Слайд 1Диагностика пневмококковой инфекции
Преподаватель микробиологии МК №3
Саенко Т.П.
Слайд 2ПНЕВМОКОКК (Streptococcus pneumoniae (Рn)) представитель рода Streptococcus имеет ряд характерных
для других стрептококков свойств:Гр + диплококк ланцетовидной формы. Спор не
образует, неподвижен.
Слайд 3Пневмококки образуют капсулу, окружающую оба кокка.
В капсуле содержится термоустойчивое вещество
антифагин (защищающий пневмококк от фагоцитоза и действия антител).
При росте на
искусственных питательных средах утрачивают капсулу.
Слайд 4КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ свойства
Пневмококк растет при температуре 37градусов С., рН среды –
7,8, факультативный анаэроб.
На ЖПС – образует диффузное помутнение
На ППС
– колонии 1-2 мм с альфа-гемолизом сходные со стрептококковыми («блюдце»), но более прозрачные и влажные.
Растет на средах с добавлением нативного белка (крови или сыворотки).
На КА – колонии зеленовато-се-
рого цвета, окруженные зеленой
зоной (переход гемоглобина в
метгемоглобин)
Слайд 5Альфа-гемолиз пневмококков на КА
Слайд 7Ферментативные свойства
Пневмококки обладают выраженной сахаролитической активностью:
лактоза +
глюкоза +
сахароза +
мальтоза +
инулин
+ до кислоты
маннит -,
протеолитические
свойства выражены слабо. Индол -
.
Слайд 8Факторы патогенности
Капсула и М-белок (защищающие пневмококк от фагоцитоза)
Пневмококки продуцируют:
Гиалуронидазу (разрушает соединительную ткань)
Фибринолизин
Пневмолизин – индуцирует воспаление (образует разрывы мембранных
клеток)
Протеаза, расщепляющая иммуноглобулин А (защищает Рп от местных антител)
Лизоцим (мурамидаза)-фактор колонизации, действует на НМФ слизистых оболочек.
Нейраминидазу – фактор инвазии
Слайд 9Физиологические особенности
От всех остальных стрептококков пневмококки отличаются:
морфологией,
антигенной специфичностью,
ферментируют
инулин,
проявляют высокую чувствительность к оптохину
проявляют высокую чувствительность к
желчи - наступает лизис пневмококков.
Слайд 10В цитоплазме пневмококков имеется общий для всей группы протеиновый антиген,
а в капсуле – полисахаридный, разделенный на 90 серотипов. Все
они являются патогенными для человека, причем в клинической практике 1, 3, 4, 7, 8, 9 и 12-й типы наиболее часто вызывают заболевания взрослых, а пневмонии и отиты у детей обычно связаны с 6, 14, 19 и 23-м типами капсульных пневмококков.
Капсулообразование наиболее хорошо выражено у бактерий 3 типа. При расположении цепочками капсула может быть общей.
серотип-3 вызывает тяжёлую пневмонию у людей всех возрастов. Заражение зачастую заканчивается смертью пациента.
Слайд 11
Резистентность пневмококков.
Пневмококки мало устойчивы во внешней среде.
В
мокроте сохраняются до 2 месяцев, на питательной среде не более
6 дней, поэтому при культивировании необходимо делать пересевы через каждые 2-3 дня.
При нагревании до 55°C погибают через 10 минут,
3%-ный раствор карболовой кислоты вызывает гибель пневмококков в течение 1-2 минут.
Слайд 12Пневмококки могут встречаться в носоглотке как здоровых взрослых людей (5–10%),
так и детей (20–40%).
Пневмококк передается от человека к человеку:
при непосредственном соприкосновении с секретом слизистой оболочки
Воздушно - капельным
Воздушно-пылевым путем.
Входные ворота: слизистая верхних дыхательных путей, глаз и уха.
Слайд 14Пневмококковая инфекция:
пневмония (воспаление легких),
гнойный менингит (воспаление оболочек мозга),
бронхит
(воспаление бронхов),
отит (гнойное воспаление среднего уха),
синусит (воспаление пазух
носа),
сепсис (заражение крови),
эндокардит (воспаление внутренней оболочки сердца),
артрит (воспаление суставов) и др.
