Спирохетозы

вирусологии



МИКРОБИОЛОГИЯ СПИРОХЕТОЗОВ –СИФИЛИС, БОРРЕЛИОЗЫ (ВОЗВРАТНЫЙ ТИФ), ЛЕПТОСПИРОЗЫ

д.м.н., проф. Шаркова В. А.

подвижные, спиралевидные бактерии длиной 3-500 мкм
В мазках располагаются одиночно либо

образуют цепочки, объединённые внешней оболочкой

фибриллами, отходящими от субтерминальных прикрепительных дисков, расположенных на обоих концах

цилиндра (что сближает их с простейшими)

Treponema, Borrelia и Leptospira

Spirochaetaceae
Treponema pallidum 
подвиды: pallidum

- pertenue – возбудитель фрамбезиии (тропическая гранулема, невенерич. сифилис)
- endemicum - эндемический сифилис (беджель, невенерич. сифилис детского возраста )

Treponema carateum -возбудитель пинты (Латин Америка)

Treponema vincentii (условно-патогенные микробы, обитающие в складках слизистой полости рта и десневых карманах. При ослаблении организма может вызвать в симбиозе с Fusobacterium nucleatum и Prevotella melaninogenica язвенно-некротическую ангину Симановского-Венсана-Плаута)

течением, вызываемое Treponema pallidum, характеризующееся поражением кожи, внутренних органов, костей,

нервной системы
 Впервые европейские врачи столкнулись с сифилисом после открытия испанцами Нового Света.
Особое распространение сифилис получил в середине XV века, когда французские войска, включающие большое число испанских наёмников, вторглись в Италию. Поэтому заболевание называли «французской» или «итальянской болезнью».
Передача сифилиса половым путём была установлена достаточно быстро, а А. Паре назвал сифилис lues Vепеrае («любовная чума»).
В последующем заболеваемость сифилисом достигла эпидемического порога в самых различных слоях общества (Н. Паганини, Г. де Мопассан, Б.Г. Белинский и др).

в правильные или неправильные спирали подвижные бактерии длиной 5-20 мкм

Основной способ размножения  — поперечное деление 

грамотрицательны, но плохо воспринимают анилиновые красители, окрашиваются по Романовскому – Гимзе в слабо – розовый цвет, непатогенные — в фиолетовый или синий
негативное контрастирование по Бурри
 метод серебрения по Морозову

формы, длинной от 4 – 14 мкм, с равномерными мелкими

завитками
циста
L – форма

глюкозу, галактозу, сахарозу, мальтозу и маннит с образованием кислоты;
образуют

индол и сероводород
разжижают желатину
каталаза-, уреаза- и оксидаза-отрицательны
реакция Фогеса-Проскауэра отрицательная
не восстанавливают нитраты
Единичные штаммы сифилиса лизируют эритроциты человека

почечную или мозговую ткань): ср. В.М. Аристовского, P.P. Гельцера

При длительном

культивировании бактерии сифилиса адаптируются к более простым средам (например, Китта-Тароцци) и теряют патогенные свойства
Колонии сифилиса мелкие, появляются на 3-5-е сутки культивирования
крайние границы роста 34 – 400 С (35)

Treponema рallidum на культуре
клеток эпителиоцитов кролика СЭМ

изученной, но они проявляют иммуногенные свойства. Специфические AT иммобилизуют бактерии сифилиса и

обусловливают антителозависимую цитотоксичность
липоидный антиген - идентичен липоидному экстракту бычьего сердца
неспецифические продукты реагинового типа (вассермановские AT)

С в течение 15 мин.
на холоде сохраняется до 50

сут
прогревании при температуре 40°С в течение часа приводит к утрате патогенных свойств
чувствительна к высыханию, свету, солям ртути, висмуту, мышьяку, пенициллину

предметы домашнего обихода: стаканы, зубные щётки, сигареты, поцелуи, через молоко

кормящей матери - бытовой сифилис)
гемотрансфузионно (переливание крови от доноров, больных сифилисом)
трансплацентарно или при прохождении по родовым путям Возбудитель сифилиса не способен проникать через плаценту в первые 4 мес беременности. Лечение матери на этих сроках препятствует инфицированию плода

