Слайд 2Вопросы устного экзамена по метаболизму липидов
Транспорт липидов в организме. Липопротеины
сыворотки крови.
Химия высших жирных кислот: строение, биологическая роль. Метаболизм.
Глицерофосфолипиды и
сфинголипиды. Строение и биологическая роль. Синтез фосфатидилхолинов.
Механизм β-окисления высших жирных кислот. Роль КоА, карнитина и АТФ в этом процессе.
Механизм β-окисления высших жирных кислот. Особенности окисления высших жирных кислот с нечетным числом углеродных атомов.
Биосинтез высших жирных кислот.
Кетоновые тела: структура, синтез, биологическая роль. Значение определения кетоновых тел для диагностики сахарного диабета.
Ацетоновые (кетоновые) тела, механизм их синтеза. Значение определения ацетоновых тел в моче для диагностики сахарного диабета.
Стерины. Холестерин, его биологическая роль. Основные этапы синтеза холестерина. Количественное определение холестерина в сыворотке крови.
Биологическая роль простагландинов, лейкотриенов и тромбоксанов.
Связь обмена углеводов и жиров.
Слайд 3Структура темы
Классификация липидов
ВЖК
Ацилглицеролы (МАГ, ДАГ, ТАГ)
Глицерофосфолипиды (фосфатидилхолин, фосфатидилсерин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилинозитол)
Сфинголипиды
(сфингомиелин, цереброзиды, ганглиозиды, глобозиды)
Стероиды (холестерин, гормоны, желчные кислоты)
Метаболизм липидов (синтез/распад/функции)
β-окисление
ВЖК (+ особенности окисления ненасыщенных и с нечетным числом С)
Синтез ВЖК
Синтез холестерина
Кетоновые тела (ацетоновые): синтез, использование, патология
Синтез глицерофосфолипидов и триацилглицеролов
Отдельные интересные вопросы
Транспорт липидов в организме – липопротеины (ХМ, ЛПОНП, ЛПНП, ЛПВП). Атеросклероз
Эйкозаноиды
Слайд 5Схема:
НАДН, ФАДН2 дыхательная
цепь АТФ
Ацетил-КоА
ЦТК НАДН, ФАДН2, ГТФ АТФ
Функция: энергетическая (требует O2)
Локализация в клетке: митохондрии
Тканевая локализация: все клетки, в особенности миокард
…
ВЖК
ацетил-КоА
НАДН
ФАДН2
Несколько молекул
Несколько молекул
Слайд 6Этапы
Попадание ВЖК внутрь клетки из крови, и активация ВЖК в
цитозоле клетки
Транспорт ВЖК в митохондрию при участии карнитина
Собственно β-окисление в
матриксе митохондрии
Слайд 7Этапы β-окисления
Попадание ВЖК внутрь клетки из крови (1) и ее
активация в цитозоле клетки (2) – образование ацил-КоА
Транспорт ВЖК в
митохондрию при участии карнитина (3)
Собственно β-окисление в матриксе митохондрии (4)
Плазматическая мембрана
Внешняя мембрана митохондрии
Внутренняя мембрана митохондрии
Слайд 8Попадание ВЖК внутрь клетки из крови, и активация ВЖК в
цитозоле клетки
ВЖК в крови транспортируются в комплексе с белком альбумином.
Другой способ – в составе ТАГов в липопротеинах
ВЖК проникает через мембрану клетки в цитозоль путем диффузии или с помощью специального белка-транспортера
Активация ВЖК – это ее присоединение к КоА. Фермент: ацил-КоА-синтетаза. Затрачивается 2(или 1, в разных учебниках по-разному) молекулы АТФ. В результате получается ацил-КоА.
Не путайте ацил-КоА (любая ВЖК + КоА) и ацетил-КоА (уксусная).
Слайд 9Сывороточный альбумин в комплексе с ВЖК (одна из форм транспорта
ВЖК в крови)
Несколько ВЖК (FA) связаны с альбумином (показан только
ход полипептидной цепи,)
Та же молекула альбумина, связанная с ВЖК, только здесь показана полипептидная цепь как она есть: видны атомы и поверхность, которые они формируют. ВЖК показаны белым с красным
Слайд 10Липопротеин – другая форма транспорта ВЖК (и вообще липидов) в
крови
Внутри липопротеина находятся ВЖК и ТАГи
Клетка захватывает липопротеин, а потом
либо поглощает его целиком, либо с помощью специального фермента (липопротеинлипаза) вытаскивает из него ВЖК, входящие в состав ТАГов
холестерин
ТАГи
ВЖК
фосфолипиды
апобелки
Слайд 11Активация ВЖК в цитозоле: синтез ацил-СоА (не путайте с ацетил-СоА)
ВЖК
попадают в цитозоль через плазматическую мембрану
В уитозоле ферменты ацил-КоА-синтетазы присоединяют
КоА к жирным кислотам (активация ВЖК)
Существует несколько таких ферментов, специфичных к жирным кислотам с различной длиной цепи – для коротких, средне- и длинноцепочечных (но мы обычно просто называем их ацил-КоА-синтетазами, не делая различий)
R = длинный углеводородный хвост жирной кислоты:
CH3 – CH2 – CH2 – CH2 – …..
