Современные лабораторные технологии в трансплантологии

и иммунологии ГомГМУ
профессор Новикова И.А.

совершенствование иммунодепрессантов
Разработка технологий иммунологического тестирования
Радиация, азатиоприн, преднизолон
Открытие генов гистосовместимости (1950)
Применение

тканевого типирования

Определение реактивных АТ, cross-matсh тестов

Циклоспорин А (1978)

Такролимус, микофенолаты, МАТ

изотрансплантация (от генетически идентичного организма)
Аллогенный трансплантат – аллотрансплантация (от генетически

различающегося индивидуума в пределах вида)
Ксеногенный трансплантат – ксенотрансплантация, гетерологичная трансплантация (от другого вида)

органа
Возможность применения менее агрессивного супрессивного режима
Больше времени персоналу для

подготовки к операции
Недостатки:
Ограниченный выбор органов
Психологический стресс донора
Оперативная летальность донора (~1/2000)
Послеоперационные осложнения (~ 2%)
Отдаленные последствия (умеренная гипертензия и протеинурия)
Риск травматического повреждения второй почки
Риск скрытопротекающей почечной патологии

Трупный материал

обнаруживает чужеродные АГ трансплантата
– запуск атаки, приводящей к отторжению трансплантата

сосудов, клетки крови) → фиксация на эндотелии → активация комплемента

и системы свертывания → окклюзия сосудов и гибель трансплантата.
2. Острое отторжение (первые 4 недели)
Различия по HLA (на фоне недостаточной иммуносупрессии!) → активация клеточных механизмов (CD4, CD8, NK, макрофаги), индукция синтеза специфических АТ → деструкция трансплантата.
3. Хроническое отторжение (месяцы-годы)
Хронический иммунный процесс? → смешанные гуморальные и клеточные механизмы.

пациента, в ранний период после пересадки, а затем в зависимости

от состояния пациента (постоянный клинико-лабораторный мониторинг!)
Большинство препаратов обладают неспецифическим действием.
Основные побочные проявления
Инфекции
Злокачественные опухоли
Угнетение костного мозга

препараты:
– Циклоспорин A
– FK506 - такролимус /PROGRAF/
– Сиролимус
– CELLCEPT (micophenolate

mofetil)
Моноклональные антитела:
Anti CD3
Anti-TAC (anti-IL2 receptor) - даклизумаб
Anti-CD4
Anti-CD52 (Campath)
Anti-LFA1 + anti-ICAM-1 (в эксперименте)
Anti-cytokine (IL-2, TNFα, IFNγ)

–

HLA (тканевое типирование)
Минимальная сенсибилизация потенциального реципиента (панель реактивных антител). У

всех реципиентов на «листе ожидания» должны быть сведения о проценте и специфичности PRA.
Отсутствие реакции донор-реципиент в тестах перекрестной антигенной совместимости (cross-matсh)

к HLA-антигенам (панель реактивных антител)

Тест на совместимость донора и реципиента

(crossmatch)

человека – HLA human leucocyte antigens) – это комплекс генов,

которые сами по себе и через кодируемые ими продукты обеспечивают контроль иммунного ответа и реакции отторжения при трансплантации.
У всех клеток конкретного человека система HLA тождественна и строго индивидуальна.
HLA «иммунный паспорт индивида»

«паспорт»)
Методы:
Микролимфоцитотоксический тест (CDC-тест)
Анализ ДНК

HLA -антигенов
Должны быть использованы живые лимфоциты обязательно в день взятия
Тест

не применим у пациентов с малым количеством лимфоцитов и подавленной лимфоцитарной активностью

—
HLA-A > HLA-B > HLA-DR > HLA-С
При

трансплантации КМ —
HLA-DR > HLA-А > HLA-В > HLA-С

антител

Тест на совместимость донора и реципиента (crossmatching)

- беременность
- предшествующие трансплантации
-

инфекции
Обусловливают сверхострое отторжение
Определение анти HLA – антител у потенциальных реципиентов абсолютно необходимо!

панели реактивных АТ) у потенциального реципиента.
Пациенты с высоким % PRA

(80-100%) имеют высокую вероятность позитивной crossmatch (высокий риск ранней потери трансплантата).
PRA = 0% не исключает реакций отторжения
Рекомендуется проводить с периодичностью не менее 1 раз в 3 месяца у реципиентов на «листе ожидания».
При трансплантации солидных органов результаты PRA более важны, чем совместимость по HLA

Недостатки: выявляет только комплемент-фиксирующие АТ
Ложноотрицательные результаты

(при низкой плотности АТ на клетках)
Ложно-положительные результаты в результате наличия не-HLA-АТ
Высокая вариабельность (лейкоциты случайных волонтеров)
Иммунохимические твердофазные тесты (ELISA)
Недостатки:
Ограниченное количество HLA
Неспособность выявлять не HLA -АТ
Проточная цитофлуориметрия (flow PRA)

анализ Т- и В клеток.
В перспективе отрицательный результат flow

PRA отменяет необходимость crossmatch
Используют для мониторинга сенсибилизации в посттрансплантациеонном периоде

антител

Тест на индивидуальную совместимость донора и реципиента (crossmatch)

трансплантация не целесообразна
При отрицательном результате CDC, но положительном flow –

трансплантация не целесообразна у пациентов высокого риска. Может быть проведена на фоне усиленной иммуносупрессии (при ограниченной возможности выбора трансплантата)
Виртуальная crossmatch рассматривается как более чувствительная и специфичная для оценки трансплантационного риска