Наибольшую опасность представляют лица на ранних этапах болезни; в III и IV стадиях они практически теряют инфекционность (в среднем через 4 года после заражения)

путей, рта, прямой кишки) или кожных покровов
мигрирует в лимфатические узлы,

в кровоток
генерализованно диссеминирует
Изначально резистентность организма к возбудителю сифилиса низкая (в это время он быстро диссеминирует по тканям), затем она возрастает и ограничивает дальнейшее распространение, но не обеспечивает полную элиминацию микроба

с переходом в третичный сифилис. У лиц с высокой резистентностью развиваются

гранулематозные (туберкулоидные) поражения в различных тканях. У больных с низкой резистентностью иногда наблюдают поражения ЦНС

Виды сифилиса: Приобретенный Врожденный

всегда
Длительность инкубационного периода - от 10-11 до 90 сут
(в

среднем 21-24 дня)

язва с уплотнёнными краями

3 мес., обычно 21 -24 дня)
Через 7-10 сут развивается полиаденит,

соответствующий фазе генерализованной спирохетемии

В первые 3 нед серологические реакции на сифилис отрицательны (первичный серонегативный сифилис), с 4-й недели - положительны (первичный сероположительный сифилис)

4147 lores

сифилис) — фаза генерализованной спирохетемии с поражением внутренних органов и

нервной системы

Характерный симптом — розовато-красные папулёзно-розеолёзные и пустулёзные высыпания (сифилиды) на коже. Размеры сифилидов - от чечевичного зерна (розеолы) до монеты (папулы). Под действием иммунной системы большинство спирохет погибает, что обусловливает периодическое исчезновение высыпаний (латентный период)
Часть трепонем сохраняется в лимфатических узлах и внутренних органах. При снижении активности защитных реакций высыпания сифилиса появляются вновь — вторичный рецидивирующий сифилис

2 -3 года, иногда несколько лет.

покровах, костях, нервной системе формируются гранулёмы (гуммы): папулы, бугорки, гуммы

или гуммозные инфильтраты, склонные к распаду. Период продолжается несколько лет

Гранулёмы сифилиса склонны к распаду и рубцеванию, что может вызывать серьёзные нарушения функций внутренних органов (висцеральный сифилис). Гуммы содержат незначительное количество трепонем (контагиозны, особенно при локализации гранулём в полости рта или на половых органах)

При проведении неадекватного лечения у части больных (ч/з 8-15 лет) может развиться нейросифилис— тяжёлое поражение ЦНС (сифилис мозга, спинная сухотка или прогрессирующий паралич)

во второй половине беременности, мертворождение, клинические проявления сифилиса)
ранний врождённый

сифилис: сифилис плода, сифилис грудного возраста и сифилис раннего детского возраста (папулёзно-розеолёзные высыпания, сифилитическая пузырчатка, остеохондриты, поражения внутренних органов (печень, селезёнка) и нервной системы (менингиты, менингоэнцефалиты) (скрытый врожденный сифилис определяют по положительным серологическим реакциям в крови и спинномозговой жидкости)

триада Хатчинсона — паренхиматозный кератит, «бочкообразные зубы» и глухота (вследствие поражения

лабиринта); изменения большеберцовых костей («саблевидные голени»), гуммы внутренних органов и кожи

не исчезают – снижает качество жизни больного и приводит к

инвалидности

иммунитет не сохраняется, возможны повторные заболевания

Перенесение болезни сопровождается выработкой двух

видов антител:
неспецифических
специфических

розеол, кровь, СМЖ
Основа диагностики сифилиса — методы, направленные на обнаружение возбудителя в

материале микроскопией и выявление AT серологическими реакциями.
Выделение возбудителя сифилиса обычно не проводят

(скрининговые) и подтверждающие (диагностические)

в коже у человекообразных обезьян

в темном поле
Окр.по Романовскому – Гимзе, по Бурри, серебрением, РИФ

(РПГА)

-Реакции иммунофлуоресценции (РНИФ)

