Разделы презентаций
- Разное
- Английский язык
- Астрономия
- Алгебра
- Биология
- География
- Геометрия
- Детские презентации
- Информатика
- История
- Литература
- Математика
- Медицина
- Менеджмент
- Музыка
- МХК
- Немецкий язык
- ОБЖ
- Обществознание
- Окружающий мир
- Педагогика
- Русский язык
- Технология
- Физика
- Философия
- Химия
- Шаблоны, картинки для презентаций
- Экология
- Экономика
- Юриспруденция
ТЕХНОЛОГИЯ РЕКОМБИНАции ДНК МОЛЕКУЛЯРНОЕ КЛОНИРОВАНИЕ или ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ
Содержание
- 1. ТЕХНОЛОГИЯ РЕКОМБИНАции ДНК МОЛЕКУЛЯРНОЕ КЛОНИРОВАНИЕ или ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ
- 2. Herbert Boyer Courtesy Genentech Stanley Cohen, Stanford
- 3. Общий принцип рекомбинации ДНК
- 4. ОСНОВНЫЕ СТАДИИ ТЕХНОЛОГИИ РЕКДНК в биотехнологическом производстве ЛС
- 5. Ферменты, используемые в технологии рекомбинации ДНКРЕСТРИЦИРУЮЩИЕ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ (рестриктазы) ДНК-лигаза БАКТЕРИОФАГА Т4
- 6. ТАТАТТGACТАССайт-промоторСайт-терминацииИНИЦИАЦИЯ ТРАНСКРИПЦИИ ТЕРМИНАЦИЯ ТРАНСКРИПЦИИ АТТ АТСПри молекулярном
- 7. Расщепление ДНК рестриказой EcoRI Образование «липких» концовEcoRIEcoRIгуанин
- 8. Рестриктазы и расщепляемые ими последовательности ДНКкрупнощепящаякрупнощепящаякрупнощепящаямелкощепящаямелкощепящая
- 9. Расщепление ДНК рестриказой Hind IIHind IIHind II«т
- 10. ФРАГМЕНТЫ ОБРАЗУЮЩИЕСЯ ПРИ РАСЩЕПЛЕНИИ ДНК РАЗНЫХ ОРГАНИЗМОВ РЕСТРИКТАЗОЙ BamHIФрагменты ДНК «слона»Фрагменты ДНК «лягушки»рекДНКрекДНК
- 11. Лигирование липких концов ДНК-лигазой Т4
- 12. Лигирование тупых концов ДНК-лигазой Т4
- 13. Расщепление молекул ДНК рестриктазой и соединение полученных фрагментов ДНК-лигазой.
- 14. Объединение разных молекул ДНК само по себе
- 15. КЛОНИРУЮЩИЕ ВЕКТОРЫVehicle – англ. , повозка , транспортное средство
- 16. Вектор (в технологии рекДНК)Это молекула ДНК,
- 17. Слайд 17
- 18. Плазмидные векторы
- 19. ПЛАЗМИДЫ
- 20. Плазмидный вектор pBR322 создатели - Боливар Ф., Родригес Р.
- 21. Технология рекомбинации ДНК с применением плазмидного вектораклеток E. Coli или др. реципиентов
- 22. ФРАГМЕНТЫ ОБРАЗОВАВШИЕСЯ ПРИ РАСЩЕПЛЕНИИ ДНК РАЗНЫХ ОРГАНИЗМОВ РЕСТРИКТАЗОЙ BamHIФрагменты ДНК плазмидыФрагменты донорной ДНК рекДНКрекДНК
- 23. Модификации плазмидных векторовДля всех рутинных процедур молекулярного
- 24. Векторы на основе бактериофага
- 25. Структура бактериофага λ Escherichia coli. Схема
- 26. Бактериофаг λ Escherichia coli «Портрет» электронномикроскопический
- 27. Инфицирование фагом λ клетки E.coliПосле адсорбции фага
- 28. После проникновения фага λ в клетку кишечной палочки возможны 2 сценария развития событий: лизис или лизогения
- 29. Скачать презентанцию
Herbert Boyer Courtesy Genentech Stanley Cohen, Stanford University professor Показали, что объединив генетические элементы из разных источников (организмов), можно создать новую реплицирующуся генетическую структуру с новыми свойствами.
Слайды и текст этой презентации
Слайд 5Ферменты, используемые в технологии рекомбинации ДНК
РЕСТРИЦИРУЮЩИЕ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ (рестриктазы)
ДНК-лигаза БАКТЕРИОФАГА
Слайд 6
ТАТА
ТТGAC
ТАС
Сайт-промотор
Сайт-терминации
ИНИЦИАЦИЯ
ТРАНСКРИПЦИИ
ТЕРМИНАЦИЯ
ТРАНСКРИПЦИИ
АТТ АТС
При молекулярном клонировании важно, чтобы
расщепление донорной и векторной ДНК происходило в строго определенных участках
ДНК (сайтах) с образованием дискретного и воспроизводимого набора нуклеотидов.Ген регуляции
Если разрез ДНК окажется внутри гена, то такой разрез приведет к его инактивации
Слайд 8Рестриктазы и расщепляемые ими последовательности ДНК
крупнощепящая
крупнощепящая
крупнощепящая
мелкощепящая
мелкощепящая
Слайд 10ФРАГМЕНТЫ ОБРАЗУЮЩИЕСЯ ПРИ РАСЩЕПЛЕНИИ ДНК РАЗНЫХ ОРГАНИЗМОВ РЕСТРИКТАЗОЙ BamHI
Фрагменты ДНК
«слона»
Фрагменты ДНК «лягушки»
рекДНК
рекДНК
Слайд 14
Объединение разных молекул ДНК само по себе бесполезно, если вновь
образованные рекДНК не будут реплицироваться в клетке-хозяине и экспрессироваться.
Для
доставки чужеродных генов в клетки различных организмов применяют ВЕКТОРЫ.Как полученные гибридные гены ввести в клетку и заставить там работать – производить белки?
Слайд 16Вектор (в технологии рекДНК)
Это молекула ДНК, способная самостоятельно реплицироваться
в клетках различных организмов и обеспечивать клонирование (размножение) и экспрессию
встроенного в нее искусственно какого-либо гена
Слайд 21Технология рекомбинации ДНК
с применением плазмидного вектора
клеток E. Coli или
др. реципиентов
Слайд 22ФРАГМЕНТЫ ОБРАЗОВАВШИЕСЯ ПРИ РАСЩЕПЛЕНИИ ДНК РАЗНЫХ ОРГАНИЗМОВ РЕСТРИКТАЗОЙ BamHI
Фрагменты ДНК
плазмиды
Фрагменты донорной ДНК
рекДНК
рекДНК
Слайд 23Модификации плазмидных векторов
Для всех рутинных процедур молекулярного клонирования широко используют
E.coli в качестве клетки-хозяина. Но часто могут выступать и другие
бактерии, например Bacillus subtilis. Клетки, способные воспринять чужеродную ДНК, называются компетентными.Часто в векторы, которые функционируют в кишечной палочке, встраивают второй сайт ORIGIN, который инициирует их репликацию в других клетках (не в кишечной палочке). Эти так называемые ЧЕЛНОЧНЫЕ ВЕКТОРЫ позволяют сначала проводить внедрение рекДНК в клетки кишечной палочки, а затем в клетки других бактерий.
Созданы плазмидные вектора, которые содержат универсальный сайт origin для широкого спектра хозяев. Их можно использовать для работы с разными микроорганизмами.
С помощью плазмидных векторов можно клонировать фрагменты ДНК длиной до 10 т.п.н. Однако часто приходится работать с более крупными фрагментами.
Слайд 27Инфицирование фагом λ клетки E.coli
После адсорбции фага на поверхности клетки
белковый отросток (чехол) сокращается, проталкивая стержень внутрь клетки. Через стержень
фаговая ДНК проникает внутрь клетки. Процесс облегчается благодаря местному повреждению клеточной стенки фаговым лизоцимом. Некоторые вирусы впрыскивают в клетку свою ДНК, другие проникают в нее сами.
Слайд 28
После проникновения фага λ в клетку кишечной палочки возможны 2
сценария развития событий: лизис или лизогения
