Разделы презентаций


Генная инженерия бактерий, высших растений и области ее применения

Содержание

Нуклеиновые кислоты состоят из моносахаридов (рибозы и дезоксирибозы) и пуриновых (аденин, гуанин) и пиримидиновых (цитозин, урацил, тимин) азотистых оснований. В состав рибонуклеиновой кислоты входит рибоза, аденин, гуанин, цитозин, ура­цил, дезоксирибонуклеиновой -

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1Генная инженерия бактерий, высших растений

и области ее применения

1. Нуклеиновые кислоты и факторы наследственности у животных организмов.
2. Генная инженерия бактерий.
3. Генная инженерия растений.
4. Получение трансгенных растений.
5. Получение трансгенных животных.

Генная инженерия бактерий, высших растений

Слайд 2Нуклеиновые кислоты состоят из моносахаридов (рибозы и дезоксирибозы) и пуриновых

(аденин, гуанин) и пиримидиновых (цитозин, урацил, тимин) азотистых оснований.
В

состав рибонуклеиновой кислоты входит рибоза, аденин, гуанин, цитозин, ура­цил, дезоксирибонуклеиновой - дезоксирибоза, аденин, гуанин,
цитозин, тимин.
Нуклеиновые кислоты состоят из моносахаридов (рибозы и дезоксирибозы) и пуриновых (аденин, гуанин) и пиримидиновых (цитозин, урацил, тимин)

Слайд 3Нуклеиновые кислоты состоят из компонентов, называемых нуклеотидами.
Каж­дый нуклеотид содержит

азотистое основание, моносахариды, фосфорную кисло­ту.
Нуклеотиды образуют полинуклеотидную цепь.
Нуклеиновые

кислоты (ДНК) могут быть одно- и двухцепочечные.
ДНК, за редким исключением, двухцепочечные. РНК, за редким исключением, одноцецочечные.
При этом азотистые ос­нования располагаются внутри спирали.
С помощью водородных связей они об­разуют специфические пары
А-Т, Г-Ц - ДНК
А-У, Г-Ц – РНК

Нуклеиновые кислоты состоят из компонентов, называемых нуклеотидами. Каж­дый нуклеотид содержит азотистое основание, моносахариды, фосфорную кисло­ту. Нуклеотиды образуют

Слайд 4Важнейшая функция РНК - участие в процессе синтеза белков в

клетке,
ДНК - определение специфичности и передача единиц наследственности.
РНК

-информационная (несет информацию ДНК о первичной структуре белка), транспортная (транспортирует аминокислоты в рибосомы), рибосомная (образу­ет рибосомы, собирает белки), ядерная (4-10% от общей).
Подавляющая часть ДНК сосредоточена в ядре, в цитоплазме эукариот содержится менее 1 % всей ДНК клетки.
ДНК эукариот почти вся находится в хромосомах ядер, лишь не­большое ее количество содержится в митохондриях, а у растений и в плазмидах.
Важнейшая функция РНК - участие в процессе синтеза белков в клетке, ДНК - определение специфичности и передача

Слайд 6Каждая хромосома состоит из цен­тральной нити (хромонемы), вдоль которой расположены

четкообразные струк­туры (хромомеры).
Число хромосом колеблется от одной до 100,

чаще 10-50.
У эукариот хромосомы всегда парные, по две каждого сорта.
Наследственными факторами или единицами наследственности у живых организмов являются гены, которые лежат в хромосомах в линейном порядке. Число генов в одной клетке человека находится в пределах между 5 и 125 тысячами.
Каждая хромосома состоит из цен­тральной нити (хромонемы), вдоль которой расположены четкообразные струк­туры (хромомеры). Число хромосом колеблется от

Слайд 7Бактерии содержат по одной хромосоме в форме замкнутой в виде

кольца нити, состоящей из двухцепочной ДНК и не имеющей ядерной

оболочки.
В цитоплазме многих бактерий кроме хромосомной ДНК содержатся добавочные маленькие кольца ДНК, при­сутствие которых необязательно. Они получили название плазмид
Бактерии содержат по одной хромосоме в форме замкнутой в виде кольца нити, состоящей из двухцепочной ДНК и

Слайд 8. Плазмиды не­сут информацию для 2-200 белков.
Плазмидная ДНК составляет

1-15% от хромо­сомной ДНК бактерий.
Плазмиды способны автономно размножаться и

стабиль­но наследуются.
Некоторые плазмиды способны включаться в хромосому бактерий.
В одной клетке бактерий мелких плазмид - несколько десятков, крупных -одна или две.
. Плазмиды не­сут информацию для 2-200 белков. Плазмидная ДНК составляет 1-15% от хромо­сомной ДНК бактерий. Плазмиды способны

Слайд 10Генная инженерия бактерий
Генетическая рекомбинация заключается в обмене генами между двумя