-Реакции иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

-Иммуноферментный

анализ
- Р. Вассермана можно заменить ИФА

Серологические реакции

3-6; водорастворимые соли пенициллина (поддержание постоянного высокого уровня пенициллина в

сыворотке крови на протяжении не менее 10 циклов деления и развития бледной трепонемы (деление происходит каждые 30—33 ч, рост продолжается около 30 мин)

- санитарно – гигиенические мероприятия общественного характера: учет больных

сифилисом, госпитализация всех больных заразными формами, выявление источника заражения и его санация

тропических регионах  
Т. pallidum подвид pertenue
выделена А. Кастеллани (1905)
По морфологическим, тинкториальным

и культуральным свойствам возбудитель фрамбезии сходен с бледной спирохетой
Основной путь передачи — контактный (ч/з повреждённые кожные покровы), редко половой
Клинические проявления фрамбезии имеют много общего с сифилисом

крупная папулёзная или пустулёзная бляшка-фрамбезиома
Во II стадии фрамбезии (ч/з 1-3 мес) появляются

полиморфные высыпания-фрамбезиды, впоследствии трансформирующиеся в гуммоподобные узлы размером до I см, подвергающиеся распаду
Третичная стадия фрамбезии проявляется язвенно-гуммозными поражениями костей и тяжёлыми деструктивными нарушениями, симулирующими третичный сифилис

заболевания развивается стойкий иммунитет к повторным заражениям
Методы не позволяют дифференцировать

возбудитель с бледной спирохетой, в большинстве случаев диагноз ставят по характерным клиническим проявлениям и более частому поражению детей (редко возникает после 35 лет)

Лечение фрамбезии аналогично проводимому при сифилисе

эндемичных очагах на Балканском полуострове, в Турции, Азии, Африке и

Австралии)

возбудитель — Т. pallidum подвид endemicum

по морфологическим, тинкториальным и культуральным свойствам сходен с бледной спирохетой

резервуар возбудителя — больной
человек

Основной путь передачи— контактный
(через повреждённые кожные покровы);
возможно заражение при половых
контактах

слизистых оболочках, напоминающих поражения при вторичном сифилисе; проявления исчезают в

течение года.
Позднее на коже и слизистых оболочках появляются поражения, сходные с гуммозными проявлениями сифилиса. В редких случаях наблюдают поражения трубчатых костей

и очагах поражения
Применяют все методы, используемые в

серологической диагностике сифилиса (микроскопический, серологический – титры АТ ниже, чем при сифилисе)
В большинстве случаев диагностику беджеля проводят на основании клинических данных

Лечение аналогично таковому при сифилисе

сходен с бледной спирохетой
Пинту регистрируют в эндемичных очагах прибрежных районов Центральной

и Южной Америки; спорадически выявляют в экваториальной Африке и на юге Азии

повреждённые кожные покровы)
В месте внедрения возбудителя пинты появляются пятна красного или сине-фиолетового

цвета. Позднее на их месте формируются участки депигментации типа витилиго. Может развиться полиаденит, реже — поражения внутренних органов, нервной системы и костей
Микробиологическая диагностика пинты включает обнаружение Т. carateum в биоптатах очагов поражения. Применяют методы, используемые в серологической диагностике сифилиса, что позволяет дифференцировать пинту от кожных инфекций
Лечение пинты аналогично при сифилисе

W. Burgdorfer впервые выделил боррелий из кишечника иксодовых клещей

крупных завитков
По Граму окрашиваются отрицательно; хорошо воспринимают анилиновые красители

условиям культивирования — растут на средах, обогащенных животными белками, и

на куриных эмбрионах

эндемического (клещевого) возвратного тифа –
B. duttoni, B. burgdorferi

лихорадки и явлениями общей интоксикации
Возбудитель  — Borrelia recurrentis, открыт О. Обермейером

(1868), этиологическая роль подтверждена Г.Н. Минхом и И.И. Мечниковым в опытах с самозаражением

— постельные клопы
Максимальная вероятность заражения наступает через 5-6 сут после

кровососания
 имеет выраженную сезонность — характеризуется подъёмами к концу зимы и началу весны

Романовскому-Гимзе и метиленовым синим Borrelia recurrentis окрашиваются в сине-фиолетовый цвет  

Боррелии вместе с кровью попадают в кишечник вши и размножаются

в гемолимфе. Заражение возможно при втирании гемолимфы при расчесах.

