Лабораторная диагностика дифтерии

Corynebacteriaceae
РОД Corynebacterium

ВИДЫ

ВОЗБУДИТЕЛЬ ДИФТЕРИИ
C. diphtheriae

БИОВАРЫ:

gravis

mitis

intermedius

ПОТЕНЦИАЬНО ТОКСИГЕННЫЕ
C.ulcerans
C.pseudotuberculosis

агар
Теллурит калия
Дефибринированная или гемолизированная кровь
СРЕДЫ ДЛЯ ПЕРВИЧНОГО ПОСЕВА

определения токсина в РНГА – моноклональные антитела, связанные с эритроцитами.
Штаммы

Через 2,5 - 3,5 часа производят учет результатов реакции. Допускается - через 18 - 24 часа.

токсин

уксусно - кислый свинец.

Цистиназа расщепляет цистин, выделяется

составе питательной среды: мочевина и фенолрот (крезолрот).
Уреаза расщепляет мочевину с

глюкозой, растворимым крахмалом.
Учет через 24 (48 часов) инкубации при 37°

должны быть доставлены в лабораторию

день








Пробы на:
токсигенность, цистиназу


48 часов /3 день
48 часов


Повторные параллельные
исследования
колоний, пробы

Посев на:
сахарозу
глюкозу
крахмал
мочевину

72 часа
4 день

Учет свойств
Определение биохимического варианта

96 часов
5 день

72 часа
4 день

исследования
биохимических свойств

чашку с КТА, 1/2 поверхности - из ротоглотки, 1/2

2 день

Рост колоний на чашках с КТА (24 часа)

Изучение колоний, бактериоскопия, пробы на:
- токсигенность,
цистиназу
посев на скошенный сывороточный агар.

При множественном росте для выдачи предварительного ответа смешивают до 5 однотипных колоний и ставят дополнительные пробы на:
- цистиназу,
- уреазу (по Заксе)
- посев в жидкую среду и выявление дифтерийного токсина в РНГА.
Чашки оставляют до 48 часов.

результатах выдают документированный ответ о выделении

2) Изучение роста чистой культуры на скошенном сывороточном агаре
Посев на среды с сахарозой, глюкозой, крахмалом, мочевиной.

3) Учет результатов проб при первичном множественном росте
При положительных РНГА, пробе Пизу , отрицательной уреазной пробе,
выдают предварительный ответ о выделении возбудителя дифтерии.

4)Повторно для чашек через 48 часов: изучение колоний, бактериоскопия
постановка проб на токсигенность, цистиназу и отсев колоний на скошенный сывороточный агар

5) При отсуствии роста дифтерийных бактерий - выдача отрицательного бактериологического ответа.

(от 48 часовых колоний), выдача документированного ответа о выделении

2. Характеристика роста чистой культуры (от 48 часовых колоний)
Посев на среды с сахарозой, глюкозой крахмалом, мочевиной.

3. Учет биохимических свойств (от культуры 24 часовых колоний)

4. Выдача бактериологического ответа о выделении нетоксигенных
коринебактерий дифтерии с указанием биохимического варианта и дополнительного ответа о биохимических свойствах токсигенных коринебактерий дифтерии, выделенных ранее.

5 день

Учет биохимических свойств (от культуры 48 часовых колоний)
Выдача бактериологического ответа о выделении (через 48 часов инкубации первичного посева) токсигенных или нетоксигенных коринебактерий дифтерии с указанием биохимического варианта.

для накопления токсина, а затем фильтруют через бактериальные фильтры для

дифтерийный анатоксин

(дифтерия, столбняк)
БУБО-Кок (дифтерия, столбняк, коклюш, гепатит В)