Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях спектра

2.1. Подлинность
2.2. Количественное определение
3.

Конструкция спектрофотометра
4. Определение подлинности парацетамола спектрофотометрическим методом

веществом и служат для исследования строения, доказательства подлинности и количественного

определения светопоглощающих соединений.

методы анализа, основанные на поглощении электромагнитного излучения и испускании света:

Спектрофотометрия в ультрафиолетовой (УФ) и видимой областях
Спектрофотометрия в инфракрасной (ИК) области
Атомно-эмиссионная и атомно-абсорбционная спектроскопия (АЭС и ААС)
Флуориметрия
Спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР).

охватывает спектральную область от коротких длин волн в УФ-области до

ИК-области.
Для удобства отнесений этот спектральный ряд делится на следующие диапазоны длин волн:
УФ (от 190 до 380 нм);
видимый (от 380 до 780 нм);
ИК (от 0,78 до 400 мкм).

в ультрафиолетовой и видимой областях чаще всего проводят для растворов,

хотя такие измерения могут быть проведены и для веществ, находящихся в парообразном, жидком и твердом состоянии.

при спектрофотометрических определениях обычно растворяют в соответствующем растворителе.
Для этих

областей пригодны многие растворители, в том числе вода, спирты, хлороформ, низшие углеводороды, эфиры, разведенные растворы аммиака, едкого натра, хлористоводородной или серной кислоты.
Следует использовать растворители, не содержащие примесей, поглощающих в данной спектральной области. Для спектрофотометрии выпускаются специальные растворители, гарантирующие отсутствие примесей.

поглощать монохроматический свет в ультрафиолетовой области спектра.

определения подлинности лекарственных средств путем:
сравнения спектров поглощения испытуемого раствора

и раствора стандартного образца; в указанной области спектра должно наблюдаться совпадение положений максимумов, минимумов, плеч и точек перегиба;
указания положений максимумов, минимумов, плеч и точек перегиба; расхождение между наблюдаемыми и указанными длинами волн в максимумах и минимумах поглощения не должно обычно превышать ± 2 нм.
Возможны и другие варианты применения, оговоренные в частных фармакопейных статьях.

концентрации:
1. Расчет с использованием градуировочного графика
Градуировочный график представляет собой графическую

зависимость между значениями плотности и концентрации, в общем случае это прямая, выходящая из начала координат.
Строится график с использованием серии (от 5 до 10) растворов стандартного образца с постоянно возрастающей, точно известной концентрацей (концентрация может быть выражена в г/мл или в %).

образец, рабочий стандартный образец или стандартный образец веществ-свидетелей)
Метод заключается в

параллельном измерении в одинаковых условиях оптической плотности раствора стандартного образца, точно известной концентрации и раствора, содержащего исследуемое вещество.
В общем случае, формула расчета представлена следующим образом:


С и С0 – концентрации испытуемого раствора и раствора стандартного образца соответственно;
А и А0 – оптические плотности испытуемого раствора и раствора стандартного образца соответственно.

закона Бугера-Ламберта-Бера в форме:

или

С(%) и С – концентрация вещества соответственно в процентах и моль/л;
А – оптическая плотность испытуемого раствора;
А1%1см – удельный показатель поглощения вещества;
ɛ - молярный показатель поглощения вещества;
b – толщина поглощающего слоя, в см.

состоят из оптической системы, выделяющей монохроматическое излучение в области от

190 до 780 нм и обеспечивающей его прохождение через образец, и устройства для измерения оптической плотности.
Основными частями этих приборов являются:
источник излучения;
диспергирующий прибор (призма или решетка);
щель для выделения полосы длин волн;
кюветы для образцов;
детектор излучаемой энергии;
встроенные усилители и измерительные приборы.

не более ±0,005 см.
Кюветы, предназначенные для испытуемого раствора и

раствора сравнения, должны иметь одинаковое пропускание (или оптическую плотность) при заполнении одним и тем же растворителем.

в 100 мл спирта 96%. К 1 мл полученного раствора

прибавляют 1 мл 0,1М раствора хлористоводородной кислоты и разбавляют спиртом 96 % до 100 мл.
Ультрафиолетовый спектр поглощения полученного раствора в области от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 249 нм.

100 мл

сравнения (спирт 96 %)
положение 1 – исследуемый раствор

249 нм
249 нм

до 350 нм имеет максимум при 249 нм.
Заключение: субстанция парацетамола

соответствует требованиям ФС 42-0268-07 по показателю «Подлинность».

доп. – М., МЕДпрессинформ", 2008. – 613 с.
Государственная фармакопея Российской

Федерации [Текст]. – 12-е изд. – М.: Науч. центр экспертизы средств мед. применения, 2007. – Ч. 1. – 696 с.
Практическое руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии для студентов III курса / Т.И. Ярыгина, О.Л. Визгунова, В.А. Дубовик и др. / под ред. Л.М. Коркодиновой – Пермь, 2011. – 102 с.
Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии: учеб. пособие / Э.Н. Аксенова, О.П. Андрианова, А.П. Арзамасцев и др. / под. ред. А.П. Арзамасцева. – 3-е изд., перераб. и доп. – М., Медицина, 2001. – 384 с. : ил.1.

ПГФА
Саттарова Ольга Евгеньевна, доцент кафедры фармацевтической химии факультета очного обучения

ГБОУ ВПО ПГФА, кандидат фармацевтических наук, директор Центра дистанционных образовательных технологий
Люст Елена Николаевна, кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры токсикологической химии
Консультант:
Ярыгина Татьяна Ивановна, профессор кафедры фармацевтической химии факультета очного обучения ГБОУ ВПО ПГФА, доктор фармацевтических наук