окончанию инкубационного периода МКО в большом количестве оказываются в кровотоке
Гибель МКО

сопровождается высвобождением эндотоксинов, действующих системно (лихорадка, сосудистые расстройства, головные боли) и местно (очаговый некроз, кровоизлияния, эмболии, инфаркты)
Иммунные механизмы эффективно удаляют возбудителя возвратного тифа из кровотока, что обусловливает окончание приступа. Часть бактерий депонируется в нервной ткани и создаёт рецидивную группу бактерий с отличающейся антигенной структурой

боррелий и тромбоцитов, в результате чего нарушается местное кровообращение с

развитием геморрагических инфарктов

характеризуется чередованием приступов лихорадки и бестемпературных интервалов; в среднем подобных

«волн» может быть 2-3, но не более 5
Диагностическое значение имеет желтушность кожных покровов, наиболее выраженная в конце приступа; частота её появления может достигать 60-80%, но выраженность незначительна (субиктеричность)

м-д «толстой» или висячей капли, в тёмном поле
Спирохетемия наиболее выражена

в начале лихорадочного периода
Высушенные мазки возвратного тифа не фиксируют, а непосредственно окрашивают по Романовскому-Гимзе, фуксином или метиленовым синим.

реакции нагрузки боррелий тромбоцитами

раннее выявление и госпитализация всех больных
- дезинсекция вещей

больного и его жилья
- санитарная обработка контактировавших с ним лиц

Средства специфической иммунопрофилактики возвратного тифа отсутствуют

появление на месте укуса клещом покраснения кожи

кожи, сердца, нервной системы

типичной кольцевидной эритемы диагноз регистрируют даже при отсутствии лабораторного подтверждения

и данных об укусе клеща

и У. Идо (1915)
Вид лептоспир включает более 200 сероваров. Многие серовары

вызывают поражения у человека и животных - лептоспирозы

поражением почек, печени, нервной системы и геморрагическим синдромом

спираль]. Один или оба конца могут быть изогнуты

Цитоплазма лептоспир нежная, гомогенная,

включений не содержит. Спирали лептоспир плотно примыкают друг к другу, что придаёт им вид «нитки жемчуга» при микроскопии в тёмном поле

Движение лептоспир винтообразное; сгибательное или вдоль продольной оси; некоторое время могут быть неподвижными, напоминая верёвку или прихотливо изогнутые петли

при импрегнации серебром (окрашены в коричневый или чёрный цвет)
легко выявляются

темнопольной микроскопией и несколько хуже — фазово-контрастной

полужидких средах с 10-15% кроличьей сыворотки (ср. Уленгута, Терских, Ферворта-Вольфа)
Рост

наблюдают на 5-8-е сутки инкубирования в виде круглых колоний диаметром 1-3 мм (до 1-2 мес.)

(часто болеют свиньи и крупный рогатый скот)

Механизм передачи возбудителя лептоспирозов аналогичен

для всех лептоспирозов

Источник заражения лептоспирами — загрязнённая вода

Возбудитель лептоспирозов сохраняется в почках больного животного и выводится с мочой, загрязняя объекты окружающей среды. Заболеваемость тесно связана с деятельностью человека (сельскохозяйственные работы, скотоводство)
Человек заражается при проведении сельскохозяйственных и мелиоративных работ, а также при купании и использовании воды из загрязнённых водоёмов. Реже регистрируют случаи инфицирования при контактах с животными и через пищевые продукты

погибают при 450 С через 45 мин, при 70 0С

через 10 с
высушивание вызывает немедленную гибель
Выживаемость лептоспир в пресноводных водоёмах варьирует от нескольких часов до 30 сут (наиболее долго сохраняются в чистой воде с рН менее 7,0 и низкой минерализацией)
в сухой почве сохраняются 2-3 ч, заболоченной — до 200 сут.
Чувствительны к действию дезинфектантов

