Разделы презентаций


Полимеразная цепная реакция

Полимеразная цепная реакцияэто эффективный способ получения in vitro большого числа копий специфических нуклеотидных последовательностей

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1ПОЛИМЕРАЗНАЯ
ЦЕПНАЯ
РЕАКЦИЯ
(ПЦР)
Prezentacii.com

ПОЛИМЕРАЗНАЯЦЕПНАЯРЕАКЦИЯ(ПЦР)Prezentacii.com

Слайд 2Полимеразная цепная реакция
это эффективный способ получения in vitro
большого числа

копий специфических
нуклеотидных последовательностей

Полимеразная цепная реакцияэто эффективный способ получения in vitro большого числа копий специфических нуклеотидных последовательностей

Слайд 3ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание

пробирок, обычно с точностью не менее 0,1 °C.

Современные амплификаторы позволяют

задавать сложные программы, в том числе с возможностью «горячего старта», Touchdown ПЦР и последующего хранения амплифицированных молекул при 4 °C..

Амплификатор

нажми на картинку

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1 °C.

Слайд 4Для ПЦР необходимы:
ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который

требуется амплифицировать.

Два праймера, комплементарные противоположным концам разных цепей

требуемого фрагмента ДНК.

Термостабильная ДНК-полимераза — фермент, который катализирует реакцию полимеризации ДНК. Полимераза для использования в ПЦР должна сохранять активность при высокой температуре длительное время, поэтому используют ферменты, выделенные из термофилов — Thermus aquaticus (Taq-полимераза), Pyrococcus furiosus (Pfu-полимераза), Pyrococcus woesei (Pwo-полимераза) и другие.

Дезоксинуклеозидтрифосфаты (dATP, dGTP, dCTP, dTTP).
Для ПЦР необходимы:  ДНК-матрица, содержащая тот участок ДНК, который требуется амплифицировать.  Два праймера, комплементарные противоположным

Слайд 5ПЦР осуществляется в ходе
трехэтапного циклического процесса:
Денатурация
Ренатурация
Синтез

ПЦР осуществляется в ходе трехэтапного циклического процесса:ДенатурацияРенатурацияСинтез

Слайд 7Денатурация
Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94—96°C (или до 98 °C, если используется

особенно термостабильная полимераза) на 0,5—2 мин., чтобы цепи ДНК разошлись.



Эта стадия называется денатурацией, так как разрушаются водородные связи между двумя цепями ДНК.

Иногда перед первым циклом (до добавления полимеразы) проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2—5 мин. для полной денатурации матрицы и праймеров. Такой приём называется горячим стартом, он позволяет снизить количество неспецифичных продуктов реакции.
ДенатурацияДвухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94—96°C (или до 98 °C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5—2 мин., чтобы

Слайд 8Ренатурация (Отжиг)
Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться

с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом.

Температура отжига зависит

от состава праймеров и обычно выбирается на 4—5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5—2 мин.

Неправильный выбор температуры отжига приводит либо к плохому связыванию праймеров с матрицей (при завышенной температуре), либо к связыванию в неверном месте и появлению неспецифических продуктов (при заниженной температуре).
Ренатурация (Отжиг)Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом.

Слайд 9Синтез (Элонгация)
ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки.

Это — стадия элонгации.

Полимераза начинает синтез второй цепи от 3'-конца

праймера, который связался с матрицей, и движется вдоль матрицы.

Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы Taq и Pfu наиболее активны при 72 °C.
Синтез (Элонгация)ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Полимераза начинает синтез второй

Слайд 11Применение ПЦР
Криминалистика
Установление отцовства
Медицинская диагностика
Клонирование генов
мутагенез

Применение ПЦРКриминалистикаУстановление отцовстваМедицинская диагностикаКлонирование геновмутагенез

Обратная связь

Если не удалось найти и скачать доклад-презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое TheSlide.ru?

Это сайт презентации, докладов, проектов в PowerPoint. Здесь удобно  хранить и делиться своими презентациями с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика