИОННЫЙ
- ИНФЕКЦИОННЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ
Слайд 40ГЕМОГРАММА
АНЕМИЯ (чаще нормохромная и нормоцитарная)
РЕТИКУЛОЦИТОПЕНИЯ
ТРОМБОЦИТОПЕНИЯ
ЛЕЙКОПЕНИЯ (в 15-20% возможен лейкоцитоз засчет
бластов)
появление БЛАСТОВ в периферической крови
ФЕНОМЕН «ПРОВАЛА»
ИСЧЕЗНОВЕНИЕ БАЗОФИЛОВ И ЭОЗИНОФИЛОВ
УВЕЛИЧЕНИЕ СОЭ
Слайд 45МИЕЛОГРАММА
БЛАСТЫ составляют более 20% клеток костного мозга (5%-20% бластов –
миелодиспластический синдром)
Резкое уменьшение клеток ЭРИТРОИДНОГО, ГРАНУЛОЦИТАРНОГО, МЕГАКАРИОЦИТАРНОГО ростков
При
получении гипоклеточного мазка костного мозга используется трепанобиопсия подвздошной кости
Слайд 48Бластные клетки
Значительно увеличены (в 2-3 раза против нормы) или уменьшены
до размера лимфоцита
Характерен анизоцитоз
Цитоплазма в виде тонкого ободка
Отмечается повышенная базофилия
цитоплазмы
Слайд 49Бластные клетки
Ядро неправильной формы вплоть до самых причудливых форм
Возможна сегментация
ядра, многоядерность
Число нуклеол может быть увеличено до 8 и более
Размер
нуклеол может достигать 1/3 – ½ диаметра ядра
Слайд 51ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ
Активность МИЕЛОПЕРОКСИДАЗЫ (фермент, катализирующий реакции окисления)
Содержание ЛИПИДОВ (окраска суданом
черным)
Содержание ГЛИКОГЕНА (PAS-реакция)
Активность НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ЭСТЕРАЗЫ
Активность КИСЛОЙ ФОСФАТАЗЫ
Активность ЩЕЛОЧНОЙ ФОСФАТАЗЫ
Слайд 52ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ
Конкретная цитохимическая реакция должна быть положительной не менее, чем
в 3% клеток
Слайд 60ПРОТОЧНАЯ ЦИТОМЕТРИЯ
Выявление лейкозных бластов в периферической крови и/или костном мозге
методом проточной цитометрии основано на выявление молекул, определяющих линейную принадлежность
клеток и стадию дифференцировки клеткиПодсчет количеств тех или иных клеток в образце и их соотношений важен для диагностики заболевания, изучения ответа на терапию, раннего обнаружения рецидива болезни
Слайд 61НЕЙРОЛЕЙКЕМИЯ – поражение нервной системы у больных острыми лейкозами. - Острые
лимфобластные лейкозы детей – 70% - Острые лимфобластные лейкозы взрослых –
50% - Острые нелимфобластные лейкозы – 30%
Слайд 62 менингоэнцефалическа форма - псевдотуморозная форма - поражение черепно-мозговых нервов - поражение периферических
нервов
Клинические
формы нейролейкемии:
Слайд 63 Диагностика нейролейкемии:
цитологическое исследование ликвора для выявления бластных клеток
моноклональное исследование ликвора
Слайд 64Стадии острого лейкоза
1. Первая атака
2. Ремиссия (I, II, III
и т.д.) 3. Рецидив (I, II, III и т.д.) 4. Терминальная стадия
(рефрактерный рецидив) 5. «Выздоровление» - стойкая ремиссия свыше 5 лет
Слайд 66Критерии ремиссии
(А.И. Воробьев, Т.В. Балакирева, 1997г.)
- В костном мозге число
бластных клеток не превышает 5%, представлены все линии кроветворения с
нормальными признаками созревания, клеточность костного мозга более 20%. - В периферической крови бластные клетки не обнаруживаются, - Отсутствуют экстрамедуллярные очаги кроветворения (включая нейролейкемию).
Слайд 67Критерии рецидива
(В.Г. Савченко и соавторы, 2002г.)
