Разделы презентаций


ИССЛЕДОВАНИЕ АКТИВНОСТИ АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ И АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ В

Содержание

АспартатаминотрансферазаАминотрансферазыАланинаминотрансфераза2

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1ИССЛЕДОВАНИЕ АКТИВНОСТИ АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ И АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ В КУЛЬТУРЕ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

ОТ РАЗНЫХ ДОНОРОВ
Выполнили: Корнилова И. А., 254 гр., 
Новосёлова А. Э.,

253 гр.,
Фомин Н. А., 254 гр., 
Крюков Э. Р.,  347 гр.

Научный руководитель: 
д.б.н., профессор Обухова Л. М.

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Приволжский исследовательский медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации


 Кафедра биохимии им. Г. Я. Городисской

г. Нижний Новгород, Россия

ИССЛЕДОВАНИЕ АКТИВНОСТИ АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ И АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ В КУЛЬТУРЕ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ОТ РАЗНЫХ ДОНОРОВВыполнили: Корнилова И. А., 254

Слайд 2Аспартатаминотрансфераза
Аминотрансферазы
Аланинаминотрансфераза
2

АспартатаминотрансферазаАминотрансферазыАланинаминотрансфераза2

Слайд 3
Цель работы:
Сравнительный анализ активности аминотрансфераз в культуре мезенхимальных стволовых клеток,

полученных от разных доноров. 
3

Цель работы:Сравнительный анализ активности аминотрансфераз в культуре мезенхимальных стволовых клеток, полученных от разных доноров. 3

Слайд 4Материалы
Материалы предоставлены научной лабораторией регенеративной медицины НИИ экспериментальной онкологии и

биомедицинских технологий.
Клеточные лизаты культивированных мезенхимальных стволовых клеток, выделенных из жировой

ткани (МСК-ЖТ) двух доноров.

4

Донор №1 европейка
26 лет
Донор №2 европейка
27 лет

МСК культивировали в среде ά-МЕМ с добавлением антибиотиков (пенициллин/
стрептомицин), глутамина и 15% эмбриональной телячьей сыворотки





Культивирование проходило во флаконах «Costar» во влажной атмосфере при 5% СО2, температуре 37°С.

Клетки снимали с поверхности пластика с помощью 0,25% раствора трипсина в версене.

Использовали клетки 3-4 пассажа. Их центрифугировали при 100g в течение 5 минут. Надосадочную жидкость сливали, а осажденную клеточную суспензию лизировали с помощью 3-кратных циклов замораживании и быстрого размораживания.

МатериалыМатериалы предоставлены научной лабораторией регенеративной медицины НИИ экспериментальной онкологии и биомедицинских технологий.Клеточные лизаты культивированных мезенхимальных стволовых клеток,

Слайд 55
Эмбриональное развитие, 
пролиферация во время нейрогенеза (Rybko V.A. et al.,2011)
Эмбриональное развитие, пролиферация

и миграция клеток, канцерогенез (Tatarskiy V. V., 2016)
Эмбриональное развитие, регенерация тканей, 

пролиферативная активность (Cherepanov S. A. et al., 2015)

Notch

 Сигнальные пути

Sonic Hedgehog/
Patched


Wnt/β–катенин

5Эмбриональное развитие, пролиферация во время нейрогенеза (Rybko V.A. et al.,2011)Эмбриональное развитие, пролиферация и миграция клеток, канцерогенез (Tatarskiy V. V., 2016)Эмбриональное

Слайд 6Белок определяли набором «Белок по Лоури-200-СПб». 
Использовались базы данных String, UniProt, языка

программирования R в RStudio 3.5.1 с дополнительными пакетами ggplot2, tidyverse,

hrbrthemes, viridis.

Фотометрические

Методы

Биоинформационный анализ

6

АcАт и АлАт определялась при помощи наборов реагентов DiaSys (Германия) с использованием спектрофотометра UV-mini-1240, Shimadzu (длина волны - 340 нм).

Принцип метода: Активность аминотрансфераз определяется по скорости уменьшения NADH, оптическая плотность которого измеряется при 340 нм (в реакции с участием лактатдегидрогеназы)

Белок определяли набором «Белок по Лоури-200-СПб». Использовались базы данных String, UniProt, языка программирования R в RStudio 3.5.1 с дополнительными

Слайд 77
Донор 1
Донор 2
Активность АлАт, Е/л/кл.
Донор 1
Донор 2
Активность АлАт, Е/л/г. белка
Результаты

собственных исследований

7Донор 1Донор 2Активность АлАт, Е/л/кл.Донор 1Донор 2Активность АлАт, Е/л/г. белкаРезультаты собственных исследований

Слайд 88
Донор 1
Донор 2
Активность АсАт, Е/л/кл.
Донор 1
Донор 2
Активность АсАт, Е/л/г. белка
Результаты

собственных исследований

8Донор 1Донор 2Активность АсАт, Е/л/кл.Донор 1Донор 2Активность АсАт, Е/л/г. белкаРезультаты собственных исследований

Слайд 9Донор 2
Донор 1
9
Скорость удвоения МСК, ч.
Данные предоставлены Алейник Д. Я.

Ст.н.с. лаборатории регенеративной медицины НИИ ЭОиБИТ

Донор 2Донор 19Скорость удвоения МСК, ч.Данные предоставлены Алейник Д. Я. Ст.н.с. лаборатории регенеративной медицины НИИ ЭОиБИТ

Слайд 1010
Белок-белковые взаимодействия АсАт (GOT-1)
Карбамоилфосфат-
синтетаза II
Аспартаттрас-
карбомилаза
Дигидрооротаза
Начальный этап синтеза пиримидина (Raushel F. M.

et al., 1998)

10Белок-белковые взаимодействия АсАт (GOT-1)Карбамоилфосфат-синтетаза IIАспартаттрас-карбомилазаДигидрооротазаНачальный этап синтеза пиримидина (Raushel F. M. et al., 1998)

Слайд 1111
Центральная роль аспартатаминотрансферазы
AsAt

11Центральная роль аспартатаминотрансферазыAsAt

Слайд 1212
Белок-белковые взаимодействия АлАт (GPT)
Глюкозо-аланиновый цикл (Karmen A. et al., 1955)

12Белок-белковые взаимодействия АлАт (GPT)Глюкозо-аланиновый цикл (Karmen A. et al., 1955)

Слайд 13
Вывод: 
Использование методов биохимического и биоинформационного анализа не позволило выявить взаимосвязь

активности аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы с пролиферативной активностью мезенхимальных стволовых клеток.

Вероятнее всего, участие данных аминотрансфераз в клеточном делении ограничивается их метаболической функцией.

13

Вывод: Использование методов биохимического и биоинформационного анализа не позволило выявить взаимосвязь активности аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы с пролиферативной активностью

Слайд 1414
Спасибо за внимание!

14Спасибо за внимание!

Слайд 15Список литературы:
15
1.Salomone F. et al. Efficacy of adipose tissue-mesenchymal stem

cell transplantation in rats with acetaminophen liver injury //Stem Cell

Research. – 2013. – Т. 11. – №. 3. – С. 1037-1044.
2. Zare H. et al. Bone marrow or adipose tissue mesenchymal stem cells: comparison of the therapeutic potentials in mice model of acute liver failure //Journal of cellular biochemistry. – 2018. – Т. 119. – №. 7. – С. 5834-5842.
3. del Caño-Ochoa F., Moreno-Morcillo M., Ramón-Maiques S. CAD, A Multienzymatic Protein at the Head of de Novo Pyrimidine Biosynthesis //Macromolecular Protein Complexes II: Structure and Function. – Springer, Cham, 2019. – С. 505-538.
4. Sato T. et al. Rheb protein binds CAD (carbamoyl-phosphate synthetase 2, aspartate transcarbamoylase, and dihydroorotase) protein in a GTP-and effector domain-dependent manner and influences its cellular localization and carbamoyl-phosphate synthetase (CPSase) activity //Journal of Biological Chemistry. – 2015. – Т. 290. – №. 2. – С. 1096-1105.
5. Rybko V.A., Kopnin B.P., Khromova N.V. et al. Role of Notch signaling in tumorigenesis: multiple mechanisms and therapeutic potential. Klinicheskaya onkogematologiya -Clinical Oncohematology 2011;4(2):103–10. 
6. MacDonald B.T., He X. Frizzled and LRP5/6 receptors for Wnt/-сatenin signaling. Cold Spring Harb Perspect Biol 2012;4(12).
7. Cherepanov S. A. et al. Hedgehog signaling in the pathogenesis of neuro-oncology diseases //Biomeditsinskaya khimiya. – 2015. – V. 61. – №. 3. – P. 332-342.
8. Tatarskiy V. V. The Wnt signaling pathway: prospects for pharmacological regulation //Advances in molecular oncology. – 2016. – Т. 3. – №. 1. – С. 28-31.
Список литературы:151.Salomone F. et al. Efficacy of adipose tissue-mesenchymal stem cell transplantation in rats with acetaminophen liver

Слайд 16Эмиль Крюков
347 группа
Ирина
Корнилова
254 группа
Лариса
Обухова
д. б. н.,
профессор
Анастасия
Новосёлова
253 группа
Никита
Фомин
254 группа
Над исследованием

работали:

Эмиль Крюков347 группаИринаКорнилова254 группаЛарисаОбуховад. б. н., профессорАнастасияНовосёлова253 группаНикитаФомин254 группаНад исследованием работали:

Обратная связь

Если не удалось найти и скачать доклад-презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое TheSlide.ru?

Это сайт презентации, докладов, проектов в PowerPoint. Здесь удобно  хранить и делиться своими презентациями с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика