Слайд 2СВЕТОВАЯ МИКРОСКОПИЯ
Устройство светового микроскопа (освещение снизу)
Слайд 3СВЕТОВАЯ МИКРОСКОПИЯ
Инфракрасный и темнопольный микроскопы
Слайд 4Тельца-включения при вирусных инфекциях, световая микроскопия
Слайд 5. МИКРОСКОПИЯ МАЗКОВ В
СВЕТОВОМ МИКРОСКОПЕ
При многих вирусных болезнях в
цитоплазме или ядре пораженных вирусом клеток формируются тельца-включения, которые по
форме и величине могут значительно варьировать.
В одной клетке может быть от одного до 5-6 телец.
Размеры телец-включений зависят от вида вирусов и стадии течения болезни
Слайд 6 При этом ДНК- содержащие вирусы образуют тельца-включения, как правило,
в ядре клетки (кроме вируса оспы).
А РНК- содержащие вирусы -
в цитоплазме.
Слайд 7Обнаружение телец-включений с помощью светового микроскопа, например, при бешенстве служит
основанием для постановки диагноза.
Такие тельца хорошо изучены при оспе,
бешенстве, чуме и гепатите плотоядных, ларинготрахеите и др.
Слайд 8Для микроскопии в обычном микроскопе из патологического материала готовят мазки
или мазки-отпечатки, либо делают гистосрезы из органов.
Их фиксируют на пламени
или химическим методом в метиловом спирте, смеси спирта этилового с эфиром поровну, химически чистым ацетоном.
Слайд 9При подозрении на бешенство мазки фиксируют химическим методом 1-2 часа,
а ацетоном не менее 10 часов в морозилке холодильника.
Фиксированные мазки
и отпечатки для выявления телец-включений окрашивают по соответствующим методикам:
Слайд 10Окраска по Муромцеву
Фикисированные мазки поомыва-ют дистиллированной водой и на 5-10
минут
погружают в раствор синьки Мансона (2,0 синьки и 5,0
буры растворяют в 100 мл кипящей дистиллированной воды), разведенной водой 1:40.
После этого краску сливают и тут же мазки, не промывая водой, погружают в 10% водный раствор таннина на 8-10 минут до появления голубоватой окраски.
Слайд 11Промывают водой, высушивают фильтрованной бумагой,
Затем проводят через смесь из равных частей спирта
с ацетоном или спирта с ксилолом и снова высушивают фильтровальной бумагой.
Микрокартина : Мазок будет иметь светло-голубой фон.
Ядра нервных клеток - синий цвет,
Цитоплазма клеток - бледно-голубая,
Тельца Бабеша-Негри - в бледно-фиолетовые
Слайд 12Окраска по Михину.
Фиксированные химическим способом мазки окрашивают 30-40 минут краской
Гимза, раз- веденной 1:10 (1-2 капли краски на 1 мл
дистиллированной воды).
Затем быстро промывают подкисленным спиртом (1 капля ледяной уксусной кислоты на 30 мл 96° спирта), а затем водой и просушивают
Микрокартина: фон мазка - красный,
нервные клетки синеватые
ядра клеток черные,
тельца Бабеша-Негри- фиоетовые
Слайд 13БЕШЕНСТВО
Окраска по Манну. Тельца Бабеша-Негри в нейроцитах аммонова рога –
оксифильные (окрашиваются в рубиново-красный цвет), локализуются в цитоплазме. Встречаются только
при бешенстве!
Слайд 14Тельца Боллингера в цитоплазме эпителиальных клеток слизистой оболочки гортани (отмечены
стрелками)
ОСПА ПТИЦ
Слайд 15Тельца-включения Барреля при оспе овец
Слайд 17При диагностике некоторых вирусных болезней , а также для изучения
морфологии вирусов в настоящее время широко применяют электронную микроскопию.
С целью
выявления вируса в исследуемом материале препараты для электронной микроскопии готовят методом негативного контрастирования.
Слайд 18Для этого медные электронно-микроскопические сеточки – подложки помещают на несколько
секунд в каплю вируссодержащей суспензии.
Затем промывают 2-3 каплями дистиллированной
воды и подвергают негативному контрастированию в электронном микроскопе.
сеточка -подложка
Слайд 19Принцип действия электронного микроскопа
Электронный микроскоп представляет из себя вертикальную колонну.
Для проведения микроскопии в ней создают вакуум.
В верхней части колонны
имеется вольфрамовая нить на нее подают напряжение, после чего образуется пучок электронов.
Слайд 20Линза конденсора, представляющая из себя электромагнит фокусирует пучок электронов на
препарате сеточке –подложке с исследуемым вирусом.
Затем линзы объектива и линзы
проектора ( тоже электромагниты) обеспечивают увеличение объекта и передают изображение клетки на экран.
Слайд 22Сравнение светового и электронного микроскопа
Слайд 23Электронная фотография вируса чумы плотоядных
