Слайд 1СОВРЕМЕННЫЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ
Лектор Ст. преподаватель
Передеряев Олег Игоревич
Слайд 2Тонкослойная хроматография (ТСХ)
Газо-жидкостная хроматография (ГЖХ, ГХ)
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)
Капиллярный электрофорез
(КЭ)
Масс-спектроскопия (МС)
Слайд 3ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ
ЖИДКОСТНАЯ
ХРОМАТОГРАФИЯ
(ВЭЖХ)
Слайд 4Хроматография -
процесс разделения смесей веществ, основанный на количественных различиях в
поведении разделяемых компонентов при их непрерывном перераспределении между двумя контактирующими
фазами, одна из которых неподвижна, а другая имеет постоянное направление движения.
Слайд 5Михаил Семенович Цвет
14.05.1872 - 26.06.1919
21 марта 1903 года
доклад на заседании
биологического отделения Варшавского общества естествоиспытателей
«О новой категории адсорбционных явлений и
о применении их к биохимическому анализу»
Слайд 6Классификация видов хроматографии
По агрегатному состоянию фаз
Газовая хроматография
Газо-жидкостная хроматография
Газо-твёрдофазная хроматография
Жидкостная
хроматография
Жидкостно-жидкостная хроматография
Жидкостно-твёрдофазная хроматография
Сверхкритическая флюидная хроматография
По способу ввода пробы
Элюентная хроматография
Фронтальная
хроматография
Вытеснительная хроматография
Слайд 7Классификация видов хроматографии
По механизму взаимодействия
Распределительная хроматография
Ионообменная хроматография
Адсорбционная хроматография
Эксклюзионная хроматография гель
–хроматография
Адсорбционно-комплексообразовательная хроматография
По цели проведения
Аналитическая хроматография
Препаративная хроматография
Слайд 8Наиболее эффективный метод анализа органических проб сложного состава
Возможно определение нелетучих
соединений, соединений с большой молекулярной массой, что невозможно в газо-жидкостной
хроматографии
Процесс анализа пробы делится на 2 этапа:
Разделение пробы на составляющие компоненты;
Детектирование и измерение содержания каждого компонента
Особенности ВЭЖХ
Слайд 9Слив
Подвижная фаза
Насос
Дегазатор
Предколонка
Хроматографическая колонка
Детектор
Смеситель
Инжектор
Схема прибора
Слайд 10Хроматографические колонки для ВЭЖХ
Колонки с обращенной фазой (С18, С8, фенильные
и пр.)
Колонки с прямой фазой (силикагельные)
Колонки с полярными фазами (CN,
аминоколонки)
Специализированные колонки для решения конкретных задач (например, хиральные колонки)
Колонки для препаративной жидкостной хроматографии
Слайд 12Детекторы в ВЭЖХ
Универсальные
Рефрактометрический
По светорассеянию
Масс-детектор
Селективные
Спектрофотометрический
Фотодиодноматричный
Флуоресцентный
Амперометрический
Кондутометрический
Масс-детектор
Слайд 14Сравнение спектров морфина и неизвестного компонента
Совпадение 999,794
Различие спектров морфина и
неизвестного компонента
Рассчетная оценка тождественности спектров
Слайд 16Сущность метода
Метод капиллярного электрофореза (КЭ) основан на разделении компонентов сложной
смеси в кварцевом капилляре под действием приложенного электрического поля.
Полученная последовательность
пиков называется электрофореграммой, при этом качественной характеристикой вещества является параметр удерживания (время миграции), а количественной – высота или площадь пика, пропорциональная концентрации вещества.
Слайд 18Введение проб
Объем вводимой пробы не превышает 2
нл. Проба может быть введена в капилляр следующими способами:
Электрофоретический
ввод пробы
Электрокинетический ввод пробы
Вытеснительный ввод пробы
Слайд 19Детектирование
Применяются те же детекторы, что и ВЭЖХ, а именно:
Фотометрические
Флуоресцентные
Электрохимические
Кондуктометрические
Масс-детекторы
Другие
Слайд 20КЭ имеет ряд преимуществ по сравнению с ВЭЖХ:
высокая эффективность разделения
экономичность,
т.к. практически не требуется применение дорогостоящих высокочистых растворителей (ацетонитрил, метанол,
гексан) и малый расход реактивов;
отсутствие дорогостоящих хроматографических колонок;
отсутствие дорогостоящих прецизионных насосов высокого давления, необходимых для ВЭЖХ;
простота аппаратурного оформления;
экспрессность анализа.
Слайд 21Применение капиллярного электрофореза
анализ объектов окружающей среды: определение катионов и анионов
в водах, определение пестицидов и гербицидов в воде и почве,
определение фенолов(хлор-, нитро-, метилфенолов).
в пищевой промышленности: для определения катионов, анионов в минеральной воде и водке; консервантов, катионов, анионов, витаминов, антиоксидантов, красителей в напитках и соках; витаминов, аминокислот, микотоксинов в различных продуктах;
в фармаци: для анализа лекарственных препаратов, для технологического контроля; разделения энантиомеров;
в биохимии и медицине: для определения белков и аминокислот в биожидкостяхгликозилированного гемоглобина и исследования фармакокинетики;
в криминалистике: для выявления следов взрывчатых и наркотических веществ.
Слайд 22Электрофореграмма смеси лекарственных средств
Слайд 24 Масс-спектрометрия является физико-химическим методом анализа, заключающимся в переводе молекул образца
в ионизированную форму с последующим разделением и регистрацией образующихся при
этом положительных или отрицательных ионов.
Слайд 25Этапы масс-спектрометрического исследования
Ввод образца в источник ионов
Перевод молекул(ы) образца в
заряженную форму
Разделение ионов по массам
Регистрация масс ионов и их количеств
Слайд 26Ввод образца в источник ионов
Прямой ввод
Мембранный ввод
Хроматомасс-спектрометрия
Жидкостная хроматография – масс-спектрометрия
Капиллярный
электрофорез – масс-спектрометрия
Слайд 27Ионизация веществ
Электронный удар, электронная ионизация
Химическая ионизация
Десорбционная химическая ионизация
Полевая ионизация
Плазменная десорбционная
масс-спектрометрия
Лазерная десорбционная масс-спектрометрия
Бомбардировка быстрыми атомами
Химическая ионизация при атмосферном давлении
Электрораспыление
Ультразвуковое распыление
Матричная
лазерная десорбционная ионизация
Слайд 28Разделение ионов / Масс анализаторы
Здесь происходит сортировка ионов по массам
(точнее по отношению массы к заряду, или m/z). Существуют следующие
типы масс-анализаторов:
непрерывные масс-анализаторы
Магнитный и электростатический секторный масс-анализатор
Квадрупольный масс-анализатор
импульсные масс-анализаторы
Времяпролётный масс-анализатор
Ионная ловушка
Слайд 29Регистрация ионов
На фотопластинке
Динодные вторично-электронные умножители
Фотоумножители
Слайд 30Преимущества масс-спектрометрии
Высокая чувствительность (10-9 – 10-14)
Экспрессность метода
Информативность метода (сегодня можно
проанализировать соединение практически любой сложности)
Надежность метода