микротравмы кожных покровов. Чаще наблюдают комбинированное заражение через слизистые и

кожу
Возбудитель лептоспирозов проникает в кровь и циркулирует в ней. Генерализованная лептоспиремия продолжается 4-5 сут со дня заражения и сопровождается избирательной концентрацией возбудителя в почках и печени (5-6 сут). Поражения почек и печени характерны для всех леитоспирозов и особенно для болезни Васильева-Вейля
Поражения печени обусловлены механическим повреждением гепатоцитов подвижными лептоспирами, а также токсическим действием эндотоксина, выделяющегося при гибели бактерий; могут приводить к развитию желтухи. В происхождении желтухи определённая роль принадлежит массивному гемолизу, наступающему вследствие повреждения лептоспирами эндотелия сосудов

почек и исчезает из крови и других тканей. Избирательная концентрация

в эпителии и межклеточном пространстве приводит к тяжёлым повреждениям точечных канальцев и нарушению мочеобразования; в тяжёлых случаях вызывает анурию и уремию.
После выздоровления лептоспиры длительно сохраняются в почках и выделяются с мочой (до 40-го дня болезни). Менингиальные явления, часто наблюдаемые при лептоспирозах, связаны с непосредственным действием микроорганизмов и продуктов их распада на ЦНС. В СМЖ лептоспиры регулярно обнаруживают с 7-х по 15-е сутки болезни

форм
При субклинических формах лептоспирозов носитель активно выделяет возбудитель с мочой, наличие инфекции

можно установить серологическими методами
Безжелтушные лептоспирозы
Желтушный лептоспироз (болезнь Васильева-Вейля)

поражениях ЦНС — СМЖ, на более поздних сроках (10-12-е сутки)

— центрифугат мочи

в тёмном поле либо микроскопируют мазки, окрашенные по Романовскому-Гимзе. Количество

лептоспир, циркулирующих в крови, невелико, и эффективность непосредственной микроскопии не превышает 10%. Лучшие результаты даёт предварительное центрифугирование материала

крови на 6-10 пробирок со средой Ферворта-Вольфа. Пробирки встряхивают для

предупреждения сворачивания крови, заливают жидким парафином и инкубируют при температуре 28- 30 °С (ср не меняется)
Через каждые 4-5 сут культуры исследуют, при отсутствии роста в течение 15-20 сут желательно сделать пересевы на свежую среду. Наиболее часто положительные результаты получают при посевах крови, взятой на 1-2-е сутки болезни
идентифицируют с помощью типовых агглютинирующих антисывороток

определяют в реакции микроагглютинации, РПГА и лизиса (РСК) с сывороткой

пациента и стандартным набором микроорганизмов.
При положительном результате наблюдают образование клубков из лептоспир (специфичной считают реакцию с титром не ниже 1:400) или возникновение «зернистого» распада бактерий. Для выявления нарастающих титров AT исследования следует повторить через 3-7 сут.

кроликов внутрибрюшинно заражают кровью или мочой больного. Через 48-72 ч

проводят микроскопию брюшинного экссудата и крови. За животными ведут наблюдение: отмечают повышение температуры тела и появление желтухи.
На 10-14-е сутки животные погибают; исследование позволяет обнаружить в тканях множественные геморрагические очаги, содержащие лептоспиры

с симптоматическими средствами. Больным предписан постельный режим и молочно-растительная диета

воды и проводимыми работами по строительству колодцев и водопроводных систем, дератизация

в эндемичных очагах
Ветеринарно-санитарные мероприятия  — ранняя диагностика лептоспирозов у животных; изоляция животных до окончания выделения возбудителя с мочой; организация карантинов в подобных хозяйствах; проведение строгого предубойного осмотра и выбраковки животных; запрещение продажи молока без ветеринарно-санитарного исследования; плановое обследование собак при наличии эпидемиологических показаний

вакциной, содержащей Аг серогрупп icterohaemorragiae, grippotyphosa и роmo

па, трёхкратно, с недельными интервалами

Благодарю за внимание