ВЖК
Ацил-КоА
Слайд 12Структура ацил-КоА и ацетил-КоА
Ацил-КоА
Ацил (ВЖК)
Кофермент А
Пантотеновая кислота (В3)
Ацетил
Ацетил-КоА
Слайд 13Транспорт ВЖК в митохондрию при участии карнитина
Ферменты: карнитин-ацилтрансфераза 1 и
2. 1-я находится в цитозоле и присоединяет карнитин к ВЖК
вместо КоА.
ВЖК с присоединенным карнитином (ацил-карнитин) переносится через мембрану митохондрии (карнитин служит меткой, позволяющей белку-транспортеру захватить ВЖК и перенести ее вместе с карнитином в матрикс митохондрии)
карнитин-ацилтрансфераза 2 находится в матриксе митохондрии и и присоединяет КоА к ВЖК вместо карнитина. Карнитин переносится обратно в цитозоль
Слайд 14Транспорт ВЖК в матрикс митохондрии при участии карнитина
Карнитин – небольшая
органическая молекула. По химической структуре – аминокислота (азот с тремя
метилами – третичная аминогруппа)
Карнитин синтезируется в организме, но может быть получен с пищей
Для проникновения карнитина в клетку нужен специальный белок-транспортер. Если его нет, то человек не может использовать ВЖК как источник энергии, так как в клетках нет карнитина и ВЖК не могут транспортироваться в митохондрию
карнитин
Ацил-карнитин
карнитин
Ацил (ВЖК)
Сюда присоединяется ВЖК
Слайд 15Транспорт ВЖК в матрикс митохондрии при участии карнитина
Внешняя мембрана митохондрии
Внутренняя
мембрана митохондрии
Карнитинацилтрансфераза I
Карнитинацилтрансфераза II
Слайд 16Собственно β-окисление в матриксе митохондрии
Последовательное отщепление 2С-фрагмента (ацетил-КоА) от ацил-КоА
(ВЖК), начиная от карбоксильной группы
Для «отрезания» каждого ацетил-КоА нужно 4
последовательных реакции (цикл β-окисления). Только в результате 4-й реакции произойдет отщепление
После каждого цикла β-окисления ацил-КоА (ВЖК) укорачивается на 2 атома С и снова вступает в цикл β-окисления
β-окисление заканчивается полным расщеплением ВЖК до нескольких молекул ацтил-КоА. Например, если в ВЖК было 18С (стеариновая), то получится 9 ацетил-КоА
Каждый цикл β-окисления дает 1 НАДН и 1 ФАДН2
Последовательность промежуточных метаболитов:
Ацил-КоА → еноил-КоА → гидроксиацил-КоА → кетоацил-КоА → ацетил-КоА
Коферменты и витамины: КоА (В3 = пантотеновая), ФАД (В2 = рибофлавин), НАД (РР = никотиновая)
Слайд 17Что такое β-окисление на примере пальмитиновой кислоты (16 атомов С)
Пальмитоил-КоА
(С16)
4 реакции, в результате которых 2 атома с отщепляются в
форме ацетил-КоА
Здесь 2 атома С
Теперь эти 2 атома С здесь
4 реакции повторяются для этой более короткой ацил-КоА
В результате вся ВЖК (С16) превратилась в 8 ацетил-КоА (каждый ацетил-КоА содержит 2С)
С 10
С 12
С 14
…
С 2
Слайд 18Так выглядят 4 реакции цикла β-окисления, которые в результате приводят
к отщеплению 2 атомов С в форме ацетил-КоА
Реакции:
Дегидрирование
Гидратация
Дегидрирование
Тиолиз
Последняя, тиолазаня реакция,
приводит к отделению 2 атомов С в форме ацетил-КоА
В результате жирная кислота укорачивается на 2 атома С
После этого все 4 реакции повторяются снова
Так происходит до тех пор, пока вся жирная кислота не будет «порезана» на ацетил-КоА
1
2
3
4
Слайд 19Реакции цикла β-окисления подробно
Дегидрирование
Фермент: ацил-КоА-дегидрогеназа
Кофермент: ФАД (из витамина В2, рибофлавина)
Появляется
двойная связь (-ен), поэтому продукт реакции называется еноил-КоА
Гидратация (присоединение воды)
Фермент:
еноил-КоА-гидратаза
По месту двойной связи присоединяется молекула воды. При этом ОН-група появляется у β-атома С
Продукт реакции: гидроксиацил-КоА (ацил-КоА, у которого есть ОН-группа)
1
Ацил-КоА
Ацил-КоА-дегидрогеназа
2
еноил-КоА
еноил-КоА-гидратаза
Пояснение про смысл названия. В процессе β-окисления меняется степень окисления β-атома углерода: сначала возле него появляется двойная связь, затем ОН- и кетогруппа. Поэтому весь процесс и называется β-окисление. Есть специальные формы окисления ВЖК, которые не являются основными, но также важны: это α-окисление и ω-окисление. В этих случаях окисляется α-атом С или ω-атом С (то есть самый последний, далекий от карбоксильной группы).