- Появление в миелограмме 10
и более процентов бластных клеток - Обнаружение бластов в периферической крови
(даже при количестве бластов в костном мозге 5 – 10%) - Появление экстрамедуллярных очагов кроветворения (включая нейролейкемию) - При первичном обнаружении в миелограмме 5 – 10% бластов, при нормальном анализе крови и отсутствии экстрамедуллярных очагов кроветворения рецидив не диагностируется. Больной продолжает получать постиндукционную терапию. Через 1 неделю стернальная пункция повторяется, при повторном обнаружении более 5% бластов констатируется рецидив.
Слайд 68 Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) представляет собой группу опухолей, морфологическим субстратом
которых являются зрелые лимфоциты
В 95-98% случаев ХЛЛ субстратом
опухоли являются зрелые В-лимфоциты 
Слайд 69Формы ХЛЛ
по А.И. Воробьеву
с соав. (2000)
Доброкачественная
Прогрессирующая (классическая)
Опухолевая
Селезеночная
Абдоминальная
Пролимфоцитарная
Костномозговая
Слайд 73ОСНОВНЫЕ
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ
КРИТЕРИИ ХЛЛ
ЛЕЙКОЦИТОЗ
АБСОЛЮТНЫЙ ЛИМФОЦИТОЗ
ТЕНИ БОТКИНА-ГУМПРЕХТА
Слайд 74ГЕМОГРАММА
АНЕМИЯ (чаще нормохромная и нормоцитарная)
ТРОМБОЦИТОПЕНИЯ
ЛЕЙКОЦИТОЗ от 30 до 200х10⁹/л
УВЕЛИЧЕНИЕ
ЛИМФОЦИТОВ до 80 – 90%
ТЕНИ БОТКИНА – ГУМПРЕХТА
КЛЕТКИ РИДЕРА –
редко (лимфоциты, имеющие почкообразное или двудольчатое ядро)ПРОЛИМФОЦИТЫ И ЛИМФОБЛАСТЫ
(при прогрессировании)
Слайд 78МИЕЛОГРАММА
ЛИМФОЦИТЫ составляют более 30% ядросодержащих клеток костного мозга
(в норме до 10%)
Резкое уменьшение клеток ЭРИТРОИДНОГО, ГРАНУЛОЦИТАРНОГО ростков
В терминальную
стадию возможна трансформация в пролимфоцитарный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, миеломную болезнь, синдром Рихтера.
Слайд 83
Хронический миелолейкоз (ХМЛ) – это злокачественная опухоль кроветворной ткани,
исходящая из клеток-предшественниц миелопоэза, морфологическим субстратом которой являются дифференцирующиеся и
зрелые гранулоцитыХМЛ – первый из описанных лейкозов и первое онкологическое заболевание, при котором у человека обнаружен специфический хромосомный маркёр – Филадельфийская или Ph-хромосома
(G. Nowell и D. Hungerford, 1960 г., г. Филадельфия)
Слайд 84При ХМЛ впервые была выявлена связь
злокачественного заболевания с конкретной
генетической аномалией. Такой характерной
аномалией является присутствие в кариотипе
так называемой
филадельфийской хромосомы. Эта мутантная хромосома
получила своё название по месту работы её
первооткрывателей, Питера Ноуелла
(Пенсильванский университет) и Дэвида
Хангерфорда (Онкологический центр Фокса
Чейза), которые впервые описали её в 1960 году в
Филадельфии (штат Пенсильвания, США).
Слайд 86СИНДРОМ ХРОНИЧЕСКОГО МИЕЛОЛЕЙКОЗА
- МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫЙ
В период бластного криза клиника, как
при остром лейкозе.
Слайд 89Фазы ХМЛ
Хроническая фаза
Прогрессирующая фаза (миелопролиферативной акселерации)
Бластный криз (острая фаза)
Слайд 90
ОСНОВНЫЕ
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ
КРИТЕРИИ ХМЛ
ЛЕЙКОЦИТОЗ
СДВИГ L-ФОРМУЛЫ ВЛЕВО
НЕТ ФЕНОМЕНА «ПРОВАЛА»
БАЗОФИЛЬНО-ЭОЗИНОФИЛЬНАЯ АССОЦИАЦИЯ
ФИЛАДЕЛЬФИЙСКАЯ ХРОМОСОМА
Слайд 92ГЕМОГРАММА
ЛЕЙКОЦИТОЗ от 50 до 300х10⁹
НАЛИЧИЕ СОЗРЕВАЮЩИХ ФОРМ: промиелоцитов,
миелоцитов, метамиелоцитов (гранулоциты могут составлять >95%);
могут быть единичные
бластыБАЗОФИЛЬНО-ЭОЗИНОФИЛЬНАЯ АССОЦИАЦИЯ (в сумме >6,5%), увеличение базофилов до 10-15%
ТРОМБОЦИТОЗ до 600-1000х10*
(нарушение агрегационной функции Tr)
В острую фазу: бласты >15%, анемия, тромбоцитопения.
