Слайд 1АНТИГЕНЫ КЛЕТОК КРОВИ
И.А.Новикова
Слайд 2Определение антигенов системы АВО:
При помощи стандартных изогемагглютинирующих
сывороток – в крови устанавливают наличие или отсутствие антигенов
А, В и делают вывод о групповой принадлежности.
Перекрестным способом – одновременно с помощью стандартных сывороток и стандартных эритроцитов. При этом устанавливают наличие агглютиногенов и агглютининов.
Использование моноклональных антител – ЦОЛИКЛОНов.
Слайд 3Оценка результатов определения группы крови при помощи изогемагглютинирующих сывороток
двух
серий каждой группы.
(+) наличие агглютинации,
(-) – отсутствие
Слайд 4Оценка результатов определения групп крови
АВО
перекрестным методом (а)
Слайд 5Оценка результатов определения групп крови
АВО
перекрестным методом
Слайд 6Оценка результатов определения групп крови
АВО
перекрестным методом
Слайд 7Наиболее частые причины ошибок
при определении групп крови:
Технические:
Недоброкачественные сыворотки или
эритроциты
Перепутывание проб с исследуемой кровью
Ошибочное расположение или ошибочный порядок нанесения
стандартных сывороток или эритроцитов
Нарушение соотношения сыворотка:эритроциты
Неоптимальный температурный режим (менее 150С – холодовая агглютинация, боле 250С – замедление агглютинации)
Несоблюдение времени реакции ( надо не менее 5 минут)
Недобавление физиологического раствора после 3 минуты
Неиспользование контрольной реакции с сывороткой группы IV
Взаимное перемешивание сывороток пипетками
Слайд 8Наиболее частые причины ошибок при определении групп крови:
Биологические вариации:
Наличие группы
А2 или А2В – дают мелкие, медленно появляющиеся агглютинаты. Реакция
может быть ошибочно учтена как отрицательная. Т.е. гр. А2 регистрируется как 1 или 3. Риск ошибки увеличивается при наслоении технических погрешностей.
Неспецифическая агглютинация исследуемых эритроцитов. Может наблюдаться при патологических состояниях с диспротеинемией и интоксикацией (опухоли, цирроз, лейкоз, сепсис и др.). Неспецифическую агглютинацию выявляет контроль с сывороткой IV группы. В этих случаях необходимо вновь определить группу крови перекрестным методом. В капли, где наблюдается агглютинация можно добавить подогретый физраствор. При необходимости можно отмыть исследуемые эритроциты теплым физраствором и вновь определить группу крови.
Слайд 9Наиболее частые причины ошибок
при определении групп крови:
Биологические вариации (продолжение):
Ошибки,
связанные с наличием экстраагглютининов. В сыворотке крови лиц групп А2
(II) и А2В (IV) приблизительно в 1% случаев обнаруживаются антитела к А1 антигену – α1. Это осложняет определение группы крови перекрестным методом, так как сыворотка таких лиц агглютинирует стандартные эритроциты А(II). То есть проявляет себя как сыворотка О (I).
При иммунодефицитных состояниях у стариков наблюдается снижение уровня групповых агглютининов.
Слайд 10Система АВО
Антигены АВО присутствуют на эритроцитах, клетках почек, слюнных желез
и других тканей.
Формирование - на 3-ем месяце внутриутробного развития
под влиянием 3-х аллельных генов – А,В,О, расположенных на 9 хромосоме. К моменту рождения формирование не закончено. Максимальная антигенность к 3 годам.
Группа крови неизменна на протяжении всей жизни.
Слайд 11Формирование групп крови
Наследование антигенов АВО кодоминантное.
Возможны 6 генотипов групп крови:
ОО, АА. АО, ВВ, ВО, АВ, но 4 фенотипа. У
гетерозигот (АО,ВО) гены А и В доминантны, а ген О рецессивен, поэтому гетерозигота АО и гомозигота АА фенотипически проявляется одинаково.
Частота встречаемости различных групп: 0(1) - 33,5%, А(II) – 37,8%, В(III) – 20,6 %, АВ(IV) – 8,1%.
Слайд 12Варианты антигенов АВО
Антиген А
· В сильной форме - А1 (85%
лиц группы А и АВ).
· В слабой форме - А2
(14-15%), А3, А4 и т.д.
Наличие слабых антигенов А осложняет определение групп крови и является самой частой причиной ошибок.
Антиген В
Варианты со слабой выраженностью антигена В встречаются очень редко (казуистические случаи).
Слайд 13Химеризм по АВО
Химеризм по АВО – присутствие в одном
организме эритроцитов, принадлежащих к двум фенотипам.
Причины:
массивное переливание эритроцитов
1 группы пациенту другой группы
трансплантация аллогенного костного мозга на фоне интенсивной иммунодепрессии
в естественных у разнояйцевых близнецов.
Слайд 14Изменение экспрессии АВО
Группа крови неизменна на протяжении всей жизни, но
экспрессия групповых антигенов на эритроцитах может изменяться.
Причины:
анемия (мегалобластная, сидеробластная)
пароксизмальная
ночная гемоглобинурия (одновременно с резусантигенами)
тяжелые интоксикации
Слайд 15Антитела системы АВО
Естественные
Иммунные
Естественные - два типа – α и
β. Класс IgМ.
У новорожденных их нет. Появляются к концу
3-6 месяца жизни. Титр у взрослых: α – 1:32, 1:64, β – 1:8 – 1:16.
Всегда существует определенное сочетание АГ эритроцитов и естественных антител в сыворотке.
Причины изменения титра α-, β-агглютининов:
Иммунодефицитные состояния, особенно гуморального типа
Заболевания крови (макроглобулинемия Вальденстрема, лимфосаркома, множественная миелома).
Слайд 16Иммунные антиАВО-антитела
Обозначают анти-А и анти-В. Класс G.
Причины появления:
беременности, несовместимые
по АВО (чаще, если мать – 0 (1), а ребенок
– А (II), В(III)
переливание несовместимой крови
введение иммунных препаратов (вакцин, анатоксинов, загрязненных антигенами А и В).
Слайд 17Клиническое значение системы АВО:
определение групп крови для совместимых гемотрансфузий.
При переливаниях несовместимой крови развивается острая посттрансфузионная реакция гемолитического типа
(внутрисосудистый гемолиз).
при беременностях, несовместимых по АВО развивается гемолитическая болезнь. Бывает редко: приблизительно в 1 случае из 25 несовместимостей.
Слайд 18Система антигенов резус
Это гликолипиды, располагающиеся только в оболочках эритроцитов.
Формируются на 6-10 неделе внутриутробного периода. Их сила в это
время такая же, как у взрослых.
Кодируются 3 генами, каждый из которых может быть в двух вариантах – сильном или слабом.
Слайд 19Группы системы резус
На одной хромосоме возможны 8 разных комбинаций: DCE,
dCe и т.д.(восемь групп системы резус).
Резус-фактор - D (Rh0)
– самый активный антиген системы резус (в 95% случаев является причиной гемолитической болезни новорожденных). Его называют стандартный резус-антиген. Иммуногенность D- Rh0 в 20 раз выше, чем у других Rh – АГ.
При определении резус-принадлежности у реципиентов принимают во внимание именно этот антиген: D-Rh+, d – Rh-.
В Европе 85-86% - Rh+, 14-15% - Rh-.
Слайд 20Физиологическая роль Rh-белков
Предположительно Rh (D) действует в эритроцитах как
транспортный белок.
Индивиды с отсутствием Rh-антигенов страдают гемолитической анемией без
наличия аутоантител против эритроцитов.
У Rh- индивидов чаще встречается болезнь Ходжкина. У Rh+ мальчиков, рожденных Rh- матерями, существует выше риск развития шизофрении.
Слайд 21Определение резус-принадлежности доноров крови
Резус-отрицательный донор не должен содержать в эритроцитах
ни одного из основных (D,C,E) антигенов резус (формула d,c,e). В
противном случае он идет как донор резус-положительный, а как реципиент – резус-отрицательный.
При наличии слабых разновидностей антигенов D (например, Du - 1 - 3% резус-положительных людей) как больной (реципиент) регистрируется как резус- отрицательный, а как донор – резус-положительный.
Слайд 22Антитела системы резус
В норме отсутствуют. Появляются у резус-отрицательных лиц
в ответ на попадание резус-антигенов:
беременность Rh- -женщины Rh+ плодом;
переливание Rh+
крови Rh- реципиенту.
Полные (чаще IgМ) – обусловливают посттрансфузионных реакции и в патогенезе гемолитической болезни новорожденных не участвуют, так как не проходят через плаценту.
Неполные АТ (чаще G, реже А). IgG проходят через плаценту, обусловливают ГБН. IgА - в молозиве.
Слайд 24Реакция Кумбса (прямая)
+
Эритроциты
Антитела к эритроцитам полные
Слайд 25Реакция Кумбса (непрямая)
+
Эритроциты
Антитела неполные (сыворотка больного)
Агглютинации нет
+
Антиглобулиновая сыворотка
Слайд 26Антигены KEL
Формируются на 6-7 неделе внутриутробного периода. Их сила
в это время такая же, как у взрослых. Располагаются на
эритроидных клетках различной степени зрелости.
Антитела – антиKEL аллоиммунного происхождения. Неполные IgG и полные IgM (редко).
Клиническое значение (антиген KEL-1): посттрансфузионные осложнения, ГБН.
Выявление: конглютинация с 10: желатином, агглютинация в солевой среде, непрямая проба Кумбса.
Слайд 27Антигены лейкоцитов
HLA (human leucocyte antigens) - главный комплекс гистосовместимости. Расположены
во всех ядросодержащих клетках организма и тромбоцитах. Наибольшее их количество
представлено на лимфоцитах. У всех клеток данного индивидуума система HLA тождественна. Это «иммунологический паспорт организма».
HLA –гены у человека располагаются в 6 хромосоме. и сконцентрированы в 7 областях (локусах).
3 класса: HLA-1, HLA-II, HLA- III.
Наследование кодоминантное. Функция: участие в иммунных реакциях, отторжение тканей при трансплантации.
Слайд 28Антигены гранулоцитов
Обнаружены в полиморфноядерных лейкоцитах периферической крови и клетках
костного мозга. Отсутствуют в эритроцитах и тромбоцитах.
Антигены гранулоцитов –
NA1, NA2, NB1, NC1, ND1. Частота встречаемости соответственно 58, 86. 95. 96, 98,5%.
Наследование кодоминантное. Гены NA1 сцеплены с антигенами системы HLA.