Полуколичественный метод определения ДНК онкогенных типов ВПЧ- Digene - тест,

Подготовила студентка 4 курса
2 лечебного факультета 13

гр
Носенко Татьяна Андреевна

слизистых оболочек и обладают онкогенным потенциалом. ВПЧ передаётся при тесном

контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду.

всего в переходной зоне шейки матки). К папиллома-вирусам высокого онкогенного

риска относятся ВПЧ типов (16, 18),31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68.

специфических фрагментов ДНК вируса папилломы человека (метод "гибридного захвата").

18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58,

59, 68) и низкого онкориска (6, 11, 42, 43, 44).  Для исследования используют материалы, взятые при соскобе для ПАП-мазка: с уретры, шейки матки, влагалища, цервикального канала. Суть состоит в выявлении фрагментов ДНК, которые сравнивают между двумя видами генотипов — высокой и низкой онкогенности. Это очень высокочувствительный и точный тест .

уровень инфекции, приводящий к развитию неоплазии шейки матки, в то

же время как ПЦР-исследование определяет только наличие вируса вне зависимости от его клинического проявления. При этом его все равно полезно дополнять Дайджест-тест другими скрининговыми исследованиями: цитологией, кольпоскопией, ПЦР-диагностикой, ПАП-тестированием.

13 обладают высокой онкогенностью и 5 — низкой.
Имеет высокую точность.
Анализ

безболезненный и нетравматичный — обычный мазок.
Проводится относительно быстро (3-14 дней).
Показывает точную концентрацию вируса в организме.
Полученные образцы можно использовать для цитологического исследования.
Анализ характеризуется простотой и объективностью.

в организме пациента, либо находится в такой незначительной концентрации, что

не способна привести к развитию онкологии;
0,1-3 Lg – невысокая концентрация вируса, риск возникновения онкологии низкий;
3-5 Lg – средняя концентрация вируса, неблагоприятные факторы могут спровоцировать появление онкологических заболеваний;
5 Lg – высокая концентрация вируса, без вмешательства специалиста онкологические процессы быстро развиваются.  
Отрицательный результат первого исследования не дает гарантии отсутствия папилломавируса.

шейки матки. Основная задача цитологического скрининга заключается в поиске измененных эпителиальных

клеток (атипичных, имеющих отличное от нормальных эпителиальных клеток строение).

биологического материала, ключевым отличием которых для пациентов является их эффективность.

ПАП-тест и жидкостная цитология. Забор материала осуществляется однотипно (стандартизированный забор): комбинированной щеткой или двумя цитологическими щеточками (рисунок 1), так как эпителий должен быть взят как с наружной вагинальной поверхности шейки матки (эктоцервикса), так и с внутренней – из цервикального канала (эндоцервикса). Необходимость забора клеточного материала из цервикального канала обусловлена тем, что зона стыка эпителиев (цилиндрического и многослойного плоского неороговевающего –места, где чаще всего начинаются «нехорошие» процессы (90-96%случаев)) с возрастом смещается ближе к центру и внутрь цервикального канала.

2 цитологические щетки)

(ПАП-теста) полученный материал распределяют на предварительно обезжиренном предметном стекле равномерным

тонким слоем.
2.Чувствительность ПАП-теста (вероятность достоверного обнаружения «нездоровых» клеток) составляет 55-74%, а специфичность (гарантия того, что «нездоровые» клетки будут установлены при их присутствии в мазке) – 63,2 – 99,4.
3.При проведении жидкостной онкоцитологии забор материала всегда выполняется комбинированной цитологической щеточкой.
4.Информативность жидкостной цитологии выше, что обеспечивается автоматической системой приготовления и окрашивания микропрепаратов, позволяющей расположить эпителиальные клетки в один слой, отделив их от других клеточных элементов.
5.Количество неадекватных мазков при использовании жидкостной методики в 10 раз ниже, чем при использовании традиционной и не превышает 1%.
6.Оставшийся в результате проведения жидкостной онкоцитологии биологический материал может впоследствии быть использован для дополнительных исследований

или рака результат - это норма, совершенно исключающая возможность наличия атипических

(измененных, с признаками возможного озлокачествления) клеток.
ASC-US (atypical squamous cells of undetermined significance, клетки плоского эпителия с атипией неясного значения) – это наиболее частый из вариантов отклонений, встречающихся в цитологических заключениях. Суть заключается в том, что обнаружены клетки, отличающиеся по своему строению от нормальных, но утверждать, что отличия обусловлены именно дисплазией, а не другими причинами – реактивными состояниями (воспалительный процесс, гипоэстрогения), невозможно
ASC-Н (atypical squamous cells, cannot exclude HSIL, клетки плоского эпителия с атипией неясного значения не исключающие HSIL) – здесь также обнаружены измененные клетки, но вероятная причина их появления – дисплазия.

в исследуемом материале обнаружены атипичные клетки, соответствующие диспластическим изменениям легкой

степени.
HSIL (high grade squamous intraepitelial lesion, плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени) – в мазке обнаружены атипичные клетки, соответствующие диспластическим изменениям тяжелой степени.
CIS (carcinoma in situ, карцинома «in situ» - внутриэпителиальный рак) – в препарате определяются злокачественно измененные клетки плоского эпителия. Данная аббревиатура предполагает, что патологический процесс не выходит за пределы эпителия, базальная мембрана не повреждена, подлежащая строма не вовлечена, что и отличает карциному «in situ» от инвазивного (проникающего в подлежащие ткани) рака.

с признаками атипии, установить глубину проникновения патологического процесса в ткани позволяет

только гистологическое исследование.

обнаружении этих изменений эпителия предложены следующие варианты дальнейшего ведения пациентки

и постановки диагноза.
Обязательно кольпоскопия с прицельной биопсией подозрительных участков, если таковые найдутся. Дальнейшее ведение определяется для каждой пациентки в индивидуальном порядке.
Пап-тест через 4-6 месяцев:
если снова обнаружена ASC-US – проводится кольпоскопия, дополненная биопсией;
при получении 2 отрицательных мазков последовательно – возврат к обычному скринингу 1 раз в год.
ВПЧ-тест с выявлением высокоонкогенных типов вируса папилломы человека:
положительный регламентирует кольпоскопию с иссечением подозрительных тканей;
отрицательный – обследование через 1 год.
Если ASC-US выявлены у женщины во время беременности, алгоритм наблюдения аналогичен вышеизложенному. При обнаружении ASC-US в период постменопаузы и сопутствующих атрофических процессах назначается терапия эстрогенсодержащими препаратами (местно с использованием свечей, кремов), а затем обследование с использованием цитологических методов (если нет противопоказаний).

первом этапе скрининга

цитологичского исследования (ASCUS)

с последующим цитологическим исследованием