Слайд 2Антитела
Антитела – иммуноглобулины, вырабатывамые в ответ на введение антигена, способны
специфически связываться с антигеном и участвовать во многих иммунологических реакциях.
Слайд 3Иммуноглобулины
Гликопротеины, состоят на 82-96% из полипептидов и 4-18% углеводов.
Полифункциональны: связывают
антиген, активируют комплемент, обеспечивают связывание с клетками.
Продуцируются в ходе гуморального
иммунного ответа
Слайд 5Структура иммуноглобулинов
Основная структурная единица –мономер- состоит из 4 полипептидных цепей.
Двух
одинаковых тяжелых –Н (heavi) цепей и двух одинаковых легких –L
(light) цепей.
Каждая полипептидная цепочки имеет вариабельную (V) область и константную (C).
Слайд 8Структура иммуноглобулинов
Полипептидные цепи Ig существуют в виде глобулярных образований (иммуноглобулины),
так называемых доменов. Cтабилизированных дисульфидными мостиками.
Доменами Н-цепи являются Vн, Сн1,Сн2,
Cн3, доменами L-цепи VL,СL.
Слайд 10Структура иммуноглобулинов
Участок ответственный за связывание антигена образован вариабельными доменами H-
и L-цепей. Антигенспецифическое связывание осуществляется при помощи Fab-фрагмента (fragment antigen
binding) – активного центра (паратоп). Каждый активный центр любого иммуноглобулина соответствует детерминантной группе (эпитопу) соответствующего антигена как «ключ замку».
Идиотип Ig - антигенные детерминанты отражают особенности строения антигенсвязывающего центра самой молекулы Ig.
Идиотоп – антигенные детерминанты V-участков Ig.
Слайд 11Структура иммуноглобулинов
Константные части Н-цепей не взаимодействует с антигеном, но обладают
сродством к комплементу, способны фиксировать и активировать его. В связи
с этим фрагмент и обозначается как Fс (fragment constant) -фрагмент (фрагмент комплемента). Fс-фрагмент обеспечивает, биологическую роль.
Слайд 12Структура иммуноглобулинов
Шарнирная область
обеспечивает гибкость молекулы Ig
Пепсин делит на
2 фрагмента Fab u Fc
Папаин обеспечивает подвижность в шарнирной области
Слайд 15Структура иммуноглобулинов
Выявлено пять классов тяжелых цепей- альфа ( с двумя
подклассами), гамма ( с четырьмя подклассами), эксилон, мю и дельта.
Соответственно обозначению тяжелой цепи обозначается и класс молекул иммуноглобулинов- А, G, E, M и D.
Существуют легкие цепи двух типов- каппа и лямбда, они встречаются в различных пропорциях в составе всех классов иммуноглобулинов.
Слайд 17Свойства
иммуноглобулинов
Специфичность - способность взаимодействия с определенным (своим) антигеном (соответствие эпитопа
антигена и активного центра антител).
Слайд 18Свойства
иммуноглобулинов
Валентность- количество способных реагировать с антигеном активных центров (
это связано с молекулярной организацией- моно- или полимер). Иммуноглобулины могут
быть двухвалентными ( IgG ) или поливалентными (пентамер IgM имеет 10 активных центров)- навывают полными антителами. Неполные антитела имеют только один активный центр.
Слайд 19Свойства
иммуноглобулинов
Афинность - прочность связи между эпитопом антигена и активным
центром антител, зависит от их пространственного соответствия.
Авидность - интегральная
характеристика силы связи между антигеном и антителами, с учетом взаимодействия всех активных центров антител с эпитопами.
Гетерогенность - обусловлена антигенными свойствами антител, наличием у них трех видов антигенных детерминант:
- изотипические - принадлежность антител к определенному классу иммуноглобулинов;
- аллотипические- обусловлены аллельными различиями иммуноглобулинов, кодируемых соответствующими аллелями Ig гена;
- идиотипические- отражают индивидуальные особенности иммуноглобулина, определяемые характеристиками активных центров молекул антител.
Слайд 23Иммуноглобулин G
70-80% всех сывороточных Ig
Содержание 7-24 г/л
2 активных центра (паратопа),
мономер
4 подкласса G1, G2, G3 и G4
G1 и G3 связывают
комплемент
G4 обладает цитофильностью
Слайд 24Иммуноглобулин G
Период полу распада 7-23 дней в зависимости от подкласса
Может
связываться с макрофогом, нейтрофиллом и NK
Проходит через плаценту (Ig1, Ig3)обеспечивает
гуморальный иммунитет первые 6 месяцев жизни у новорожденных
Доминирует при вторичном иммунном ответе
Является опсонином
Участвует в антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности (за счет NK, которые выделяют БАВ)
Слайд 26Иммуноглобулин А
Сывороточный IgA – 2 паратопа.
