Слайд 1Основные ферменты в медецине: ЛДГ, ЩФ КФК.
Доклад подготовила студента 2
курса 35 группы медицинского факультета №2
Шупик Августина
Слайд 2Исследование содержания ферментов в биологических жидкостях применяется в клинической практике
для диагностики и мониторинга различных заболеваний
Слайд 3Ферменты участвуют во всех биохимических процессах организма, и нарушение метаболизма,
вызванное заболеванием, приводит к изменению концентрации соответствующих ферментов в биологических
жидкостях.Из-за низкого содержания ферменов в сыворотке крови их концентрацию трудно достоверно определить доступными в КДЛ методами, поэтому определяют их активность, т.к. она прямо пропорциональна концентрации фермента в биологической жидкости.
Слайд 4Креатинкиназа и ее МВ-фракция
Креатинкиназа (КК), или креатинфосфокиназа (КФК), катализирует обратимый
перенос остатка фосфорной кислоты с АТФ на креатин с образованием
АДФ и креатинфосфата. КК представляет собой димер, состоящий из двух субъединиц М и В. Комбинация их в димерную структуру приводит к образованию трех изоферментов КК: КК-ММ,КК-ВВ, КК-МВ, локализованных в скелетных мышцах,клетках мозга и сердечной мышце, соответственно.
Слайд 5Креатинкиназа и ее мв-фракция
Стабильность в сыворотке крови: при
2-8°С -7
сут., при -20°С -1 мес.
Для определения активности КК и ее
МВ-фракции используют кинетический УФ-метод на основе сопряженных реакций, катализируемых гексокиназой и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназой, по рекомендации IFCC. В сыворотке крови КК нестабильна, ее активность восстанавливают при помощи N-ацетилцистеина (NAC), который входит в состав набора.
Слайд 6Креатинкиназа и ее мф-фракция
При определении МВ-фракции блокируют активность М-субъединиц при
помощи специфических антител и определяют активность только В-субъединицы КК. Поскольку
фракция КК-ВВ в сыворотке крови практически отсутствует, всю обнаруживаемую активность В-субъединицы относят на счет активности МВ-изофермента.
Показания к назначению анализа: инфаркт миокарда (диагностика и мониторинг), заболевания скелетных мышц, травматическое поражения, гипотериоз.
Слайд 7 Лактатдегидрогеназа
Лактатдегирогеназа (ЛДГ)- фермент, обратимо катализирующий окисление
L-лактата в пировиноградную кислоту. ЛДГ широко распространена в организме человека
и содержится практически во всех тканях. Активность ЛДГ в сыворотке крови возрастает у больных, страдающих анемией, обширным карциноматозом, опухолями, лейкозами, лимфомой, гепатитами, циррозом печени, различными заболеваниями почек, инфарктом миокарда и заболеваниями легких.
Слайд 8 лактатдегидрогеназа
В сыворотке крови ЛДГ представлена пятью изоферментами. При
поражении сердечной мышци, в которой в большом количестве содержится изофермент
ЛДГ-1 (альфа-ГБДГ-альфа-гидроксибутиратдегидрогеназа), в сыворотке крови возрастает активность именно этого кардиоспецифичного изофермента.
Слайд 9 лактатдегидрогеназа
В отличие от остальных зоферментов, ЛДГ-1 кроме пирувата
и L-лактата может использовать в качестве субстрата альфа-оксобутират, превращая его
в альфа-гидроксибутират. Принцип метода определения активности альфа-ГБДГ в сыворотке крови основан на гидроксилировании альфа-оксобутирата и одновременном окислении НАДН.
Стабильность в сыворотке крови: ЛДГ при 2-8°С – 4 сут., при -20°С - не хранится, альфа-ГБДГ при 2-8°С – 7 сут., при -20 – 10 сут.
Слайд 10 Щелочная фосфатаза
Щелочная фосфатаза (ЩФ) – фермент, катализирующий гидролиз
эфиров ортофосфорной кислоты, при щелочном значении рН (8,6-10,1). ЩФ присутствует
в мембранах клеток многих тканей, но самая высокая ее концентрация отмечается в остеобластах, клетках печени, плаценте, почечных канальцах и эпителиальных клетках кишечника.
Слайд 11 Щелочная фосфотаза
Физиологическое увеличение активности ЩФ в сыворотке
крови происходит при росте костей в детстве, при беременности. Патологическое
повышение связано в основном с заболеваниями костей и печени (обструкцией желчных протоков).
Слайд 12 Щелочная фосфатаза
В основе определения активности ЩФ лежит
мет од Бессея-Лоури-Брокка: гидролиз ферментов п-нитрофенилфосфата с образованием п-нитрофенола, имеющего
желтую окраску в щелочной среде. Максимальную скорость гидролиза п-нитрофенилфосфата обеспечивает диэтаноламиновый буфер (метод DGKC).