хромосомами.
Обмен генами и введение в клетку гена, принадлежащего другому

виду, можно осуществить посредством генетической рекомбинации
Генная инженерия бактерий Генетическая рекомбинация заключается в обмене генами между двумя хромосомами. Обмен генами и введение в

Слайд 11Рекомбинация происходит в результате физического разрыва в хромосомах (М) и

(F) и их последующего соединения с образованием двух новых хромосом

(C1 and C2)
Рекомбинация происходит в результате физического разрыва в хромосомах (М) и (F) и их последующего соединения с образованием

Слайд 12Выделение фрагментов ДНК в хромосомах, несущих гены с необхо­димыми свойствами,

производят с помощью вырабатываемых клетками бактерий ферментов рестрикции (рестриктаз).
Рестриктазы

распознают в ДНК специфичные для них участки длиной в 4-6 пар нуклеотидов и разрезают обе цепи ДНК посередине этих участков или с некоторым смещением.
В первом случае образуются обрывки с ровными (тупы­ми) концами, во втором - стороны оборванных цепочек ДНК чуть-чуть заходят одна за другую. Такие концы называются липкими, они могут слипаться между собой в силу комплиментарности.

Выделение фрагментов ДНК в хромосомах, несущих гены с необхо­димыми свойствами, производят с помощью вырабатываемых клетками бактерий ферментов

Слайд 14Скрепить липкие концы помогает ДНК-лигаза, сшивающая фосфодиэфирные связи.
Для кодирования среднего

белка из 400 аминокислот нужен участок ДНК длиной 1200 пар

нуклеотидов.
В России и за рубежом из различных бактерий выделено несколько сотен рестриктаз, разрезающих ДНК в строго определенных местах, там, где фермент прикреплялся.
При этом было установлено, что концы фрагментов ДНК, полу­ченные с помощью обработки хромосом одной и той же рестриктазой, способны слипаться между собой в силу комплиментарности.
Скрепить липкие концы помогает ДНК-лигаза, сшивающая фосфодиэфирные связи.Для кодирования среднего белка из 400 аминокислот нужен участок ДНК

Слайд 16Две совершенно не схожие между собой последовательности ДНК (например, слона

и лягушки) образуют одинаковые липкие концы, если эти ДНК обработать

одной и той же рестрикта­зой.
Две совершенно не схожие между собой последовательности ДНК (например, слона и лягушки) образуют одинаковые липкие концы, если

Слайд 17. Это дало возможность получать фрагменты ДНК, содержащие желаемые гены.


Участки ДНК, разрезаемые рестриктазами, несложно разделить с помощью электрофореза. ДНК,

обработанную рестриктазой, вводят в гель агарозы, помещенной в электрическое поле.
Под действием электрического поля фрагменты ДНК начинают перемещаться в пористом геле.
. Это дало возможность получать фрагменты ДНК, содержащие желаемые гены. Участки ДНК, разрезаемые рестриктазами, несложно разделить с

Слайд 18ДНК, обрабатываемая ДНК-лигазой

ДНК, обрабатываемая ДНК-лигазой

Слайд 20Короткие фрагменты движутся быстрее, чем длинные, они отделяются друг от

друга, не повреждаются и не утрачивают биологических свойств.
Скрепить сце­пившиеся

липкие концы фрагментов разных ДНК помогает фермент ДНК-лигаза.
Она сшивает фрагменты с образованием полной структуры двойной спи­рали ДНК.
Короткие фрагменты движутся быстрее, чем длинные, они отделяются друг от друга, не повреждаются и не утрачивают биологических

Слайд 21Следующей задачей было создание функционально активных, способных реплицироваться гибридных ДНК.


С этой целью интересующий фрагмент ДНК включают в состав вектора,

с помощью которого он может быть размножен.
Век­тор - это молекула ДНК, способная переносить в клетку чужеродную ДНК любо­го происхождения и обеспечивать там ее размножение.
Клетки, в которые вектор переносит вшитый в него ген, получили название реципиентов.

Следующей задачей было создание функционально активных, способных реплицироваться гибридных ДНК. С этой целью интересующий фрагмент ДНК включают

Слайд 23Фаговые векторы тоже обладают рядом преимуществ.
Они могут включать в

себя более крупные (более длинные) клонируемые фрагменты ДНК по сравнению

с плазмидными векторами.
Перенос фагами клонируемого фрагмента в клетки в результате инфицирования ими последних является более эффективным, чем трансформация ДНК.
Фаговые векторы позволяют более эффективный скрининг (распознание) на поверхности агара колоний, содержащих клетки, несущие клонируемый ген.

Фаговые векторы тоже обладают рядом преимуществ. Они могут включать в себя более крупные (более длинные) клонируемые фрагменты

Слайд 24Главное свойство плазмид состоит в их способности реплицироваться независимо от

хромосомы. По размеру ДНК плазмиды в 100 раз меньше ДНК

бактериальной хромосомы. В плазмиде таких размеров все же может разместиться до сотни ге­нов.
Плазмиды повышают устойчивость бактерий к внешним факторам, защищают их от неблагоприятных воздействий.

Главное свойство плазмид состоит в их способности реплицироваться независимо от хромосомы. По размеру ДНК плазмиды в 100

Слайд 25Выяснилось, что многие мелкие плазмиды содержат по одному участку для

нескольких рестриктаз.
Каждая такая рестриктаза разрежет кольцо плазмидной ДНК и

переведет ее в линейное состояние.
Первая такая плазмида была открыта английским ученым Стэнли Коуэном в 1974 г., которую он назвал своим именем. Она само­стоятельно размножается. Концы ее способны слипаться между собой или с лю­быми фрагментами другой ДНК, получаемыми под действием той же рестриктазы. Несет ген устойчивости к тетрациклину и легко обнаруживается при выращи­вании на среде с антибиотиком.

Выяснилось, что многие мелкие плазмиды содержат по одному участку для нескольких рестриктаз. Каждая такая рестриктаза разрежет кольцо

Слайд 26Следующая проблема - заставить клетку воспринять рекомбинантную ДНК.
Объектом первых

опытов по генной инженерии была избрана кишечная палочка Е.сoli. Клетки

кишечной палочки выдерживают на холоде в растворе кальция, затем подвергают «тепловому шоку». После этого клеточная мембрана становится проницаемой для поступления извне молекул ДНК.
В плазмиду была включена группа генов из хромосомы Е.сoli, ответственных за синтез аминокис­лоты триптофана. Когда в клетки Е.сoli ввели гибридную ДНК, они стали выра­батывать столько ферментов, участвующих в биосинтезе этой аминокислоты, что бактерии превратились в фабрику по производству триптофана.

Следующая проблема - заставить клетку воспринять рекомбинантную ДНК. Объектом первых опытов по генной инженерии была избрана кишечная

Слайд 27Помимо плазмид, в качестве векторов стали использовать и ДНК вирусов,

размножающихся в клетках бактерий.
Клетка, получившая гибрид­ную ДНК, размножившись, образует

клон.
Это открыло путь для производства различных белков, лекарственных препаратов, гормонов, путем искусственного синтеза их генов и вставки их в клетки с помощью плазмид. Важнейший из них - инсулин, получаемый из поджелудочной железы свиней.

Помимо плазмид, в качестве векторов стали использовать и ДНК вирусов, размножающихся в клетках бактерий. Клетка, получившая гибрид­ную

Слайд 28Генная инженерия растений
Как ввести интересующие нас гены в растительную клетку,

тем самым получить растения с необходимыми признаками и свойствами?

Генная инженерия растений Как ввести интересующие нас гены в растительную клетку, тем самым получить растения с необходимыми

Слайд 29С этой целью были использованы клетки корончатых галлов - опу­холей

растений, образующихся на прикорневой части стебля у корневой шейки (отсюда

название - корончатый), на подземных (яблоня) и надземных (виноград) частях растений, у прививок в месте стыка привоя с подвоем. Корончатые галлы - настоящая злокачественная опухоль.
С этой целью были использованы клетки корончатых галлов - опу­холей растений, образующихся на прикорневой части стебля у

Слайд 30Их клетки способны распространяться по растению от первичного очага и

давать начало вторичным опухолям - метаста­зам.
Болезнь поражает свыше 600

видов преимущественно двудольных растений.
Возбудителем болезни оказалась бактерия, выделенная из опухоли винограда в 1897 г. – Аgrobacterium tumefaciens (Pseudomonadaceae).
Их клетки способны распространяться по растению от первичного очага и давать начало вторичным опухолям - метаста­зам. Болезнь

Слайд 32Если этой бактерией, часто встречающейся в ризосфере, заразить здоровое, не

пораненное растение, то в области раны разовьется типичный корончатый галл.


Опухолевые клетки рас­тут в культуре быстро, без добавления фитогормонов. Для возникновения опухо­ли достаточно кратковременного контакта с бактерией, само ее развитие проис­ходит в отсутствии бактерии.
Под воздействием бактерии нормальные клетки превращаются в опухолевые, но как это происходит, долго не удавалось выяс­нить.
Если этой бактерией, часто встречающейся в ризосфере, заразить здоровое, не пораненное растение, то в области раны разовьется

Слайд 33В 1974 г. было установлено, что патогенные штаммы агробактерии содер­жат

крупную плазмиду (150-200 тыс. пар нуклеотидов), отсутствующую у бакте­рий патогенных

