Слайд 1
Цитологическое исследование в клинической практике
Слайд 2Цитология — наука, изучающая общие черты строения и функционирования клеток
и их производных. Она исследует отдельные клеточные структуры, их участие
в общеклеточных физиологических процессах, пути регуляции этих процессов, воспроизведение клеток и их компонентов, приспособление клеток к условиям среды, реакции на действие различных факторов, патологические изменения клеток.
Слайд 3Цитологическое исследование — это оценка характеристик морфологической структуры клеточных элементов
в цитологическом препарате (мазке) с целью установления диагноза доброкачественной или
злокачественной опухоли и неопухолевых поражений.
Основано на изучении с помощью микроскопа особенностей строения клеток, клеточного состава органов, тканей, жидкостей организма человека в норме и при патологических процессах.
Отличие цитологического исследования от гистологического заключается в том, что изучаются не срезы тканей, а клетки; заключение основывается на особенностях изменения ядра, цитоплазмы, ядерно-цитоплазменного соотношения, образования структур и комплексов клеток.
Слайд 4В развитии цитологии можно выделить три основных этапа:
эксфолиативная, в основном
гинекологическая цитопатология;
аспирационная цитология, связана с внедрением ультразвуковой диагностики,
современный
этап развития определяется применением иммуноцитохимических и молекулярных методов исследования
Слайд 5По способу получения материала цитологию можно подразделить
на дооперационную (эксфолиативную, абразивную,
аспирационную)
- Эксфолиативная цитология включает в себя исследование вагинальных мазков, мокроты,
мочи, плевральной, перитонеальной, перикардиальной, цереброспинальной, синовиальной жидкости и т.д. Этот раздел цитологии отличается простотой техники получения большого количества различного типа клеток, в том числе воспалительного ряда. Клеточный материал может быть не очень хорошо сохранен. Для получения информативного материала с поверхности патологического очага удаляют гноевидные массы, корочки, некротический налет. Если полученный материал представляет жидкость, то в нее добавляется цитрат натрия, чтобы жидкость не свернулась
Слайд 6- Абразивная цитология получает материал из определенного участка внутренних органов,
в том числе исследуются субэпителиальные поражения с помощью фиброоптических инструментов.
При таком взятии материала клетки хорошо сохраняются, и препараты легко интерпретировать. Материал получают из шейки матки, вагины, эндометрия, респираторного, желудочно-кишечного, мочеполового тракта.
Слайд 7Интраоперационная цитологическая диагностика – одно из основных направлений цитологического метода
исследования. Во время операции, используя цитологический метод, уточняется характер патологического
процесса, степень распространенности с выявлением метастазов в лимфатические узлы, печень и другие органы, производится контроль радикальности выполненной операции с исследованием краев резекции.
!!! Надо отметить, что к срочному морфологическому исследованию могут быть противопоказания. Срочное интраоперационное морфологическое исследование не рекомендуется выполнять при подозрении на внутриэпителиальный рак с ограниченным очагом поражения из-за того, что не останется материала для планового гистологического исследования.
Слайд 8Иммуноцитохимическое исследование нередко является решающим в дифференциальной диагностике новообразований, когда
при рутинном исследовании возникают непреодолимые трудности для установления гистогенеза отдельных
опухолей, определения источника метастазирования, трактовки первично-множественных поражений.
За последние годы достигнут огромный прогресс в клиническом использовании различных биологических маркеров. В отличие от сывороточных маркеров, клеточные маркеры определяются непосредственно в опухолевых клетках, в основе которого лежит реакция антиген-антитело. В их числе онкогены, рецепторы эстрогенов и прогестерона, молекулы, опосредующие апоптоз, рецепторы факторов роста и т. д. Все эти показатели позволяют более детально изучить молекулярно-биологические особенности опухолевых клеток, ассоциированные со степенью дифференцировки, способностью к инвазии и метастазированию, чувствительностью к химиотерапии, и, следовательно, с особенностями течения и прогнозом заболевания в каждом конкретном случае.
Слайд 9Использование иммуноцитохимического исследования позволяет расширить возможности морфологических методов и на
дооперационном этапе уточнить гистогенез, диагностировать первично-множественные поражения, степень распространения и
оценить некоторые показатели прогноза и чувствительность опухоли к химиогормонотерапии.
Слайд 10Иммуноцитохимическое исследование помогает в определении источника метастазирования при невыявленном первичном
очаге. К сожалению, органоспецифических маркеров не так уж и много.
К их числу могут быть отнесены специфический антиген предстательной железы (ПСA), позволяющий идентифицировать метастазы рака простаты более чем в 95% случаев; тиреоглобулин, экспрессирующийся в 92–98% фолликулярного и папиллярного рака щитовидной железы, и кальцитонин, экпрессирующийся в 80% медуллярных раков щитовидной железы В некоторых случаях рак щитовидной железы может экспрессировать и кальцитонин, и тиреоглобулин, что только с помощью иммуноферментной диагностики позволяет диагностировать диморфные А-С-клеточные раки.
Слайд 11 В последние годы помимо рутинных цитологических мазков
для получения качественных монослойных цитологических препаратов используется жидкостная система: пунктаты
вносятся в специальную среду накопления, после чего центрифугируются в режиме 1000 оборотов в течение 5 минут при среднем ускорении на центрифуге (Суtospin-3, Суtospin-4). Применение методики жидкостной цитологии имеет ряд преимуществ: обеспечивает сохранность клеточных структур, уменьшает фон, клетки сосредотачиваются в одном месте – «окошке», что сокращает время просмотра препарата и значительно экономит дорогие сыворотки при проведении иммуноцитохимического исследования.
Слайд 12 Влажная фиксация препарата в спирте сразу после взятия
мазков применяется при окраске по Папаниколау. В остальных случаях мазки
высушивают на воздухе, а затем фиксируют уже в лаборатории.
Наиболее распространенный способ фиксации – в равных объемах спирта и эфира (смесь Никифорова).
Для иммуноцитохимического исследования применяют фиксацию ацетоном.
При окраске мазков используют панхромную окраску азур-эозином по методу Романовского – Гимза в различных модификациях (Лейшмана, Паппенгейма), а также окраска гематоксилином и эозином, особенно при исследовании гинекологического материала используется окраска по Папаниколау. Возможно при рутинном исследовании или специальной окраске выявление бактериальной флоры, в том числе бацилл Коха, лепры, хеликобактера, трихомонад и т.д.
Слайд 13Цитологическая диагностика основана на следующих принципах:
Разница клеточного состава в норме
и патологии.
Оценка не одной отдельно взятой клетки, а совокупности клеток,
большое значение придается фону препарата.
Цитолог должен иметь патологоанатомический базис.
Каждое исследование завершается формулировкой заключения.
Слайд 14Основные задачи цитологической диагностики состоят в следующем:
Формулировка заключения до лечения.
Интраоперационная срочная диагностика.
Контроль эффективности лечения.
Оценка важнейших факторов прогноза
течения заболевания.
Слайд 15Цитологическое заключение до лечения включает:
определение гистогенеза новообразований;
установление степени дифференцировки
опухолевого процесса;
уточнение степени распространенности опухоли;
изучение фоновых изменений;
определение
некоторых факторов прогноза;
возможность исследования бактериальной флоры.
Слайд 16Современное цитологическое заключение не только констатирует наличие рака, но и
указывает гистологический тип опухоли и степень дифференцировки согласно общепринятым международным
классификациям (МКБ-О и ВОЗ)
Слайд 17По характеру ошибки цитологов можно разделить на две большие группы:
ложноотрицательные
и ложноположительные.
Ложноотрицательные заключения преобладают и приводят к гиподиагностике опухолевого
процесса, чаще всего из-за небольшого количества информативного материала в пунктате. Имеются и объективные трудности в оценке изменений, связанные чаще с высокой дифференцировкой опухоли, например, практически невозможно диагностировать фолликулярный рак щитовидной железы с минимальной инвазией, трудно диагностируется тубулярный, маститоподобная форма долькового рака молочной железы.
Слайд 18Гипердиагностика опухолей на нашем материале многие годы не превышает 1%,
однако может служить причиной ненужного, а иногда и калечащего лечения.
Истинная гипердиагностика, то есть ложное цитологическое заключение о наличии опухоли, объясняется несколькими наиболее типичными причинами.
Выраженная пролиферация клеточных элементов является наиболее частой причиной гипердиагностики рака. Например, пролиферация эпителия протоков и долек молочной железы при фиброаденоме и пролиферирующем аденозе, особенно при укрупнении ядер, наиболее часто приводит к гипердиагностике рака молочной железы. Правильной диагностике помогает анализ ядерных характеристик клеток опухоли: наличие ровных контуров ядра и равномерное распределение хроматина.
Слайд 19Реактивные изменения эпителия служат также нередкой причиной неадекватной цитологической диагностики
Хронический
аутоиммунный тиреоидит типа Хашимото сопровождается образованием сосочковоподобных структур, к оценке
которых необходимо подходить осторожно и помнить, что при этом процессе реактивные изменения эпителия можно ошибочно принять за папиллярный рак щитовидной железы.
Выраженные дистрофические изменения клеток являются также одной из причин ошибочной цитологической диагностики. Например, выраженная жировая дистрофия гепатоцитов может привести к гипердиагностике метастаза почечноклеточного светлоклеточного рака, особенно при уже состоявшемся диагнозе рака почки.
Слайд 20Имеются и объективные диагностические проблемы, например, в дифференциальной диагностике между
эндометриоидной высокодифференцированной аденокарциномой и атипической гиперплазией эндометрия, себоррейной (базальноклеточной) кератомой
и базально-клеточным раком, инфекционным мононуклеозом и болезнью Ходжкина, где достаточно высокий процент ошибочных заключений и требуется дальнейшая разработка цитологических критериев диагностики.
Слайд 21Вместе с истинной цитологической гипердиагностикой существует ложная гипердиагностика, когда цитолог
дает уверенное заключение о злокачественном процессе, а при гистологическом исследовании
опухоли не обнаруживается, то есть фактически имеет место гистологическая гиподиагностика. Пересмотр цитологических препаратов несколькими высококвалифицированными специалистами, повторное взятие биопсии, клиническое течение заболевания в дальнейшем подтверждают результаты цитологического исследования. Больше всего ложной цитологической гипердиагностики относится к исследованию биопсийного материала из бронхов и гортани, а также при исследовании лимфатическиих узлов, когда при цитологическом исследовании выявлялись единичные комплексы анаплазированных клеток, несомненно принадлежащих раку
Слайд 22Цитологический анализ использует при:
Скрининге (профилактическом осмотре).
Установлении (уточнении) диагноза при заболевании.
Установлении
(уточнении) диагноза во время операции.
Контроле в ходе лечения и после
лечения.
Динамическом наблюдении (для раннего выявления рецидивов).
Слайд 23Материалы для цитологического исследования
Жидкости: мокрота, моча, сок предстательной железы, смывы
из различных органов во время эндоскопии, а также из шейки
и полости матки (цитологическое исследование мазков, цитологическое исследование шейки матки), выделения из молочных желез, соскобы и отпечатки с эрозированных или язвенных поверхностей, свищей, ран, жидкость из суставных и серозных полостей, цереброспинальная и амниотическая жидкость;
Пунктаты: материалы, полученного при аспирационной диагностической пункции, преимущественно тонкой иглой;
Отпечатки с удаленных тканей, например поверхности свежего разреза оперативно удаленной или взятой для гистологического исследования ткани
Слайд 24Одним из главных условий успешного цитологического исследования является правильный выбор способа
получения материала и его обработки
Слайд 25Жидкостная цитология
Цитологическое исследование биоматериала шейки матки (окрашивание по Папаниколау, Рар-тест)
Исследование
эндоскопического материала на наличие Helicobacter pylori
Исследование соскобов (мазков) со
слизистой оболочки полости носа
Кольпоскопия
Исследование пунктатов других органов и тканей
Исследование пунктатов молочной железы и кожи
Исследование транссудатов, экссудатов, секретов, экскретов
Исследование аспиратов из полости матки (мазки), отпечатки с внутриматочной спирали
Исследование эндоскопического материала
Исследование соскобов и отпечатков опухолей и опухолеподобных заболеваний
Исследование соскобов и отпечатков с поверхности кожи и слизистых
Цитологическое исследование материала, полученного при хирургических вмешательствах
Слайд 26Характер патологического процесса распознается по следующим признакам:
морфологические особенности клеток,
количественное взаимоотношение отдельных клеточных групп,
расположение клеточных элементов в препарате.
Слайд 27Цитологический метод технически прост, быстр, сравнительно дешев, малотравматичен. Однако «легкость»
цитологического метода обманчива, так как цитологическое исследование должно заканчиваться формулировкой
заключения, основываясь на котором разрабатывается тактика лечения.
Слайд 28Эксцизионная биопсия — в результате хирургического вмешательства происходит изъятие всего исследуемого
образования или органа.
Инцизионная биопсия — в результате хирургического вмешательства происходит изъятие
части образования или органа.
Пункционная биопсия — в результате прокола полой иглой исследуемого образования происходит забор фрагментов или столбика ткани.