гидроксиацил-КоА
Слайд 20Реакции цикла β-окисления подробно
Дегидрирование
Фермент: гидроксиацил-КоА-дегидрогеназа
Кофермент: НАД (из витамина РР, никотиновой
кислоты)
Продукт: кетоацил-КоА
В результате возле β-атома С появлется кетогруппа (вместо ОН-группы)
Тиолазная
реакция
Фермент: тиолаза
Кофермент: КоА-SH
Продукты: ацил-КоА (короче исходного на 2 атома С) и ацетил-КоА
В результате реакции КоА-SH своей SH-группой разрывает связь между соседними атомами С и остается соединенным с тем, у которого в результате 3-й реакции появилась кетогруппа
Как следствие, два крайних атома С отделяются от остальной жирной кислоты в форме ацетил-КоА
3
4
гидроксиацил-КоА
кетоацил-КоА
ацетил-КоА
ацил-КоА (на 2 атома С короче исходного)
гидроксиацил-КоА-дегидрогеназа
тиолаза
Слайд 21Особенности β-окисления ненасыщенных ВЖК
β-окисление происходит как обычно до тех пор,
пока очередь не дойдет до той части молекулы, в которой
стоит двойная связь
Получается, что очередной цикл β-окисления начинается со второго метаболита (еноил-КоА). Сначала потребуется дополнительный фермент – изомераза – который изменит конфигурацию двойной связи
Следовательно, в этом цикле не образуется ФАДН2
Следующие циклы протекают так же, как обычно (если дальше нет двойных связей)
Таким образом, если есть одна двойная связь, то получаем на 1 ФАДН2 меньше по сравнению с насыщенной ВЖК с тем же количеством С (например, для олеиновой получим на 1 ФАДН2 меньше, чем для стеариновой)
В случае, если двойных связей больше 2, окисление может протекать разными путями с привлечением дополнительных ферментов. Это связано:
с необходимостью изомеризации по двойным связям
в некоторых случаях требуется восстановление двойных связей с использованием НАДФН
Поэтому в случае полиненасыщенных жирных кислот нельзя дать простой ответ на вопрос о том, каков будет энергетический выход при их полном окислении
Слайд 22Окисление жирной кислоты с одной двойной связью
3 первых цикла β-окисления
проходят без модификаций (волнистыми линиями показаны связи, которые расщепляются в
результате этих трех циклов)
Четвертый цикл начинается с метаболита, в котором уже есть двойная связь
Однако эта связь находится в цис-конфигурации
Чтобы β-окисление продолжалось, нужно перевести эту связь в транс-конфигурацию (иначе фермент просто не подействует на этот метаболит)
Дополнительный фермент (изомераза) меняет конфигурацию связи с цис на транс
Далее циклы β-окисления протекают как обычно
Олеил-КоА (олеиновая кислота)
3 цикла β-окисления
3 ацетил-КоА
Двойная связь в цис-конфигурации
изомераза
Двойная связь в транс-конфигурации
5 циклов β-окисления
6 ацетил-КоА
Слайд 23Особенности β-окисления ВЖК с нечетным числом С
При β-окислении ВЖК с
четным числом С в результате последнего цикла β-окисления получается 2
ацетил-КоА (так как четное число С можно разделить на 2 без остатка)
В результате последнего цикла β-окисления ВЖК с нечетным числом С получается 1 ацетил-КоА (2С) + 1 пропионил-КоА (3С)
Пропионил-КоА должен быть включен в ЦТК:
Карбоксилирование пропионил-КоА (фермент: пропионил-КоА-карбоксилаза, кофермент: биотин) с образованием метилмалонил-КоА
Изомеризация метилмалонил-КоА в сукцинил-КоА (при участии витамина В12)
Получение сукцинил-КоА из пропионил-КоА при β-окислении ВЖК с нечетным числом С – пример анаплеротической реакции (реакции, в результате которых происходит пополнение метаболитов ЦТК)
Слайд 24Сначала пропионил-КоА карбоксилируется
Фермент: пропионил-КоА-карбоксилаза
Кофермент: биотин
Образовавшийся промежуточный продукт изомеризуется
Фермент: метилмалонил-КоА-эпимераза
В результате
второй реакции изомеризации образуется сукцинил-КоА
Фермент: метилмалонил-КоА-мутаза
Кофермент: В12
Таким образом, при окислении
ВЖК с нечетным числом С образуется 1 молекула сукцинил-КоА, которая идет в ЦТК
При окислении ВЖК с нечетным числом С в результате последнего цикла β-окисления образуется пропионил-КоА (3С)
пропионил-КоА
пропионил-КоА-карбоксилаза
D-метилмалонил-КоА
L-метилмалонил-КоА
сукцинил-КоА
метилмалонил-КоА-эпимераза
метилмалонил-КоА-мутаза
Слайд 26Схема:
Функция: запасание энергии
Локализация в клетке: цитозоль
Тканевая локализация: все клетки, в
особенности печень и адипоциты (жировая ткань)
…
ВЖК
ацетил-КоА
НАДФН
Несколько молекул
малонил-КоА
Несколько молекул
АТФ
Слайд 27Общая схема синтеза ВЖК
Синтаза ВЖК
Короткая кислота
малонил
Цикл синтеза
Удлиненная кислота
Новый малонил
Непосредственным источником
атомов С для синтеза ВЖК является малонил
2 атома С из
малонила поочередно добавляются, пока ВЖК не достигнет нужно длины
Каждый раз для присоединения 2 С из малонила происходят несколько реакций
Эти реакции постоянно повторяются и по своей сути они аналогичны реакциям β-окисления, но идут в обратном направлении
Фермент, синтезирующий ВЖК, называется «синтаза ВЖК». Он устроен сложно, но чтобы понять, как синтезируется жирная кислота, нужно немного представлять его структуру
В частности, нужно обратить внимание на два атома S, которые видны на схеме. Каждый из них находится в активном центре фермента и связан либо с растущей цепью ВЖК, либо с малонилом. Та часть, которая показана коричневым, называется АПБ (ацил-переносящий белок)
Полностью синтезированная ВЖК (пальмитиновая, С16)
Слайд 28Этапы
Превращение ацетил-КоА в малонил-КоА (карбоксилирование = присоединение карбоксильной группы):
Фермент: ацетил-КоА-карбоксилаза
(регуляторный фермент синтеза ВЖК)
Кофермент: биотин (витамин Н)
Требует затраты АТФ
Присоединение малонил-КоА
к растущей цепи жирной кислоты и дальнейшие реакции. Конечный продукт этого этапа –пальмитиновая кислота (С16)
Элонгация и десатурация (синтез более длинный и ненасыщенных ВЖК)
Слайд 291 этап: синтез малонил-КоА
На следующем этапе малонил-КоА принимает участие в
синтезе ВЖК, входя в ее состав
Любая ВЖК синтезируется путем последовательного
присоединения двухуглеродных фрагментов, источниками которых является малонил-КоА
Поэтому большинство ВЖК в организме содержат четное число атомов С (16, 18, 20, …)
Ацетил-КоА
Малонил-КоА
Ацетил-КоА-карбоксилаза
Слайд 30Присоединение малонил-КоА к растущей цепи жирной кислоты и дальнейшие реакции
Фермент:
синтаза ВЖК. Состоит из нескольких доменов, каждый их которых катализирует
одну из реакций синтеза ВЖК
Один из доменов синтазы ВЖК называется АПБ. АПБ = ацилпереносящий белок. К нему (через атом S) прикреплены промежуточные метаболиты во время синтеза ВЖК.
Этап включает в себя 4 реакции, которые происходят последовательно (цикл синтеза ВЖК)
1 атом С уходит в форме СО2. Таким образом, присоединяется только 2 атома С
Последовательность метаболитов:
(Ацетил-КоА → малонил-КоА )→ кетоацил-АПБ → оксиацил-АПБ → еноил-АПБ → ацил-АПБ
После завершения каждого цикла присоединяется еще один малонил-АПБ, и все реакции повторяются
Синтез останавливается, когда ВЖК достигает длины 16С (то есть конечный продукт синтеза = пальмитиновая кислота. Для ее синтеза необходимо 8 ацетил-КоА)
Слайд 31R – углеводородный хвост кислоты
После каждого цикла кислота удлиняется на
2 атома С
Поэтому ацил, который получается в конце каждого цикла
на 2 атома С длиннее того ацила, который вступил в цикл
Новый малонил реагирует с ВЖК, синтезированной в предыдущих циклах. От малонила отщепляется карбоксильная группа (уходит в форме СО2), а оставшиеся 2 С присоединяются к ВЖК, синтезированной в предыдущих циклах. Образуется промежуточный метаболит – кетоацил-АПБ
Кетоацил восстанавливается до гидроксильной группы – образуется промежуточный метаболит гидроксиацил-АПБ. Используется кофермент НАДФН (из пентозофосфатного пути)
Гидроксильная группа уходит в форме воды, появляется двойная связь. Образуется промежуточный метаболит еноил-АПБ
Двойная связь восстанавливается до полностью насыщенной. Обарзуется ацил-АПБ, который длиннее исходного на 2 атома С. Используется НАДФН
Ацил снова вступает в цикл удлинения, если только он не достиг 16 атомов С (пальмитиновая кислота). Если же длина составляет 16 атомов С (пальмитат), то ВЖК отделяется от фермента и подвергается элонгации и десатурации другими ферментными системами
Малонил-КоА
Малонил-АПБ
Кетоацил-АПБ
Гидроксиацил-АПБ
Еноил-АПБ
ацил-АПБ
ацил-АПБ
кетоацил-АПБ-синтаза
кетоацил-АПБ-редуктаза
гидроксиацил-АПБ-дегидрогеназа
еноил-АПБ-редуктаза
ацилтрансфераза
1
2
3
4
Подробная схема присоединения каждый 2 атомов С к ВЖК во время ее синтеза
5
Слайд 32Элонгация и десатурация (синтез более длинных и ненасыщенных ВЖК)
Элонгация (удлинение)
происходит в митохондриях и гладком ЭПР. Химический механизм идентичен синтезу
пальмитата
Десатурация (добавление двойных связей) протекает в гладком ЭПР
Ферменты млекопитающих не могут ставить двойную связь дальше С-10
Слайд 33Ферменты млекопитающих не могут ставить двойную связь на отрезке между
С-10 и дальним концом (ω-концом) ВЖК
C-10
(ω-9)
Можно поставить двойную связь в
этой части молекулы
Нельзя поставить двойную связь в этой части молекулы
млекопитающие (и человек) могут синтезировать только некоторые ненасыщенные ВЖК, а именно те, у которых двойные связи стоят не дальше С-10 (если считать с конца, то этот атом углерода обозначается ω-9)
остальные жирные кислоты, у которых двойные связи стоят после С-10 (ω-9), мы должны получать с пищей (они называются незаменимые, или витамин F)
для простоты будем считать, что линолевая, линоленовая и арахидоновая кислоты являются незаменимыми
Слайд 34Дополнение
Источники ацетил-КоА для синтеза ВЖК
Источники НАДФ (и сравнение НАДФН и
НАДН)
Слайд 35Источники ацетил-КоА для синтеза ВЖК
Откуда такой вопрос? Дело в том,
что синтез ВЖК происходит в цитозоле, а ацетил-КоА образуется в
митохондрии (основной источник ацетил-КоА здесь – превращение пирувата в ацетил-КоА, а источник пирувата – глюкоза, см. гликолиз)
Мембрана митохондрии непроницаема для ацетил-КоА. Как ацетил-КоА попасть из митохондрии в цитозоль?
В мембране митоходндрии есть белок-транспортер цитрата. Поэтому ацетил-КоА превращается в цитрат, соединяясь с оксалоацетатом (1-я реакция ЦТК). Но дальше цитрат выходит из митохондрии в цитозоль
В цитозоле цитрат превращается обратно в окслоацетат и ацетил-КоА
Ацетил-КоА идет на синтез ВЖК (и холестерина)
Оксалоацетат превращается в малат или пируват, которые возвращаются в митохондрию
Этот цикл называется цитрат-малат-пируватный переносчик (= шунт = челнок)
Слайд 36Синтез цитрата из ацетил-КоА и оксалоауетата в матриксе митохондрии
Перенос цитрата
из матрикса в цитозоль
Превращение цитрата обратно в оксалоацетат и
ацетил-КоА. Ацетил-КоА идет на синтез ВЖК и холестерина
Превращение оксалоацетата в малат (яблочный фермент, образование НАДФН)
Возвращение малата разными путями обратно в матрикс митохондрии и его превращение в оксалоацетат
Таким образом, оксалоацетат постоянно возвращается обратно в матрикс митохондрии, а ацетил-КоА – не возвращается
Исходно источником ацетил-КоА в митохондрии является пируват (из глюкозы)
Цитрат-малат-пируватный переносчик
1
2
3
4
5
Двойная мембрана митохондрии
цитозоль
Матрикс
Слайд 37Источники НАДФ (и сравнение НАДФН и НАДН)
Что такое:
НАДФН = никотинамидадениндинуклеотидфосфат,
из витамина РР (никотиновая кислота). От НАДН отличается только наличием
фосфатной группы в структуре
Источники:
НАДФН (восстановленная форма) образуется в пентозофосфатном пути (а также при работе цитрат-малат-пируватного переносчика)
Функция:
НАДФН используется в реакциях образования сложных веществ из более простых (анаболизм), например в синтезе ВЖК или холестерина из ацетил-КоА
НАДФН участвует в защите клетки от активных форм кислорода
Сравнение с НАДН:
В отличие от НАДФН, НАДН используется в реакциях распада сложных веществ до более простых (катаболизм), например в гликолизе, ЦТК, β-окислении
Слайд 38Сравнение β-окисления и синтеза ВЖК
Слайд 40Схема:
Функция: синтез холестерина (входит в состав мембран, предшественник стероидных гормонов,
желчных кислот, витамина D)
Локализация в клетке: цитозоль
Тканевая локализация: наиболее интенсивно
в печени, кишечнике, половых железах
ацетил-КоА
Несколько молекул
АТФ
…
НАДФН
холестерин
Слайд 41Основной принцип
Последовательное соединение молекул, содержащих небольшое количество атомов С
На каждом
этапе количество атомов С в молекулах становится все больше
В итоге
из ацетила (2С) получаем большую молекулу холестерина (27С)
Слайд 424 этапа синтеза холестерина
Синтез мевалоновой кислоты
Исходное вещество – ацетил-КоА
Используется НАДФН
Регуляторный
фермент – ГМГ-КоА-редуктаза (регулируется концентрацией холестерина)
До получения мевалоновой кислоты этот
этап полностью совпадает с синтезом кетоновых тел (который происходит в митохондриях, а не в цитозоле)
Синтез активированного изопрена (изопентенилпирофосфат)
На этой стадии используется АТФ
Из активированного изопрена также синтезируются изопреноиды (= терпены = терпеноиды): витамины А, Е, К, кофермент Q
Синтез сквалена
Циклизация сквалена с образованием ланостерола (1-й циклический продукт в синтезе холестерина) и, затем, холестерина
Слайд 43Этапы синтеза холестерина: конечные продукты 4 этапов
Синтез мевалоновой кислоты из
ацетил-КоА
Синтез активированного изопрена (изопентенилпирофосфат)
Синтез сквалена
Циклизация сквалена и в конечном итоге
образование холестерина
холестерин
сквален
активированный изопрен
мевалоновая кислота
Ацетил-КоА
Слайд 441-й этап: синтез мевалоновой кислоты
В первых двух реакциях 3 молекулы
ацетил-КоА соединяются между собой (эти две реакции такие же, как
и в синтезе кетоновых тел)
В результате образуется ГМГ-КоА
ГМГ-КоА восстанавливается до мевалоновой кислоты
Фермент: ГМГ-КоА-редуктаза (регуляторный)
Кофермент: НАДФН
Ацетил-КоА
Ацетоацетил-КоА
ГМГ-КоА
Мевалоновая кислота
ГМГ-КоА-редуктаза
Слайд 45Обратите внимание на затраты АТФ
Посмотрите на структуру двух конечных метаболитов
(они оба важны и могут превращаться один в другой в
простой реакции изомеризации)
Оба активированных изопрена содержат по 5 атомов С (С5 на следующей схеме)
2-й этап: синтез активированного изопрена
Слайд 463-й этап: синтез сквалена
Благодаря наличию пирофосфатов в каждой из молекул,
сначала происходит объединение двух молекул активированного изопрена (конденсация)
В результате образуется
молекула геранилпирофосфата: С5 + С5 = С10
Снова, благодаря пирофосфатам, один геранилпирофосфат конденсируются с одним активированным изопреном с образованием фарнезилпирофосфата: С10 + С5 = С15
И снова, благодаря пирофосфатам, два фарнезилпирофосфата конденсируются и дают сквален: С15 + С15 = С30
Сквален длинный, нециклический, местами разветвленный
С5
С5
С10
С15
С5
С15
С30
Слайд 47От сквалена до ланостерола – две реакции
Сначала сквален окисляется, а
затем циклизуется с образованием ланостерола
Циклизацию катализируется один фермент, он не
отпускает свой субстрат до тех пор, пока не образуются все 4 цикла ланостерола
Для образования холестерина из ланостерола необходимо примерно 20 реакций
4-й этап: циклизация сквалена, образование ланостерола и, затем, холестерина
сквален
ланостерол
холестерин
Слайд 49Схема:
Функция: энергетическая (как источник энергии используются во всех тканях, кроме
печени)
Локализация в клетке: митохондрии гепатоцитов
Тканевая локализация: только печень
Когда:
Сахарный диабет (1-го
типа, т.е. инсулинзависимый)
голодание
ацетон
ацетил-КоА
Несколько молекул
…
Ацетоацетат
β-гидроксибутират
Слайд 50Структуры кетоновых тел
Ацетоацетат и гидроксибутират могут обратимо превращаться друг в
друга в одну реакцию. Принципиальной разницы в функции между этими
двумя веществами нет
Ацетон образуется из ацетоацетата в крови без участия ферментов (неферментативно)
Ацетон не может использоваться организмом, выдыхается легкими (на самом деле это упрощенная картина, он используется, но это за пределами курса общей биохимии)
По сути ацетоацетат и гидроксибутират состоят из 2 молекул ацетила и являются транспортной формой ацетила в крови
Ацетоацетат
(ацетоуксусная кислота)
Ацетон
β-гидроксибутират
(β-гидроксимасляная кислота)
Слайд 51Синтез кетоновых тел
Две молекулы ацетил-КоА конденсируются с образованием ацетоацетил-КоА
К нему
присоединяется третья молекула ацетил-КоА, образуется ГМГ-КоА (см. синтез холестерина)
ГМГ-КоА превращается
в ацетоацетат (не мевалоновая кислота, как в синтезе холестерина, так как здесь работает другой фермент)
Ацетоацетат превращается в гидроксибутират
Ацетоацетат превращается в ацетон
1
2
3
4
5
Слайд 52Условия образования кетоновых тел в печени
Усиление β-окисления приводит к образованию
большого количества ацетил-КоА
Так как при голодании и сахарном диабете усиливается
глюконеогенез из оксалоацетата, то в печени устанавливается дефицит оксалоацетата
Из-за этого ацетил-КоА не может вступить в ЦТК (т.к. 1-я реакция – это соединение ацетил-КоА с оксалоацетатом, а он в дефиците)
Поэтому ацетил-КоА идет на синтез кетоновых тел
Слайд 53Ацетил-КоА
пируват
глюкоза
Глюкозо-6-Ф
Кетоновые тела
ВЖК
цитрат
оксалоацетат
Метаболизм ацетил-КоА в печени в норме
Когда углеводов достаточно, они
являются источником пирувата
Пируват превращается в ацетил-КоА и идет в ЦТК,
соединяясь с оксалоацетатом
Другим источником ацетил-КоА являются ВЖК
Небольшие количества ацетил-КоА идут на синтез кетоновых тел. Но их образуется немного, так как большая часть ацетил-КоА уходит в ЦТК
Слайд 54Ацетил-КоА
пируват
глюкоза
Глюкозо-6-Ф
Кетоновые тела
ВЖК
цитрат
оксалоацетат
Метаболизм ацетил-КоА в печени при голодании и сахарном диабете
Когда
углеводов мало, в печени запускается глюконеогенез, в процессе которого используется
оксалоацетат
Недостаток оксалоацетата в ЦТК приводит к тому, что весь образующийся ацетил-КоА не может вступить в ЦТК
В то же время, ВЖК интенсивно окисляются и дают много ацетил-КоА (так как при недостатке углеводов ВЖК становятся основным источником энергии)
Поэтому избыток ацетил-КоА идет на синтез кетоновых тел. Теперь их образуется много, так как большая часть ацетил-КоА не может войти в ЦТК
Слайд 55Использование кетоновых тел
Из печени кетоновые тела (ацетоацетат и β-гидроксибутират) выделяются
в кровь
В крови ацетоацетат может неферментативно (без участия фермента) превратиться
в ацетон (не используется, выдыхается)
Кетоновые тела попадают в ткани (сердце, мышцы, мозг) и там превращаются обратно в ацетил-КоА
Ацетил-КоА идет в ЦТК и дает энергию
Слайд 56Реакции превращения кетоновых тел в ацетил-КоА (использование кетоновых тел в
качестве источников энергии)
Кетоновые тела поступают в клетку (сердечная или скелетная
мышца, мозг)
Здесь они могут превращаться друг в друга
Ацетоацетат в два этапа разбивается на 2 молекулы ацетил-КоА:
Сначала образуется ацетоацетил-КоА
Затем ацетоацетил-КоА разрывается на 2 молекулы ацетил-КоА
Ацетил-КоА идет в ЦТК, где окисляется и дает энергию
β-гидроксибутират
Ацетоацетат
2 х Ацетил-КоА
Ацетоацетил-КоА
Слайд 57Синтез глицерофосфолипидов и триацилглицеролов
Слайд 58Схема:
Функция:
Запасающая (ТАГи)
Синтез мембранных липидов
Локализация в клетке: цитозоль
Тканевая локализация: все
ткани
ацил-КоА (ВЖК)
…
ТАГи
Глицерофосфолипиды:
фосфатидилхолин (лецитин)
фосфатидилэтаноламин
фосфатидилсерин
фосфатидилинозитол
Глицерин/ДАФ/ГАФ
ЦТФ
Слайд 59Источники глицериновой части в молекулах глицеролипидов:
Глицерин (только в печени, где
он может быть фосфорилирован глицеролкиназой)
ДАФ или ГАФ из гликолиза (в
жировой ткани)
Промежуточными веществами в синтезе ТАГ и глицерофосфолипидов являются фосфатидная кислота и ДАГ (диацилглицерол)
Для активации полярных групп (этаноламина или холина) перед их присоединением к липиду нужен ЦТФ (цитидинтрифосфат): сначала образуются ЦДФ-холин или ЦДФ-этаноламин
Фосфатидилэтаноламин может метилироваться (3 раза, донором метильной группы является S-аденозилметионин = SAM), превращаясь в фосфатидилхолин
В составе фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина холин и этаноламин могут меняться на серин. Получается фосфатидилсерин. Реакция замены обратима
Слайд 60Первый этап синтеза: образование глицериновой части молекул ТАГов и глицерофосфолипидов
Возможны
2 способа:
ДАФ (метаболит гликолиза) превращается сразу в глицерол-3-фосфат. Этот способ
работает во всех тканях
Глицерин, получающийся при гидролизе глицеролипидов, может фосфорилироваться. Это происходит только в печени, так как только там есть фермент глицеролкиназа
Образовавшийся глицерол-3-фосфат используется как непосредственный источник глицериновой части в молекулах глицеролипидов
2
1
ДАФ
глицерин
Глицерол-3-фосфат
Слайд 61Второй этап синтеза: образование фосфатидной кислоты
Присоединение к глицерол-3-фосфату первой ВЖК.
В клетке ВЖК предварительно соединяется с КоА (активируется), то есть
образуется ацил-КоА. На рисунке R = углеводородный хвост кислоты
Присоединение к глицерол-3-фосфату второй ВЖК
В результате получается фосфатидная кислота
1
2
Ацил-КоА
Ацил-КоА
Фосфатидная кислота
Слайд 62Третий этап: превращение фосфатидной кислоты в ДАГ
От фосфатидной кислоты
отщепляется фосфат, что приводит к образованию ДАГ (диацилглицерол)
Далее ДАГ может
использоваться двумя способами. Из него могут синтезироваться:
ТАГи. Для этого нужно к свободной ОН-группе добавить еще одну ВЖК (реакция, аналогичная присоединению первых двух ВЖК)
Глицерофосфолипиды (см. следующий слайд). Для этого нужно к ОН-группе присоединить полярную группу (холин / этаноламин) с фосфатом
ДАГ (диацилглицерол)
Фосфатидная кислота
Слайд 63Раздвоение метаболического пути: синтез ТАГов и глицерофосфолипидов
Для того, чтобы полярная
группа (холин / этаноламин) присоединилась, сначала происходит ее активация
Для этого
холин / этаноламин фосфорилируются
Затем к ним присоединяется цитидиновый нуклеотид (реакция с ЦТФ)
Наконец, с активированной полярной группой реагирует ДАГ (см. его образование на предыдущем слайде)
Таким образом, получается глицерофосфолипид. Реакции для холина и этаноламина аналогичны
Обратите внимание на участие нуклеотида (ЦТФ) в процессе синтеза фосфолипидов
1
2
3
Слайд 64- серин
+ этаноламин
- серин
+ холин
+серин
- холин
+серин
- этаноламин
Общая (упрощенная) схема образования
глиферофосфолипидов, начиная с ДАГ
ДАГ
(диацилглицерол)
фосфатидилхолин
фосфатидилсерин
фосфатидилэтаноламин
ЦДФ-холин
ЦДФ-этаноламин
3 x SAM
К ДАГу присоединяется этаноламин или
холин (из соответствующих предшественников), образуются фосфатидилхолин и фосфатидилэтаноламин
Фосфатидилэтаноламин метилируется (источником метильных групп служит S-аденозилметионин, см. лекции по метаболизму аминокислот), образуется фосфатидилхолин
Холин и этаноламин могут быть заменены на серин, получается фосфатидилсерин
Таким образом, есть несколько путей образования каждого из фосфолипидов
Слайд 66Липопротеины (ЛП)
Простые липиды, например ВЖК, могут транспортироваться в крови в
комплексе с альбумином. Но для транспорта большого количества липидов такой
вариант не подходит
Так как липиды нерастворимы в сыворотке крови, то и простой выброс их из органа в кровь не позволит эффективно их транспортировать
Поэтому из липидов сначала (в клетках, где они синтезированы) образуются специальные частицы – ЛП
Они хорошо растворимы в сыворотке крови благодаря своей структуре
Слайд 67Структура ЛП
По форме – везикулы (пузырьки, шарики)
Снаружи – оболочка из
одного слоя фосфолипидов (полярная часть смотрит наружу, гидрофобные хвосты -
внутрь)
Внутри – плохо раствримые в воде ВЖК, ТАГи, холестерин
В оболочку интегрирован белок (апобелок):
Улучшает растворимость ЛП
Обеспечивает узнавание ЛП клеткой, для которой ЛП предназначен (через рецептор или ЛП-липазу)
Активирует ЛП-липазу на поверхности клетки, благодаря которой клетка получает липиды из ЛП
Слайд 68Липопротеин – другая форма транспорта ВЖК (и вообще липидов) в
крови
Внутри липопротеина находятся ВЖК и ТАГи
Клетка захватывает липопротеин, а потом
либо поглощает его целиком, либо с помощью специального фермента (липопротеинлипаза) вытаскивает из него ВЖК, входящие в состав ТАГов
холестерин
ТАГи
ВЖК
фосфолипиды
апобелки
Слайд 69Типы ЛП
ХМ (хиломикроны): транспорт липидов из кишечника в ткани (прежде
всего, жировую и мышечную). Образуются в кишечнике, содержат пищевые липиды
ЛПОНП
(ЛП очень низкой плотности): транспорт липидов, синтезированных в печени, в ткани
ЛПНП (ЛП низкой плотности): транспорт холестерина в ткани. Образуются из ЛПОНП
ЛПВП (ЛП высокой плотности): транспорт холестерина из тканей в печень. Забирают холестерин из тканей.
Слайд 70печень
кишечник
Свободные ВЖК
Капилляры мышечной, жировой ткани, молочной железы
ХМ
ЛПОНП
Остаточные ХМ
ЛПНП
ЛПВП
Слайд 71Роль в развитии атеросклероза
Атерогенные («плохой холестерин»): ЛПОНП и ЛПНП. При
увеличении их концентрации увеличивается вероятность развития атеросклероза
Антиатерогенные («хороший холестерин»): ЛПВП.
При увеличении их концентрации снижается вероятность развития атеросклероза
Слайд 73Гормоноподобные вещества, синтезируемые из арахидоновой кислоты (С20:4). В структуре есть
атом О, циклы и двойные связи
Группы:
Простагландины (регуляция сокращения гладкой мускулатуры)
Простациклины
(предотвращают активацию тромбоцитов)
Тромбоксаны (регулируют свертывание крови)
Лейкотриены (регуляция поведения лейкоцитов)
Все вместе эйкозаноиды регулируют воспалительную реакцию
Слайд 74Синтез
Арахидоновая кислота не содержится в клетках в свободном виде, а
входит в состав фософлипидов мембраны. Для того, чтобы она стала
доступной для синтеза эйкозаноидов, ее необходимо отрезать от фосфолипида. Это делает фосфолипаза А2
После этого синтез эйкозаноидов осуществляется 2 ферментами, в зависимости от типа эйкозаноида:
ЦОГ (циклооксигеназа): синтезирует простагландины, тромбоксаны и простациклины
ЛОГ (липоксигеназа): синтезирует лейкотриены
Противовоспалительные препараты (ПВП) подавляют синтез эйкозаноидов
НПВП (нестероидные ПВП, например аспирин, ибупрофен, напроксен) ингибируют ЦОГ
СПВП (стероидные ПВП, например глюкокортикоиды) ингибируют фосфолипазу А2
Слайд 75Группы эйкозаноидов (простагландины, тромбоксаны и лейкотриены), синтезируемых из арахидоновой кислоты
НПВП
= нестероидные противовоспалительные препараты
НПВП
