Слайд 1Возбудители туберкулеза
д.б.н.,проф. Рыбальченко О.В.
СПбГУ
2019
Слайд 2
Возбудители туберкулеза
(tuberculum лат. – бугорок)
Род Mycobacterium
1. вид M.
tuberculosis
2. вид М. bovis
Слайд 3 Генрих Герман Роберт Кох
немецкий микробиолог
(1843 – 1910)
Лауреат Нобелевской
премии по физиологии и медицине 1905 г. за определение этиологической
значимости бактерий:
1.Бациллы сибирской язвы,
2. Холерного вибриона
3. Туберкулезной палочки -палочка Коха - 1882 г.
Слайд 4Положительные результаты
в лечении туберкулеза отмечали 45-50 лет назад
1. Прививка
БЦЖ
2. создание противотуберкулезных препаратов (ПТП)
При массовой инфицированности прививка БЦЖ не
обеспечивает полной защиты!!!
Слайд 5Противотуберкулезная вакцина
BCG (БЦЖ):
Bacilla
Calmette
Guerin
живая аттенуированная ослабленная культура M.
bovis
Слайд 6Вакцинирование новорожденных
На 3-7-е сутки в родильных домах
всех н/р вакцинируют вакциной
БЦЖ-М
Если в окружении н/р - туберкулезные больные или показатель
заболеваемости превышает 80 на 100 тыс. населения
применяют
вакцину БЦЖ.
Слайд 7Заболеваемость туберкулезом в РФ
Начиная с 2007 года падает
Согласно официальным
данным, за 8 лет к 2015 г. заболеваемость снизилась более
чем на 28%.
Смертность снизилась на 50%.
В 2008 г. показатель заболеваемости туберкулезом составлял - 85,1/100 тыс. населения.
Слайд 8Данные ВОЗ по туберкулезу в РФ
довольно оптимистичны:
За 2014 г.
заболеваемость туберкулезом в России снизилась на 5,5%
Смертность снизилась на
11%.
2015 г. - снижение показателя до 65,4 на 100 тыс. населения.
2016 г. - снижение показателя до 59,7 на 100 тыс. населения.
Слайд 9Заболеваемость туберкулезом в СПб в 2017
Нет тенденции к снижению!!!
Мигранты составляют
47% заболеваемости.
Дети мигрантов составляют 34,1% заболеваемости.
Подростки мигрантов составляют 64% заболеваемости.
Слайд 10Заболеваемость туберкулезом в РФ в 2018 г.
Активные формы туберкулеза выявили
у 61544 человек
За аналогичный период 2017 г. туберкулезом заразились
66568 человек, т.обр.показатель снизился на 7,7%,
по сравнению с 2017 г.
(стат. матер. по инфекционной заболеваемости в РФ)
Слайд 11Заболеваемость детей туберкулезом в РФ в 2018 г.
Среди детей до
17 лет и до 14 лет показатели по заболеваемости за
год снизились на 14,6% и 14,5%.
2873 против 3293 человек в 2017 г.
и 2106 против 2406 человек в 2017 г. соответственно.
Слайд 12Заболеваемость туберкулезом в РФ в различных социальных группах
от общего числа
заболевших (%)
работающих граждан -27,7
неработающих граждан -52,8
школьников - 2,5
студентов -
2,4
дошкольников - 1,6
инвалидов - 5,4
пенсионеров - 7,6
Слайд 13Эксперты ВОЗ по туберкулезу выделили в РФ 4 основные проблемы
1.
высокий уровень встречаемости туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью;
2. дефицит лекарств
второй линии (препараты повышенной токсичности для лечения тяжелых форм туберкулеза);
3. слабый контроль за инфекцией в противотуберкулезных учреждениях;
4. нехватка врачей-фтизиатров.
При массовой инфицированности прививка БЦЖ не обеспечивает полной защиты!!!
.
Слайд 14Туберкулез
Инфекционное заболевание человека и животных, вызываемое туберкулезными микобактериями (ТМБ)
M. tuberculosis
и M. bovis с характерным поражением различных систем и органов-
образование гранулем.
Слайд 15Гистологический срез туберкулезной гранулемы
Слайд 16Строение туберкулезной гранулемы
В центре расположен очаг некроза, по периферии
— слой из эпителиоидных клеток и лимфоцитов с примесью макрофагов
и плазматических клеток.
Между эпителиоидными клетками и лимфоцитами располагаются гигантские клетки Пирогова — Лангханса, типичные для туберкулезной гранулемы.
При импрегнации солями серебра среди клеток гранулемы обнаруживается сеть аргирофильных волокон. Небольшое число кровеносных капилляров обнаруживается только в наружных зонах бугорка.
При окраске по Цилю—Нильсену в гигантских клетках Пирогова—Лангханса выявляют микобактерии туберкулеза.
Слайд 17Структура туберкулезной гранулемы
Слайд 18Эпителиоидные клетки
epithelioid cell - клетки, обнаруживаемые вне эпителия, но
обладающие рядом характеристик эпителиальных клеток
Слайд 19Туберкулезный процесс
может происходить в:
легких
почках
костях
суставах
коже,
мозговой
оболочке.
Слайд 20Пораженные микобактериями легкие
Слайд 21Рентгенограмма легких при туберкулезе
Слайд 22Клиническая картина при туберкулезе кожи
Слайд 23Спектр клинических проявлений туберкулеза
от малозаметных проявлений до опасных для жизни
форм заболеваний,
от неспецифической интоксикации до вполне конкретных органных нарушений,
от острых
скоротечных симптомов до хронической патологии.
Слайд 24Туберкулез у животных
Лабораторные животные практически все восприимчивы к туберкулезу.
В
естественных условиях болеют:
человекообразные обезьяны,
крупный рогатый скот,
свиньи.
Слайд 25Пути заражения туберкулезом
95-96% - аэрогенный путь
3% алиментарный путь
1% контактный путь
- контакт с инфицированными животными
Слайд 26Инфицирование ТМБ
Население 1/3 Земного Шара – инфицировано.
Только у 10% инфицированных-
клинические проявления.
Это свидетельствует о существовании мощных механизмов резистентности.
Развитие туберкулеза зависит
от:
1. чувствительности организма человека,
2. особенностей МБТ - устойчивости к ПТП.
Слайд 27Для развития туберкулеза важно общее состояние здоровья человека!!!
У детей и
взрослых провоцирующая роль - инфекционные заболевания:
корь и коклюш.
Влияют эндогенные факторы:
диабет,
белковое голодание,
последствия лечения кортикостероидами,
психические заболевания, алкоголизм, депрессия.
Т.обр. туберкулез провоцируют все заболевания, снижающие резистентность организма!!!
Слайд 28Гипорезистентность к МБ
У лиц с избирательными иммунодефицитами: напр., с врожденным
дефектом по Th1-хелперам, цитокинам и их рецепторам
(γ-интерферон, интерлейкин 12)
Слайд 29Центральная роль в противотуберкулезном иммунитете
Принадлежит Т-хелперам, опосредующим
формирование опсонизирующих АТ,
активацию макрофагов и цитотоксичность естественных киллеров.
Слайд 30Таксономия р. Mycobacterium
›60 видов
МБТ туберкулеза:
М. tuberculosis (у человека)
и
M. bovis (у животных)
Нетуберкулезные микобактерии (НТМБ)
Ранее абсолютными сапрофитами считали:
M.avium-intracellulare
M.asiaticum
M. gordonae и т.д.
Слайд 31
Наиболее часто встречаемые НТМБ в клинических образцах
НТМБ вызывают микобактериозы
M. ulcerans
M.africanum
M.kansasii
M.xenopi
M. haemophilium
Слайд 32Микобактерии
Туберкулез
M. tuberculosis
M. bovis
98%
Лепра
M. leprae
Нормальная микробиота
M. smegmatis
Объекты окружающей
среды
(ООС)
Микобактериозы
2%
Слайд 33МБ объединены в род
На основе общего свойства:
наличие миколовых кислот (40-60%)
в клеточной стенке, что обеспечивает
кислото-, щелоче-, спиртоустойчивость
Миколовые кислоты —длинноцепочечные
разветвлённые жирные кислоты:
- R1-CHOH-CHR2-COOH - с перекрестными сшивками, по 60-90 атомов углерода в молекуле (С60-С90).
Слайд 34Схема строения клеточной стенки МБ
Слайд 35Схема строения клеточной стенки МБ
Слайд 36Морфологические свойства МБ
Гр+ палочки, но не окрашиваются по Граму
Тонкие, прямые
и изогнутые
Длина – от 1 до 4 мкм
Ширина – 0,3-0,4
мкм
Слайд 37Особые тинкториальные свойства
плохо окрашиваются анилиновыми красителями
для окраски используют метод
Циля-Нильсена
МБ – окрашиваются в красный цвет
Слайд 39M. tuberculosis
в мокроте (окраска по Цилю-Нильсену)
Слайд 40
Культуральные свойства
Аэробы
Опт. Т°- 37°С
Скорость роста МБ
Слайд 41Питательные среды для МБ
Требуют сложных по составу сред:
Левенштейна - Йенсена
(яичный желток с картофельной мукой, глицерином и солями)
Слайд 42Синтетическая среда Сотона
аспарагин, глицерин, цитрат железа, фосфат калия)
На ППС
– через 4-6 недель морщинистые колонии с неровными краями
В ЖПС
– нежная пленка на поверхности, утолщаясь, падает на дно.
Слайд 43Рост M. tuberculosis на среде Левенштейна - Йенсена
Слайд 44Рост M. tuberculosis (a) M. bovis (б)
в глицериновом бульоне
Слайд 45Ускоренная идентификация - метод Прайса
Клетки патогенных МБ располагаются в виде
жгутов-нитей (от англ. сord-жгут, веревка).
Нити – свидетельство наличия корд-фактора
(Cord)- гликолипида
(трегалоза-6,6-димиколят)
Световая микроскопия
культуры, содержащей
корд-фактор (Cord+) культура
M. tuberculosis
Слайд 46Устойчивость МБТ к факторам внешней среды
Очень устойчивы:
в пыли – до
3-х мес.
в воде – до 5 мес.
почве – до 6
мес.
солнечный свет- гибель через 1 час
антисептики – медленно (фенол › 24 час)
многие не эффективны
Слайд 47Биохимические свойства
Некоторые признаки вместе с культуральными особенностями используют для дифференцирования
видов МБ.
1. ниациновый тест + (накопление никотиновой кислоты)
2. редукция нитратов
в нитриты
Слайд 48Факторы патогенности
M. tuberculosis
Специфичность действия патогенных факторов выражена в образовании
гранулем и поражении тканей.
Не образуют экзотоксины
Поражение тканей - за счет
липидов:
1. воск Д,
2. жирные кислоты: миколовая, миколиновая, фтиоидная, туберкулостеариновая,
3. корд-фактор (трегалоза-6,6-димиколят),
4. сульфатиды,
5. фосфатиды.
Слайд 49Токсическое действие
корд-фактора
нарушение метаболических процессов в эукариотических клетках.
нарушает дыхательную
функцию в клетках эукариот, блокируя окислительное фосфорилирование в митохондриях макрофагов.
МБ могут даже размножаться в макрофагах.
Слайд 50Антигенные свойства МБ
АГ-протеиновый комплекс
ТУБЕРКУЛИН
(кожно-аллергические реакции Пирке и Манту)
Слайд 51Кожно-аллергическая
реакция Пирке
Служит для выявления первичного заражения детей.
Туберкулин наносят на
кожу и через каплю производят неглубокие кожные насечки.
Слайд 52Кожно-аллергическая
реакция Манту
Для отбора подлежащих ревакцинации лиц туберкулин вводят внутрикожно,
что вызывает у инфицированных МБ лиц местную воспалительную реакцию в
виде инфильтрата и покраснения.
Слайд 54
Реакция Манту
Оценивают результат через 72 час
Слайд 55Реакция Манту
Измерять нужно только уплотнение!!!
Слайд 56Реакция Манту
Отрицательная реакция: 0-1 мм
Сомнительная реакция: 2-4 мм
Положительная реакция: 5
мм и более, слабо положительная: 5-9 мм, средней интенсивности: 10-14
мм, выраженная: 15-16 мм
Слайд 57Иммунологические методы
T-spot test (c 2001г.)
диагностический тест, основанный на стимуляции
Т-клеток белками ESAT-6 и CFP-10 M.tuberculosis на продукцию INF-γ,
этих
АГ нет во всех штаммах БЦЖ и большинства нетуберкулезных бактерий, кроме М. kansasii, М. szulgai и М. marinum.
QuantiFERON-TB Gold ( с 2005г.) (Квантифероновый тест)
основан на количественном определении интерферона INF-γ, высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими АГ (ESAT-6, CFP-10, RD11) M.tuberculosis
Введен в обязательный комплекс фтизиатрического обследования в 78 странах мира
Слайд 58ДИАСКИН -ТЕСТ
Аналог туберкулиновой пробы Diaskintest® (с 2009 г.)
аллерген
туберкулезный рекомбинантный основан на реакции гиперчувствительности замедленного типа к аллергену
(аналог р.Манту) - два белка, соединенных вместе (ESAT6/CFP10), синтез которых кодируется в уникальной (отличной от других микобактерий) части генома M. tuberculosis.
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ!!!!!!!!!
У лиц на ранних стадиях туберкулезного процесса, у больных с тяжелым течением туберкулеза, а также с сопутствующими заболеваниями (СПИД, вирусные гепатиты и др.) реакция на пробу с препаратом ДИАСКИНТЕСТ® может быть отрицательной.
В отличие от реакции замедленного типа, кожные проявления неспецифической аллергии (в основном гиперемия) на препарат, как правило, наблюдаются сразу после постановки пробы и через 48-72 ч обычно исчезают.
Слайд 60Фундаментальные исследования МБТ Белок MPT64
MPT64 из 33 специфических белков,
отличается тем, что секретируется во внешнюю среду, являясь индикатором роста
М.tuberculosis.
MPT64 - предоминантный белок, М.м. 24 kDa, обладает иммуногенными свойствами.
Предложен как потенциальный кандидат в состав вакцины, распознается T-лимфоцитами CD4+.
Слайд 61Диагностика туберкулеза
1.Микроскопия:
Люминесцентная (флюорохромом аурамином)
Световая (метод Прайса)
Окраска по Цилю-Нильсену
2.Культуральные методы:
выращивание 3
недели и более
чувствительность к ПТП
3. Кожно-аллергические пробы (Пирке и Манту)
4. Молекулярно-биологические исследования:
ПЦР
5. неспецифические тесты:
Газожидкостная хроматография (на миколовые кислоты)
Слайд 62Иммунитет
формируется в ответ на проникновение в организм микобактерий в процессе
инфекции или после вакцинации и носит инфекционный характер, что обусловлено
длительной персистенцией L-форм
Решающая роль принадлежит клеточному иммунитету
Исход заболевания определяется активностью Т-хелперов, которые активируют фагоцитарную активность макрофагов и активность Т-киллеров
Слайд 63Чувствительность МБ к
ПТП и АМП
1. Стрептомицин (блокирование синтеза белка
на этапе элонгации)
2. Тубазид, фтивазид, изоницид, ГИНК (блокирование синтеза миколовых
кислот)
3. ПАСК (нарушение синтеза фолиевой кислоты)
Препараты второго ряда:
Циклосерин (ингибитор синтеза пептидогликана)
Рифампицин (блокирование транскрипции)