Слайд 15Даже в тех регионах, где любой пациент может пройти курс
эффективного лечения антибиотиками, смертность от болезней, вызванных пневмококком, достигает 19%
для госпитализированных пациентов, и этот процент возрастает до 30-40% для пациентов с бактериемией.
Слайд 18Эпидемиологическая значимость пневмококковых инфекций в РФ
Пневмококковые пневмонии: 1200
случаев на 100 000 детей = 38 960 детей
Пневмококковые
менингиты: 10 случаев на 100 000 детей = 324 ребенка
Пневмококковые бактериемии: 100 случаев на 100 000 детей = 3 243 ребенка
Пневмококковыми отитами: 22000 случаев на 100 000 детей = 713 460 ребенка.
Слайд 19Пневмококковая пневмония
Крупозная пневмония. Проникая в один из участков легочной ткани,
инфекционный агент выделяет токсин, который распространяется на всю долю легкого.
Проницаемость сосудов повышается, и происходит экссудация фибрина и клеток крови в альвеолы.
Слайд 23
Streptococcus pneumonia.
Пневмония
Менингит
Отит
Двухсторонняя пневмония у ребенка
Пневмококковый менингит
Острый гнойный средний отит
Слайд 24Основные методы исследования
Микроскопический
Бактериологический.
Биологический.
Слайд 25Исследуемые материалы
Мокрота( лучше брать утреннюю, при специфической пневмонии мокрота имеет
ржавый цвет), смывы с бронхов.
Плевральный выпот и прочие экссудаты(берут стерильным
шприцем)
Кровь(5-10 мл. берут стерильно из локтевой вены)
Слизь из носа и зева, выделения из уха (собирают стерильным тампоном)
Слайд 26Препарат мокроты. Окраска по Граму. Полиморфно-ядерные лейкоциты и грамположительные диплококки
(Streptococcus pneumoniae)..
Слайд 27Первый день исследования.
МОКРОТА
МИКРОСКОПИЯ МАЗКА ПО ГРАМУ
ПОСЕВ НА КРОВЯНОЙ АГАР
БИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД
ЗАРАЖЕНИЕ БЕЛЫХ МЫШЕЙ
Слайд 29Второй день исследования
КОЛОНИИ НА КРОВЯНОМ АГАРЕ
МАЗОК И МИКРОСКОПИЯ
ПЕРЕСЕВ НА
СКОШЕННЫЙ АГАР С СЫВОРОТКОЙ,ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ
Слайд 31Третий день исследования
ПРОВЕРКА ЧИСТОТЫ КУЛЬТУРЫ
МИКРОСКОПИЯ МАЗКА ПО ГРАМУ
НАЛИЧИЕ ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ
ЛАНЦЕТОВИДНЫХ ДИПЛОКОККОВ
СРЕДА ГИССА
СРЕДА С ИНУЛИНОМ
СРЕДА С ОПТОХИНОМ
ПРОБА С ЖЕЛЧЬЮ
Слайд 32Набухание капсулы
-Необходимо поставить реакцию набухания капсулы по Нейфельду. Для ее
постановки на покровные стекла необходимо нанести 1 каплю агглютинирующих сывороток
1, 2, 3. В каждую каплю добавить изучаемую культуру пневмококка и по 1 капле щелочного раствора метиленового синего.
Капли размешивают, накрывают предметным стеклом и переворачивают. Через 2 минуты просматривают препарат с иммерсионной системой микроскопа. В том препарате, где вид сыворотки соответствует варианту пневмококка, наступает набухание капсулы, она увеличивается, получает резкие очертания.
Слайд 33Четвертый день исследования
тест
Вид микроба
Лакто-за
Глюко-
за
Саха-роза
Маль-
тоза
Ину-
лин
40%
желчь
Оптохин
1:50 000
Пневмококк
Зеленящий
стрептококк
+ +
+ + + Лизис Роста нет
+ + + + - - Рост
Слайд 34Впервые вакцинация против пневмококковой инфекции новорожденных детей и детей раннего
возраста была внедрена в США в 2000 году.
К концу
2009 года она была включена в национальные календари прививок 45 странах.
С 2000 года более чем 265 миллионов доз вакцины против пневмококковой инфекции было введено детям по всем миру.