Слайд 1СПОСОБЫ РАЗМНОЖЕНИЯ ПРОКАРИОТ
Слайд 2Бактерии размножаются бесполым путем (возможен лишь частичный обмен участками генома).
Особенности
прокариот
Высокие темпы размножения в благоприятных условиях (взрывной тип размножения).
Способность
долгое время обходиться без размножения в неблагоприятных условиях - находятся в стадии покоя (цисты, споры).
Слайд 3Способы размножения прокариот
Бинарное деление (у большинства).
Почкование
Множественное деление
Слайд 4Бинарное деление – равновеликое поперечное деление клетки, с образованием двух
равноценных дочерних клеток без предварительного обмена генетической информацией (амитоз); включает:
1) Фаза роста: увеличение РНК → белка → ДНК, массы и размера клетки.
2) Репликация хромосомной ДНК (по полуконсервативному механизму).
3) Фаза цитокинеза - деление клетки:
у грам(+) бактерий (А) путем формирования перегородки, у грам(-) бактерий (Б) –перетяжки.
4) Фаза расхождения дочерних особей - клетки расходятся или формируют агрегаты (цепочки клеток, тетрады, пакеты и т.д.).
1 - клеточная стенка материнской клетки (толстая линия), заново синтезированная (тонкая линия); 2 - ЦПМ; 3 – мембр. структура; 4 – цитоплазма с нуклеоидом.
Слайд 5Почкование
Множественное деление
На одном из полюсов материнской клетки образуется вырост
(почка), он увеличивается и достигает ее размеров.
Встречаются редко у прокариот
(напр., у фототрофов р. Rhodomicrobium) (у одноклеточных цианобактерий)
Репликация бактериальной хромосомы
Отделение почки от материнской клетки
Репликации бактериальной хромосомы
Вегетативная клетка увеличивается и претерпевает ряд быстрых последовательных бинарных делений.
Образующиеся клетки не растут, а сразу приступают к делению. Образуется от 4 до 1000 мелких клеток – баеоцистов.
1 - клеточная стенка (КС); 2 - ЦПМ;
3 – дополнит. фибриллярный слой КС.
1
2
3
Слайд 7Вопросы:
1. Параметры микробного роста.
2. Рост бактерий в периодической культуре.
3. Рост
бактерий в непрерывной культуре.
Слайд 8В микробиологии есть два понятия:
рост клеток
рост популяции м-о.
Рост популяции
м-о – увеличение числа особей в локальной популяции м-о, вызванное
их размножением.
Слайд 9
1. Параметры микробного роста
Многие одноклеточные м-о размножаются делением пополам и
их число в оптимальных условиях растет в геометрической прогрессии: 20
→ 21 → 22 → … 2n.
Слайд 10Численность клеток в момент времени t:
Nt = N0 · 2n,
где
N0 - исходное кол-во клеток; Nt – кол-во клеток в
момент времени t; n – число делений за время t (24, 48 часов и т.д.).
Логарифмируя, получим:
lg Nt = lg N0 · n lg 2
Слайд 11n – число клеточных делений за время t:
Слайд 12Число клеточных делений (V) за единицу времени (за час) (V
- константа скорости деления):
Слайд 13Время, требующееся для одного цикла делений, или время генерации –
g (время удвоения численности популяции):
Слайд 14Скорость прироста клеток пропорциональна начальной их концентрации.
Коэффициент пропорциональности (μ)
– удельная скорость роста.
μ – прирост числа клеток (биомассы)
за единицу времени, например, за час (час-1).
μ различна для разных культур; может меняться в зависимости от условий выращивания.
Слайд 15При сбалансированном росте (сбалансированный рост – пропорционально числу клеток увеличивается
их масса) удельная скорость роста μ:
Слайд 162. Рост бактерий в периодической культуре
Периодическая культура (ПК) - закрытая система.
В ПК развитие культуры идет в фиксированном объеме среды, условия
все время меняются, численность клеток возрастает, а концентрация субстрата уменьшается.
По мере истощения питательных ресурсов и накопления продуктов обмена до токсичной концентрации рост прекращается.
Слайд 17Рост в периодической культуре:
1. лаг-фаза; 2. экспоненциальная фаза;
3. стационарная фаза;
4. фаза отмирания.
Слайд 18Лаг-фаза – фаза физиологического приспособления; идет синтез ферментов, сборка рибосом.
Продолжительность - 4-5 часов.
Экспоненциальная фаза – м-о размножаются с мах
скоростью (E. coli делится каждые 15-30 мин). Скорость роста зависит от состава среды, физико-химических факторов среды (t, рН и т.д.). Длительность - 5 - 12 часов.
Слайд 19По мере приближения к предельной численности рост замедляется:
1. вследствие
использования питательного субстрата;
2. накапливаются продукты обмена до токсичной концентрации;
3. увеличивается
плотность популяции, идет конкурентная борьба за источники питания;
4. начинают действовать механизмы регуляции плотности популяции.
Слайд 20Стационарная фаза - устанавливается равновесие между клеточным ростом и делением
бактерий, с одной стороны, и процессом их отмирания, с другой
стороны. Спорообразующие бактерии переходят в фазу споруляции. В этой фазе определяют выход биомассы.
Фаза отмирания – гибель клеток наступает вследствие автолиза (под действием собственных ферментов) и под действием орг. кислот, вырабатываемых бактериями.
Слайд 21
Параметры кривой роста периодической культуры
Выход биомассы (мг/мл):
Х = Хmax
– Х0,
где Х0 – исходная биомасса, Хmax – максимальная масса
бактерий.
Скорость размножения бактерий в экспоненциальной фазе.
Продолжительность лаг-фазы.
Слайд 22Количество клеток бактерий определяют:
путем прямого подсчета под микроскопом с использованием
счетных камер, метода Виноградского-Брида,
используя метод серийных разведений с последующим
высевом суспензии на плотные среды, считая, что одна колония – есть результат развития одной клетки.
Бактериальную массу определяют:
При помощи прямых методов: путем взвешивания (сырую биомассу или сухие отцентрифугированные клетки), по содержанию общего белка, общего азота, общего углерода.
Косвенные методы: измерение оптической плотности бактериальной суспензии, по поглощению О2, по выделению СО2.
Слайд 233. Рост бактерий в непрерывной культуре
Непрерывная культура – открытая система,
стремящаяся к динамическому равновесию.
Непрерывное размножение культуры обеспечивают коррекцией рН,
подачей свежей среды, отбором биомассы.
Такой метод положен в основу непрерывного культивирования в хемостате.
Слайд 24
Устройство хемостата
Хемостат состоит из сосуда-культиватора, в который поступает с постоянной
скоростью питательный раствор.
Одновременно происходит постоянный отток бактериальной суспензии, так
что ее объем в культиваторе не изменяется.
Культиватор снабжен мешалкой для равномерного распределения свежей среды, осуществляется аэрация.
Все это создает оптимальные условия для развития культуры.
1 – регулятор
2 – поступление субстрата,
3 – отток (вымывание) смеси субстрата и биомассы,
4 – культура внутри культиватора,
5 – мешалка
Слайд 25При постоянном притоке свежей среды в культиваторе плотность (количество) клеток
(N) сохраняется на постоянном уровне, т.к. скорость деления клеток:
равна скорости
их вымывания из культиватора:
где N - плотность клеток (или количество клеток);
μ – удельная скорость роста (час-1);
f – скорость поступления раствора (скорость протока) (литров/час);
V – объем сосуда (в литрах).
Слайд 26Зависимость μ от концентрации субстрата S установлена Ж. Моно.
Уравнение
Моно:
μ - удельная скорость роста;
S – концентрация субстрата в
хемостате;
KS – константа сродства м-о к субстрату, численно равная такой концентрации лимитирующего рост субстрата, при которой скорость роста культуры равна ½ ее максимальной величины (μmax/2).
Слайд 27Зависимость скорости роста от концентрации субстрата
Слайд 28Культивирование в хемостате используется:
в промышленных условиях;
для изучения физиологии м-о,
кинетики их роста, конкурентных взаимоотношений и т.д.
Слайд 29
Природный аналог хемостата – рубец жвачных
В рубце постоянный приток
питательных веществ, идет размножение м-о, которые разлагают компоненты растительной пищи
– целлюлозу, лигнин и т.д.
Это симбионтное питание (разложение субстратов за счет микробных ферментов).
Численность м-о постоянна - 109 -1010 кл/мл. Излишек м-о выносится из рубца в кишечник, где их биомасса переваривается (источник белка) – симбиотрофное питание.
Слайд 30Продукты метаболизма (продукты брожений) - жирные кислоты всасываются слизистой рубца,
служат энергетическим субстратом для животных. Газы выделяются.
В рубце устанавливаются
стационарные концентрации субстрата, продуктов метаболизма и биомассы м-о.