Слайд 1
ГБОУ ВПО «ТИХООКЕАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ» МЗ РФ
Кафедра микробиологии
и вирусологии
Антитела и антителогенез
д.м.н., проф. Шаркова В. А.
Слайд 2Иммунная система – один из важнейших механизмов адаптации организма и
мощный фактор, направленный на сохранение его антигенного гомеостаза
Слайд 3Синтез антител - одна из форм реагирования ИС в ответ
на внедрение в организм АГ
Слайд 4Антитела – белки, специфически реагирующие с АГ
одна из филогенетически древних
форм имм. защиты
γ-глобулиновая фракция белков сыворотки крови (15-25% от белков
крови)
иммуноглобулины
АТ - γ-глобулины,
способные
специфически
связываться с АГ и
участвовать в им. р-ях
Слайд 5Антитела синтезируются
В-лимфоцитами
плазматическими клетками - их потомками
Слайд 6Антитела существуют в виде
циркулирующей формы (сывороточные и секреторные)
рецепторных молекул на
и/компетентных кл-х
миеломных белков (белок Бенс-Джонса – фрагмент молекулы IgG –
в избытке при миеломной болезни)
Слайд 71885г. П.Эрлих – создал т. гуморального иммунитета
1887г. Эмиль Беринг, С.
Китазато – антитоксическая сыворотка к дифтерийному и столбнячному токсинам
1923г. А.
Безредка – м/д безопасного введения лечебных им/х сывороток
1959г. – расшифровано строение молекул Ig
1953,1983г. – причина разнообразия антител (Ф. Бернет, С. Тонегава)
Слайд 8Теории синтеза антител
1899г. П.Эрлих– т. боковых цепей
1940г. Поллинг –
инструктивная
1955г. Ерне – теория естественной селекции
1964г. Ф. Бернет – селекционно-клональная
теория
Слайд 9Антитела используются для диагностики, профилактики, лечения соматических и инфекционных заболеваний,
выделения и очистки БАВ
Созданы на основе специфических Ig иммунобиологические препараты
(лечебные, диагностические сыворотки, диагностикумы, др.)
Слайд 10Иммуноглобулины являются гликопротеидами и различаются:
по структуре
антительному составу
функциям
Слайд 11Строение Ig:
Две пары полипептидных цепей
(- две тяжелые цепи Н
- две
легкие L ) связаны м/у собой дисульфидными связями
Слайд 12Легкие цепи: каппа, лямбда
Тяжелые - 5 типов: альфа, дельта, эпсилон,
гамма, мю
Они имеют подтипы: α1 и α2, μ1 и μ2,
γ1, γ2, γ3, γ4
Слайд 13Вторичная структура цепей имеет доменное строение (отдельные участки цепи свернуты
в глобулы - домены):
Н – 4-5
L – 2
Домены различают по
постоянству аминокислотного состава:
С-домены – постоянная структура
V-домены – переменная, вариабельная
Слайд 14Ig имеет 3 фрагмента:
Fab – специфически связывается с АГ -
паратоп
Fc рецептор – с С′, некоторыми микробными суперантигенами (белок А
стафилококка)
Слайд 15Тяжелые - 5 типов: альфа, дельта, эпсилон, гамма, мю
В зависимости
от строения Н-цепи (наличия изотипических или групповых детерминант различают 5
классов – изотипов Ig)
Молекулы, содержащие тяжелую цепь α типа,
относят к изотипу А – Ig А, δ (дельта)-цепью - Ig D,
ε (эпсилон)-цепью – IgЕ, γ -цепью - Ig G, μ -цепью –
Ig M
Слайд 17
Синтезируется зрелыми В-лм и плазматическими кл-ми
Определяется в сыв-ке крови на
пике первичного и при вторичном им. ответе
Обеспечивает
иммунитет первые
3-4 мес. жизни
нейтрализацию
опсонизацию
запуск С′-опосредованного цитолиза
АЗКЦТ – антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичностью
Слайд 18антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность
Слайд 19
синтезируются В-лм
образуются в начале первичного им. ответа
не проходит ч/з плаценту
у
новорожденных указывает на ее дефект или перенесенную в/утробную инфекцию
Слайд 20
2,5г/л, мономер двухвалентен
синтезируется В-лм, плазматическими кл-ми
определяется на пике первичного и
при вторичном им. ответе
не проходит ч/з плаценту
не активирует
С′
препятствует адгезии МКО на эпителиальных кл-х
препятствует генерализации инфекции в пределах слизистых
Слайд 21
4-валентен
60% сод-ся в секретах
Обеспечивает гуморальный местный имм-т слизистых оболочек ЖКТ,
мочеполовой системы, респираторного тракта
Слайд 22
S-пептид присоединяется в эпит кл-ке к IgА
Обеспечивает перенос молекулы Ig
ч/з эпителиальную кл-ку в просвет органа
Предохраняет ее в секрете слизистых
от ферментативного расщепления
Слайд 23
в сыв-ке 0,00025 г/л
синтезируется В-лм и плазматическими кл-ми в лимфоидной
ткани бронхолегочного дерева и ЖКТ
обладает цитофильностью (тропностью к тучным кл-м
и базофилам)
участвует в развитии ГНТ
не проходит ч/з плаценту
не связывает С′
Слайд 24
в сыв-ке 0,03 г/л
мономер
не проходит ч/з плаценту
не связывает С′
является рецептором
предшественников В-лм-в
Слайд 25рецепторные Ig (мембранные) – локализованы на ЦПМ В-лм-в
- Выполняют ф-ции
антигенспецифических рецепторов
нормальные Ig – образуются без АГ-ой стимуляции
моноклональные Ig
Слайд 26Каждый В-лм синтезирует АТ с паратопом строго определенной специфичности
В о-зме
на 1 АГ реагирует до 100
различных клонов В-лм-в,
различающихся
антигенной
специфичностью рецепторов, поэтому
в о-зме получают поликлональные
антитела
1975г. Келлер Д., Ц. Мильштейн: получение гибридных кл-к (слияние иммунных В-лм и миеломной –опухолевой- кл-кой)
Слайд 27Антитела
полные: способны образовывать в РА, РП (in vitro) различимый глазом
имм. комплекс
неполные (блокирующие): нет такой способности, что приводит к потере
возможности АГ взаимодействовать с полными АТ
Слайд 28
тепловые АТ: взаимодействуют с АТ при t 370С
холодовые АТ: при
t +4 -100С
Слайд 29
По способности активировать С′
комплементсвязывающие IgM, IgG1, IgG3
комплементнесвязывающие
Слайд 30
По результатам взаимодействия
преципитины
агглютинины
антитоксины
опсонины
лизины
Слайд 31
Абзимы – АТ, выполняющие ф-ции катализаторов биохимических процессов, обладают протеазной
или нуклеазной активностью
Бифункциональные АТ – имеют АГ-связывающие центры разной специфичности,
т.е. направлены к различным эпитопам (АГ-ым детерминантам)
Иммунотоксины – гибрид молекулы Ig и токсина. Они способны доставлять молекулу токсина к кл-ке-мишени, убить ее или нарушить в ней метаболические процессы
- Для иммунодиагностики, профилактики, лечения инфекционных, онкологических, аллергических, др. заболеваний
Слайд 32Свойства АТ
специфичность
аффинность
авидность
антигенность
иммуногенность
Слайд 33Аффинитет - прочность связи структур (сила связи одного эпитопа на
молекуле АГ с одним активным центром АТ)
Авидность – сила связи
всей молекулы АГ (все эпитопы со всеми АГ-связывающими центрами АТ).
Свойство, характеризующее эффективность специфического взаимодействия АТ и АГ
определяется аффинностью
Авидность определяется аффинностью и степенью полимеразности иммуноглобулина: при равном аффинитете авидность IgM выше, чем IgG
Слайд 34Если в исследуемой сыворотке крови при наличии или отсутствии IgM обнаруживаются IgG с
низкой авидностью, это свидетельствует о первичной (недавней) инфекции. Наличие же высокоавидных
антител IgG говорит о вторичном иммунном ответе в случае попадания возбудителя в организм или обострения (реактивации).
Слайд 35 Выявление в испытуемой сыворотке антител с индексом авидности ниже
15-50% (у разных производителей и разных возбудителей этот показатель разный
и указывается в бланке исследования) указывает на свежую первичную инфекцию. Показатель авидности, равный или превышающий 50%, свидетельствует о наличии в сыворотке высокоавидных антител — маркеров перенесенной в прошлом инфекции или персистирующей инфекции. Показатель авидности антител в интервале 31-49% может свидетельствовать о поздней стадии первичной инфекции или недавно перенесенной инфекции только при условии выявления антител в высокой концентрации. Интерпретацию результатов определения индекса авидности необходимо проводить в соответствии с рекомендациями фирмы — производителя, так как величина ИА для одной и той же стадии заболевания может колебаться в широких пределах.
Слайд 36Антигенность АТ
В молекуле различают 4 типа антигенных детерминант:
Видовые
Изотипические
Аллотипические
идиотипические
Слайд 37
Видовые - характерны для Ig всех особей вида (определяются строением
Н- и L-цепей)
Слайд 38Изотипические – групповые (они локализуются в Н-цепи). Служат для дифференцировки
Ig на 5 изотипов (классов) и подклассы
Слайд 39Аллотипические – индивидуальные (в L- и Н- цепях) – внутри
вида различия
Аллотипы – иммуноглобулины одного и того же класса, отличающиеся
по антигенной специфичности постоянных участков полипептидных цепей у разных особей одного и того же вида
Слайд 40Идиотипические – отражают особенности строения Fab (АГ-связывающего центра) самой молекулы
Ig
Идиотип антитела – детерминанта в Fab фрагменте – отражение
специфичности АТ по АГ
Идиотип – антигенная характеристика вариабельной, антигенсвязывающей области иммуноглобулина, определяемая последовательностью различных аминокислот активного центра и их стереохимичесим расположением
Слайд 41
Латентная фаза
Логарифмическая
Стационарная
Снижения
Переключение биосинтеза IgM и IgD на IgG, IgA
или IgE
Слайд 42
При повторном контакте с АГ:
1 фаза – укороченная
2ф – более
высокие титры
3ф – затяжная динамика
Сразу синтезируется IgG
Слайд 45Схема клеточного иммунного ответа
Тот же процесс происходит в лимфатических узлах,
сосудах крови, в селезенке, печени и других органах
Из крови АГ
элиминирует быстрее (от нескольких часов до нескольких суток), чем из органов (недели и даже месяцы)
Слайд 47Схема гуморального иммунного ответа
Пептидные фрагменты
взаимодействуют с Ia-
молекулой (МНС-
молекулярным
продуктом генов
главного комплекса
гистосовместимости)
Этот комплекс с
помощью экзоцитоза
транспортируется на
поверхность клетки,
где презентируется Т
кл-ми и распознается ими
Слайд 48Схема противобактериального иммунитета
Слайд 50 Способы взаимодействия иммунных клеток
дистанционный
контактный
рецепторы
лиганды
цитокины
Слайд 51Формирование вторичного иммунного ответа (CD4+ Т-клетки)
апоптоз
Слайд 52Алгоритм противовирусного
иммунного ответа
Слайд 53Еестественные киллеры и ВИЧ-инфекция
Слайд 54Формирование первичного иммунного ответа (CD4+ Т-клетки)