штаммов.
Теряют плазмиду при температуре более 30°С.
Фактор, вызывающий образование опухоли, связан у агробактерии с крупными плазмидами
В 1974 г. было установлено, что патогенные штаммы агробактерии содер­жат крупную плазмиду (150-200 тыс. пар нуклеотидов), отсутствующую

Слайд 34В индуцированных с помощью плазмид опухолях проис­ходит синтез опинов (производных

аминокислот, в частности аргинина), исполь­зующихся бактериями для питания.
Этот механизм

осуществляется посредством переноса плазмидных генов, ответственных за синтез опинов, от бактерий к рас­тениям и их последующее существование и проявление в растении без бактерий.
Эти гены были выявлены в плазмидах и в опухолевых растительных клетках бак­терии.
В индуцированных с помощью плазмид опухолях проис­ходит синтез опинов (производных аминокислот, в частности аргинина), исполь­зующихся бактериями для

Слайд 35Попадая на ранку подходящего растения, начинают в течение двух часов

активно синтезировать целлюлозу, играющую роль связующего жгута.
Еще через 4

часа начинается перенос плазмиды из бактерии в клетки растения. Заканчива­ется он через 2 часа.
Теперь присутствие бактерий становится необязательным для развития опухолей.
Онкогены плазмиды встраиваются в растительное ядро, что ведет к опухолевой трансформации клетки.
Встраивание происходит с помо­щью обратного действия матричной РНК. Плазмидные онкогены кодируют также синтез фитогормонов (ауксинов, цитокининов), способствующих росту и деле­нию опухолевых клеток.

Попадая на ранку подходящего растения, начинают в течение двух часов активно синтезировать целлюлозу, играющую роль связующего жгута.

Слайд 37Получение трансгенных растений

Новые гены вводят в растения с помощью

агробактерий.
Наиболее простой путь введения - заражение пораненных растений

с образованием корончатогалловых опухолей.
Однако опухолевые клетки не способны к регенерации растений.
При заражении растений некоторыми штам­мами агробактерий образуются тератомы - опухоли-уродцы, состоящие из смеси дифференцированных клеток, способных дать начало различным частям расте­ний.
Получение трансгенных растенийНовые гены вводят в растения с помощью   агробактерий. Наиболее простой путь введения -

Слайд 38Если этих уродцев привить к здоровому корню, то можно получить

нор­мальные растения с чужеродными генами, введенными через агробактерию.
Од­нако потомство

таких растений утрачивало новый признак.
Новый ген, введен­ный с онкогенами, не мог пройти через мейоз, что обусловлено защитой против опухолевых генов.
Повреждение онкогенов приводило к тому, что вставленные гены наследовались в потомстве клетки с освобожденными от онкогенов, но не­поврежденными участками ДНК.
Если этих уродцев привить к здоровому корню, то можно получить нор­мальные растения с чужеродными генами, введенными через

Слайд 39Участки с вставленным геном и генами опинов стали культивировать на

среде с добавлением фитогормонов, образованием каллуса и развитием растения.
Лишенная

онкогенов т-ДНК не мешает регенерации растительной клетки, способна пройти через мейоз и наследоваться в потомстве.
Для переноса генов с агробактериями их выдерживают некоторое время с прото­пластами растительных клеток.
Голые протопласты более проницаемы для круп­ных молекул, чем одетые клетки.
Кроме протопластов можно использовать мезофильные клетки листьев
Участки с вставленным геном и генами опинов стали культивировать на среде с добавлением фитогормонов, образованием каллуса и

Слайд 40Получение трансгенных животных.
Эксперименты показали, что культивируемые клетки высших животных

становятся носителями новых наследственных свойств и продуцируют новые для них

вещества.
Однако методы генетической инженерии для млекопитающих и особенно сельскохозяйственных животных пока слабо разработаны.
Одной из причин этого является то обстоятельство, что до сих пор не найдены эффективные и надежные векторы – плазмиды, которые могли бы вносить нужные гены в клетки животных
Получение трансгенных животных.  Эксперименты показали, что культивируемые клетки высших животных становятся носителями новых наследственных свойств и

Слайд 42Другой и, очевидно, главной причиной является глубокая дифференциация клеток у

высших животных.
Поскольку из соматических клеток высших животных получить целый

многоклеточный организм не представляется возможным, этот путь нельзя использовать для переноса генов в многоклеточное животное.
Новый подход для направленного изменения генома высших животных основан на введении в зиготу или ранний эмбрион клонированных эукариотических генов в составе бактериальных плазмид.
Животных, в геном которых интегрируют чужеродные гены, называют трансгенными.

Другой и, очевидно, главной причиной является глубокая дифференциация клеток у высших животных. Поскольку из соматических клеток высших

Обратная связь

Если не удалось найти и скачать доклад-презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое TheSlide.ru?

Это сайт презентации, докладов, проектов в PowerPoint. Здесь удобно  хранить и делиться своими презентациями с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика