Доклад Факторы влияющие на клональное микроразмножение

студент 3 курса факультета биологии и экологии Жук Михаил Иванович           Гродно, 2018

физиологические особенности вводимого в культуру растения, химические и физические условия

культивирования.
Наиболее важным моментом является выбор материнского растения и экспланта.

видовые особенности. Исходные растения должны быть здоровы, не поражены грибными,

бактериальными и вирусными болезнями. Кроме того, они должны находится в состоянии интенсивного роста (выход из фазы покоя и переход к активному росту). Луковицы, корневища и клубни в состоянии покоя непригодны, перед введением в культуру их предварительно обрабатывают высокими или низкими температурами. Способность к размножению также детерминирована генетически. Например, земляника размножается всеми способами, облепиха – ни одним, хотя в природе черенкуется. Двудольные обладают большей регенерационной способностью, чем однодольные и древесные.

Для обеспечения максимальной стабильности клонируемого материала, во избежание появления аномальных

растений в качестве экспланта желательно использовать молодые, слабодифференцированные ткани. Кроме того, экспланты от ювенильных растений лучше укореняются, чем от зрелых, особенно это касается древесных пород. Лучше всего использовать кончики стеблей, пазушные почки, зародыши, молодые листья, черенки, соцветия, чешую луковиц, то есть экспланты, содержащие меристемы.

меняется в течение пассажей, при длительном культивировании частота укореняемости побегов

возрастает. Возможно, что при этом эксплант приобретает признаки ювенильности, что ведет к повышению его морфогенетического потенциала.
Успех введения в культуру часто определяется эффективностью стерилизации. Выбор стерилизующего агента определяется особенностями экспланта.

и жидкие питательные среды. Иногда жидкие среды имеют преимущество, так

как обеспечивают большую подвижность трофических элементов.
На эффективность размножения могут также влиять расположение экспланта (горизонтальное или вертикальное), тип пробок (ватные, пластмассовые, стеклянные, металлические и т.д.), а также соотношение объема эксплантов и количества питательной среды для оптимального освещения и газообмена эксплантов.

клональное микроразмножение влияют гормоны, минеральные соли, витамины и углеводы. При

микроразмножении in vitro часто используют среды Мурасиге и Скуга, Линсмайера и Скуга, Шенка и Хильдебрандта, Нича, Гамборга, Хеллера и другие. Обычно используют среду Мурасиге–Скуга, которая содержит много неорганического азота, что стимулирует процессы органогенеза и соматического эмбриогенеза.

первых двух этапах освещенность колеблется от 1000 до 3000 Лк,

фотопериод 14 – 16 часов, но эти параметры зависят от культуры.
Важное значение играет также сочетание спектрального состава света и гормональных факторов среды.

и 18 – 22оС ночью. В некоторых случаях понижение температуры

ведет к повышению эффективности размножения. Для повышения коэффициента размножения необходимо каждому виду с учетом его естественного ареала произрастания подбирать индивидуальные условия культивирования. Относительная влажность воздуха – 65 – 70%

микроразмножении. Обычно используют стан­дартные среды: Мурасиге-Скуга, Нича и др., но

с добавлением на каждом этапе различных веществ.
На первом этапе в питатель­ную среду часто вносят антиоксиданты, чтобы предотвратить ги­бель клеток из-за активизации гидролитических ферментов.
На втором этапе для усиления морфогенеза обычно добавляют цитокинины.

земляники, вишни, чер­ной смородины лучше происходит в жидкой питательной среде,

чем в агаризованной.

Размер экспланта прямо пропорционально связан с регенерационной способностью: чем крупнее

эксплант, тем выше эта способность.