Слайд 97МИЕЛОГРАММА
I фаза:
Увеличение количества гранулоцитов
Увеличение количества мегакариоцитов
Бласты и промиелоциты
10%
Слайд 98МИЕЛОГРАММА
II фаза:
Нарастает количество гранулоцитов и мегакариоцитов
(число митозов увеличено
в 4-5 раз)
Бласты и промиелоциты < 20%
Повышено количество базофилов и
эозинофиловСнижено количество клеток эритроидного ряда
Соотношение лейко/эритро 20:1 – 30:1 (в норме 3:1 - 4:1)
Слайд 99МИЕЛОГРАММА
III фаза
Бласты составляют >20%
(м.б. в сумме с
промиелоцитами)
Увеличен диаметр бластов, ядра - большие, неправильной формы
Уменьшается количество зрелых
гранулоцитовЗначительно снижено количество мегакариоцитов и эритрокариоцитов
Слайд 100ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ:
Ядросодержащие клетки костного мозга более, чем у 90%
больных содержат филадельфийскую хромосому
Слайд 102Иммунофенотипирование:
В результате реципрокной транслокации между хромосомами 9 и 22 образуется
новый гибридный белок, так называемый химерный ген (обозначаемый BCR-ABL), «работа»
которого нарушает регуляцию деления и созревания клетокBCR-ABL является активной тирозинкиназой, ответственной за онкогенную трансформацию клеток (онкобелок)
Слайд 105МНОЖЕСТВЕННАЯ МИЕЛОМА
(болезнь Рустицкого-Калера,
генерализованная плазмацитома,
миеломная болезнь) –
злокачественная опухоль системы В-лимфоцитов,
сохраняющих способность
к дифференцировке
до плазматических клеток, ведущее к разрушению костной ткани
Болеют
множественной миеломой преимущественно люди старше 40 лет
Слайд 1071848г. – H.Bence-Jones описал некую «живую материю» белкового происхождения, полученную
из мочи пациента, выпадающую в осадок при нагревании до определенной
температуры, а затем вновь растворяющуюся при кипячении1873г. – О.А.Рустицкий описал патологическую анатомию и гистологию заболевания, названного им «множественная миелома»
1889г. – O.Kahler связал миелому Рустицкого с протеинурией Бенс-Джонса
Слайд 108КЛИНИЧЕСКИЕ СИНДРОМЫ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫ
Костно-мозговой синдром
Синдром белковой патологии
Синдром повышенной вязкости
Гиперкальциемия
Геморрагический
Анемический
Синдром висцеральных
поражений
Периферическая полинейропатия
Синдром недостаточности антител
Параамилоидоз
Слайд 112ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ
Плазматические клетки (плазмоциты) — основные клетки, продуцирующие антитела в
организме человека
Являются конечным этапом развития B-лимфоцита
Слайд 114ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ
Характеристика
плазматических клеток
Крупных размеров (16—25 мкм)
Ядро занимает большую часть
клетки, имеет нежную структуру и содержит ядрышки
Ядро чаще смещено
к периферии, либо расположено центральноЦитоплазма интенсивно-синей окраски, по которой определяют принадлежность клетки к плазматическому ряду
Ячеистой («пенистой») структуры цитоплазмы
Имеется характерная перинуклеарная зона просветления
Слайд 117 Рентгенологически
Обнаруживаются миеломатозные опухоли различных размеров в ребрах,
грудине, позвоночнике, ключице, черепе, конечностях, проявляющиеся болями
Нередко возникают патологические
переломы
Слайд 118 Рентгенологически изменения костей проявляются в виде
Генерализованного остеопороза
Единичных или множественных
очагов остеолиза (образование в плоских костях округлых «штампованных»дефектов, напоминающих след
от пробойника)Патологических переломов с деформацией грудной клетки, компрессией тел поясничных и грудных позвонков
Слайд 123 Миеломная нефропатия наиболее серьезное проявление парапротеинемии
Клиника миеломной нефропатии складывается
из упорной протеинурии и развивающейся почечной недостаточности
Причиной является реабсорбция белка
Бенс-Джонса, приводящая к нефросклерозу, выпадение в канальцах парапротеина с развитием нефрогидроза, кальциноз почек
Слайд 125Синдром повышенной вязкости крови обусловлен высоким содержанием в сыворотке протеинов
Гиперпротеинемия
приводит к нарушению периферического кровотока, парестезиям, синдрому Рейно
С повышенной вязкостью
крови связаны изменения глазного дна и возможное развитие тяжелых нарушений центральной нервной системы
Слайд 127 Гиперкальциемия клинически проявляется тошнотой, рвотой, сонливостью, потерей ориентации, возможны
сопорозные состояния и кома
Слайд 129Происходят нарушения тромбоцитарных, плазменных и сосудистых факторов гемостаза
Парапротеины оседают на
мембранах тромбоцитов в виде «муфты» и приводят к их функциональной
неполноценностиОни образуют комплексы с V, VII, VIII факторами свертывания, протромбином, фибриногеном
Слайд 131Чаще развивается нормохромная анемия
При кровотечениях она носит железодефицитный характер
В случаях
дефицита витамина B12 и фолиевой кислоты в костном мозге выявляются
черты мегалобластического кроветворения
Слайд 135Периферическая полинейропатия связана с опухолевым поражением костей свода черепа и
позвоночника, в результате чего могут развиться параплегии, синдром сдавления корешков
спинномозговых нервов, гемиплегии или гемипарезыВ ряде случаев наблюдаются диэнцефально-гипофизарные и психические расстройства
Слайд 137 Снижение содержания в сыворотке крови уровня нормальных иммуноглобулинов (часто
менее 20%), нарушение антителообразоваиия приводят к вторичному иммунодефициту
Слайд 139Параамилоидоз выявляется у 15% больных миеломной болезнью
В отличии от
классического вторичного амилоидоза, в первую очередь, поражаются органы, богатые коллагеном,
сосуды, мышцы (сердце, язык), дерма, сухожилия, суставы
Слайд 140
ОСНОВНЫЕ
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ
КРИТЕРИИ ММ
В МИЕЛОГРАММЕ >10% ПЛАЗМАТИЧЕСКИХ
КЛЕТОК
(или плазмоклеточная инфильтрация
в биоптате пораженной ткани)
ОБНАРУЖЕНИЕ МОНОКЛОНАЛЬНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА при иммуноэлектроферезе
СИНДРОМ ПОРАЖЕНИЯ КОСТНОЙ ТКАНИ
Слайд 141План обследования
определение общего белка и кальция в сыворотке крови
определение
количества парапротеина (М-компонент) в сыворотке крови и суточном количестве мочи
методом электрофереза (денситометрия)исследование уровня иммуноглобулинов в сыворотке крови
определение класса и типа моноклонового иммуноглобулина в сыворотке крови и суточном количестве мочи методом радиальной иммунодиффузии и иммунофиксации с моноклональными сыворотками
Слайд 142План обследования
морфологическое исследование костного мозга, а в отсутствие его поражения-
опухолевой ткани
полный общий анализ крови с подсчетом формулы крови и
тромбоцитовбиохимический анализ крови с определением уровня креатинина, мочевой кислоты, печеночных проб
общий анализ мочи, исследование мочи по Зимницкому
рентгенография костей скелета: черепа, костей таза, ребер, лопаток, ключиц, грудины, всех отделов позвоночника, проксимальных отделов плечевых и бедренных костей
Слайд 143Стадии множественной миеломы
I стадия
Гемоглобин › 100 г\л
Кальций ≤ 2,88 ммоль\л
Рентгенологически
нормальная структура кости или 1 солитарный очаг
IgG ‹ 50 г\л
IgA
‹ 30 г\лПротеинурия BJ в моче <4 г
II стадия
Показатели между I и III стадиями
Слайд 144Стадии множественной миеломы
III стадия
Гемоглобин ‹ 85 г\л
Кальций ≥2,88 ммоль\л
Множественные очаги
