ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 3

в бактериологической практике.
3. Изучение свойств «чистой» патогенной культуры.

до начала лечения больного производить проверку чувствительности его патогенной микрофлоры

к антибиотикам.
Это исследование дает возможность установить, какие АБ оказывают самое эффективное бактерицидное или бактериостатическое действие на м.о. в очаге инфекции, тем более, что в последние годы появились виды микробов устойчивые к различным АБ.
Существуют различные способы определения чувствительности бактерий к АБ, чаще всего используется «метод дисков». Для испытания чувствительности надо:

агар ,в чашку Петри «газоном» при помощи шпателя Дригальского.
На поверхность

засеянного агара пинцетом разместить диски, пропитанные раствором различных антибиотиков (диски фабричного изготовления находятся во флаколнах, могут быть различных цветов);
Диски необходимо расположить на расстоянии 2 см. друг от друга от края чашки и слегка прижать к среде пинцетом;
Обозначить на чашке цифрами номера дисков и записать соответствующее название антибиотиков;
Засеянные чашки с нанесенными дисками поместить в термостат при t=370С на 1 сутки.
 
 
 
 
 
 
 
1
3

вокруг диска.
Диаметр зон задержки роста измеряют линейкой в мм,

включая диаметр диска.
Оценка результатов проводится по специальным таблицам (для каждого вида антибиотика), в них указывается значение диаметров зон задержки роста для устойчивых, умеренно устойчивых и чувствительных видов м.о.
В среднем это:
чувствительные –D> 10 мм.
умеренно чувствительные- D< 10 мм.
устойчивые- нет зоны отсутствия роста. - данные АБ не действуют на микробов, не убивают их.

160 Со 2,5ч; 180 Со 1ч; 200 Со 30 мин.
б)

паровой стерилизатор (автоклав) Р=1,1 ат 120 Со 45 мин ( для полимеров и резины); Р=2,2 ат 135 Со 20 мин.(металлические изделия, ткани).
в) гласперленовый стерилизатор( шарики из кварца )
180 Со -230С, в течение 15 мин.
г) тиндализация (дробная стерилизация) 60Со, по 1 часу в течение 5 дней ( витамины, сыворотки).
д) пастеризация (уничтожение бесспоровых м.о.) 70 Со, 1час.
е) фламбирование (стерилизация в пламени бак.петлей, шпателей, пипеток).
ж) кипячение 100 Со 30-60 мин. (не надежный, устаревший способ).

2. Действием УФ-лучей (бактерицидные лампы), рентгеновские лучи.

3. Использованием бактериологических фильтров – механическая стерилизация. Освобождение жидкостей от бактерий, грибов, простейших, вирусов (в зависимости от размеров пор фильтра). Фильтры бывают керамические, асбестовые, мембранные. Это фильтры Зейтца, Шамберлана и др. Пример: стерилизация сыворотки крови

озон ,формалин, формальдегид) 50-80 Со. Проводят в специальных камерах.
2. Действие

дезинфицирующих растворов (лизоформин-3000; если 2% р-р – 15 мин. дезинфекция; если 8% р-р – 1час стерилизация, время по инструкции).
3. Действие веществ антисептиков (6% р-р перекиси водорода, вещество первомур).
 
III.Биологическая
 
1. Действие антибиотиков.
2. Действие бактериофагов.
 

используются различные дезин-фицирующие вещества: 3-5%растворы фенола, р-ры лизола (фенол с

добавлением зеленого мыла), 1-5% растворы хлорамина (устаревшее средство), 2-3% раствор соды, 70% этиловый спирт, р-р део-хлора, р-р дюльбака и другие средства.

Отработанный материал перед тем, как удалить его в канализацию, автоклавируется или засыпается сухой хлорной известью на несколько часов.

Загрязненные предметные стекла, пипетки, шпатели опускают в различные дез.средства (время и концентрация – по инструкции). Столы после работы лаборант протирает дез.средством, руки моют мылом (двойное намыливание) или протирают 70% этиловым спиртом.

Воздух в лаборатории наиболее просто дезинфицировать проветриванием (не менее 30-60 минут). Более эффективный способ дезинфекции воздуха — облучение УФ-лучами с длиной волны от 200 до 400 нм. Эти лучи могут вызывать гибель не только вегетативных клеток, но и спор микроорганизмов. Бактерицидные лампы устанавливают над рабочим местом лаборанта, в моечных помещениях.

посев патогенного материала от больного на питательные среды (возможно использование

сред накопления)

2 день : изучение культуральных свойств «подозрительных» колоний и их пересев на специальные среды для выращивания «чистой» патогенной культуры

– посев «уколом»;
проведение серологических реакций;
заражение лабораторных животных;
изучение на средах ДДС

биохимических (ферментативных) свойств выделеных микробов;
определение чувствительности микробов к антибиотикам.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