1,3-5,1г/л
10-15%
Секреторный sIgA
4-6 паратопов
Содержит S-и
J-пептиды
Устойчив к дейс-твию протеаз
Слайд 27Иммуноглобулин А
Не связывает комплемент
IgA возрастает при перинатальных инфекциях, заболеваниях дыхательного
и кишечного трактов, при ИД.
Нейтрализует вирусы, препятствует алгезии, адсорбции бактерий
и вирусов.
Слайд 28Иммуноглобулин М
Пентамер
10 паратопов
5-10% всех иммуноглобулинов
М1 иМ2
0,8 – 1,7 г/л
Образуется первым
на антигенный стимул
Слайд 29Иммуноглобулин М
Активирует комплемент по классическому пути
На поверхности В-л находится в
виде мембранного Ig (mIg), образуя BCR
Высокая концентрация при перинатальных инфекциях,
острых гепатитах, острой фазе инфекционных заболеваниях
Слайд 30Иммуноглобулины Е и D
IgE – реагины
0,002% всех сывороточных Ig
0,00025г/л или
100КЕ
1 паратоп
IgD – 0,2%
0,03г/л
Рецептор В-лимфоцитов
1 паратоп
Слайд 31Нормальные антитела
Естественные Ат – совокупность Ig сыворотки крови человека различной
специфичности, формирующих их базальный уровень.
Изогемагглютинины – Ат к группам крови,
бактериям кишечной группы, кокков, некоторых вирусов. Постоянно образуются. Отражают готовность макроорганизма к иммунному реагированию. Свидетельствуют об отдаленном контакте с данным Аг.
Слайд 32Моноклональные антитела
Способность синтезировать Ат с паратопом строго определенной специфичности –
один клон В-лимфоцитов.
Получение моноклональных Ат направлено на предварительную селекцию АПК
и их клонирование.
Метод гибридом
Слайд 33Получение
моноклональных антител
Слайд 34Моноклональные антитела
Моноклональные антитела.
Являются однородными и высоко специфичными. Их
продуцирует гибридома – популяция гибридной клетки, полученной слиянием антителообразующей клетки
определенной специфичности с опухолевой клеткой миеломы, не образующей Ат. Отобранные селекцией и размноженные В-л гибридного клона культивируют или прививают в брюшную полость мыши с асцитом, где в экссудате брюшной полости появляются многочисленные моноклональные Ат одной специфичности. Полученные моноклональные Ат широко используются в клинико-диагностической практике.
Слайд 35Полные и неполные Ат
Полные Ат – участвуют в реакциях агглютинации
и преципитации (IgM и IgG).
Неполные Ат – блокирующие антитела имеют
1 паратоп или активный центр.
Слайд 36Виды антител
Видовые –антигенные детерминатты характерны для особей данного вида (кролика,
человека и т.п.)
Изотипические – антигенные детерминаты являются групповыми (деление на
5 классов Ig)
Аллотипические –антигенные детрминанты являются индивидуальными (можно различать особи внутри вида)
Идиотипические – антигенные детерминанты отражают особенности строения антигенсвязывающего центра самой молекулы Ig (образованы V доменами легкой и тяжелой цепи )
Слайд 37Виды антител
Абзимы – (анг. Adzymes – от antibody (ab) +enzymes)
представляет собой своеобразные Ат – ферменты, которые специфически связываются с
Аг, вызывая его деструкцию. Абзимы являются биокатализаторами ферментных реакций. Они катализируют многие эстеразные и оксидазные реакции
Химерные моноклональные Ат - состоят из вариабельной области Fab – фрагмента мышиных моноклональных Ат против определенного Аг и константной области иммуноглобулина человека.
Слайд 38Источники разнообразия антител
Пять возможных источников структурного разнообразия
V - областей Н - и L – цепей иммуноглобулинов.
1.Многочисленность
гаметных геном. Имеется большое число отдельных неперестроенных генов (V1-Vn), каждый из которых кодирует V-домен отдельной специфичности.
2.Соматический мутагенез. В онтогенезе В-клеток в результате мутаций гаметного V-гена в разных В-клеточных клонах возникают различные V-гены.
3.Соматические рекомбинации. В онтогенезе В-клеток происходит рекомбинация ряда генных сегментов (J1-Jn), соединяющихся с основной частью V-гена. В результате синтезируется белок, отдельные элементы которого кодируются разными генными сегментами.
4.Генная конверсия. Отрезки ДНК, принадлежащие ряду псевдо-V-генов, могут копироваться в функциональном V-гене, меняя его исходную нуклеотидную последовательность.
5.Вставка добавочных нуклеотидов. При рекомбинации перед соединением вырезанных V- и J- сегментов ДНК возможно встраивание между ними добавочных нуклеотидов, кодирующих дополнительные аминокислотные остатки V-областей.