деструкции в костях скелета
IgG › 70 г\л
IgA › 50
г\лПротеинурия BJ › 12 гр
Слайд 145ГЕМОГРАММА
АНЕМИЯ нормохромная
ЛЕЙКОПЕНИЯ
МИЕЛОМНЫЕ (ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ) КЛЕТКИ
УСКОРЕНИЕ СОЭ до 80-90 мм/ч
Слайд 147МИЕЛОГРАММА
ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ разной степени дифференцировки >10%
Миеломные клетки:
Крупных размеров
– 20-30 мкм
Цитоплазма – базофильная, фестончатая
Ядро – грубое, колесовидное, смещено
к периферииВстречаются клетки с множественными ядрами
Слайд 149Иммуноэлектрофорез
Иммуноэлектрофорез сыворотки крови больного с миеломой позволяет выявить присутствие М-градиента
(парапротеина)
М-градиент определяется в сыворотке у 80% больных миеломой
Примерно у 60%
больных свободные легкие цепи экскретируются с мочейИммуноэлектрофорез мочи является наиболее точным и доступным методом для выявления в моче свободных легких цепей
Для определения количества иммуноглобулинов используются различные методы исследования
Слайд 150Проточная цитометрия
Иммунохимические варианты
G-миелома (60%)
А-миелома (20%)
D-миелома (1%)
E-миелома
M-миелома
Болезнь легких цепей (Бенс-Джонса)
Диклоновые миеломы
Несекретирующая
миелома
Слайд 151
Истинная полицитемия
(болезнь Вакеза-Ослера,
эритремия)
– хронический лейкоз
с поражением на уровне клетки предшественницы миелопоэза, сохранившей способность дифференцироваться
преимущественно по красному ростку
Слайд 153Стадии полицитемии
Начальная
Эритремическая (развернутых клинических проявлений):
2А – без миелоидной метаплазии селезенки,
2Б
– с миелоидной метаплазией селезенки
Терминальная (анемическая) стадия постэритремической миелоидной метаплазии
с миелофиброзом или безВозможна трансформация в ХММ, О.эритромиелоз
Слайд 154СИНДРОМЫ
ПОЛИЦИТЕМИИ
Плеторический
эритроцианотическая окраска кожи кистей рук и лица, видимых слизистых
оболочек
симптом Купермана
симптом «кроличьих глаз»
артериальная гипертензия
эритромелалгия
Тромбогеморрагический
Миелопролиферативный
Слайд 161ГЕМОГРАММА
ЭРИТРОЦИТОЗ (эритроциты у мужчин > 6,0 х 1012/л, у женщин
> 5,7 х 1012/л)
УВЕЛИЧЕНИЕ ГЕМОГЛОБИНА (у мужчин >175г/л, у
женщин >170 г/л)УВЕЛИЧЕНИЕ ГЕМАТОКРИТА (Ht у мужчин > 52%, у женщин > 48%)
ЛЕЙКОЦИТОЗ
ТРОМБОЦИТОЗ (400000-1000000)
УМЕНЬШЕНИЕ СОЭ (0-2 мм/ч)
В терминальную стадию – панцитопения
Слайд 163МИЕЛОГРАММА
Гиперплазия красного мозга
Гиперплазия гранулоцитарного и мегакариоцитарного ростков костного
мозга (панмиелоз)
Соотношение лейко/эритро 1:1
(в норме 3-4:1)
Слайд 165ТРЕПАНОБИОПСИЯ
Более информативна трепанобиопсия костного мозга, где отмечается трехростковая пролиферация
(панмиелоз) с вытеснением из него жира
Слайд 167Классификация эритроцитозов
КЛАССИФИКАЦИЯ ЭРИТРОЦИТОЗОВ
(А.В. Демидова, 2001)
АБСОЛЮТНЫЕ:
1. Истинная полицитемия.
2. Вторичные абсолютные эритроцитозы:
На основе генерализованной тканевой гипоксии
высотная болезнь
ХОБЛ
врожденные («синие») пороки сердца
атриовенозные шунты
в легкихпервичная легочная гипертензия (болезнь Аэрзы)
синдром Пиквика
карбоксигемоглобинемия (эритроцитоз курильщиков табака)
наследственные эритроцитозы
Слайд 168Классификация эритроцитозов
Паранеопластические эритроцитозы:
рак почки
гемангиобластома мозжечка
фибромиома
миксома предсердий
опухоли желез внутренней секреции
опухоли других
локализаций
Нефрогенные эритроцитозы (на основе локальной гипоксии почек):
гидронефроз
поликистоз почек
стеноз почечных артерий
аномалии
развития почекОТНОСИТЕЛЬНЫЕ (вторичные, гемоконцентрационные):
ожоговая болезнь, шок, диарея, дегидратация, кровопотеря,
неконтролируемый прием диуретиков
