ПЕРВИЧНАЯ СТРУКТУРА БЕЛКА

(АМИНОКИСЛОТНЫЙ АНАЛИЗ)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ N- И С-КОНЦЕВЫХ АМИНОКИСЛОТНЫХ ОСТАТКОВ

ХИМИЧЕСКОЕ ИЛИ ФЕРМЕНТАТИВНОЕ РАСЩЕПЛЕНИЕ

ПОЛИПЕПТИДНОЙ ЦЕПИ

ВЫДЕЛЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ ФРАГМЕНТОВ БЕЛКА И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИХ АМИНОКИСЛОТНОЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ (СЕКВЕНИРОВАНИЕ)

течение 24-96 часов

Ile, Val)

АМИНОПЕПТИДАЗА М (ГИДРОЛИЗУЕТ ВСЕ СВЯЗИ, КРОМЕ Pro-X и X-Pro)

ДИПЕПТИДИЛАМИНОПЕПТИДАЗА

I ИЛИ КАТЕПСИН С (ОТЩЕПЛЯЕТ N-КОНЦЕВОЙ ДИПЕПТИД)

1200C, 10 час

MATSUO, 1965 г.)

ТИОГИДАНТОИНОВ

ГРОСС, Бернард ВИТКОП, 1962 г.)

г.)

кислота

pH 7,0-9,0
Lys—X

Arg—X
Lys—Pro Arg—Pro
Протеаза из St. aureus
рН 4,0 рН 7,8
Glu—X Asp—Leu
Y—Pro
3. Лизин-специфическая протеаза
pH 8,0 X—Lys
4. Клострипаин
pH 7,7 Arg—X Lys—X
5. Тромбин рН 8,0
Arg—X
X=Gly, Ala, Val, Arg, Asp, His, Cys
6. Протеаза из подчелюстной железы мышей рН 7,5-8,0
Arg—X Arg—Val Arg—Arg
Протеаза из почек ягненка
pH 7,5-8,0 Pro—X Pro—Pro

НИЗКАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ
1. Химотрипсин pH 7,8-9,0
Tyr—X Phe—X Trp—X
Leu—X Met—X His—X с меньшей скоростью;
X—Pro
Термолизин рН 7,0-9,0
X—Ile X—Leu X—Val
X—Phe X—Tyr X—Trp
X—Ala X—Met
X—Y—Pro
Пепсин pH 2,0
связи ароматических и объемных алифатических аминокислот, Glu
Папаин pH 5,0-7,5
широкая специфичность
5. Эластаза рН 7,0-9,0
Ser—X Gly—X
Ala—X Val—X Leu—X

СКОРОСТЬЮ

histolyticum
pH 7,7
pH 7,7
ЭНДОПРОТЕИНАЗА Arg-C ИЗ
подчелюстной железы мыши
pH 7,5 –

8,0

= Gly, Ala, Arg, Asp, Cys, Val, His
ПРОЛИН-СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОТЕАЗА
из

почек ягненка

pH 7,5 - 8,0

. . . —Pro—X—. . .