Разделы презентаций
- Разное
- Английский язык
- Астрономия
- Алгебра
- Биология
- География
- Геометрия
- Детские презентации
- Информатика
- История
- Литература
- Математика
- Медицина
- Менеджмент
- Музыка
- МХК
- Немецкий язык
- ОБЖ
- Обществознание
- Окружающий мир
- Педагогика
- Русский язык
- Технология
- Физика
- Философия
- Химия
- Шаблоны, картинки для презентаций
- Экология
- Экономика
- Юриспруденция
Гель-электрофорез
Содержание
- 1. Гель-электрофорез
- 2. Электрофорез - разделение смесей биомолекул в электрическом полеПрименение
- 3. ПрименениеМетод используется для идентификации состава смеси ДНК или РНК
- 4. При пропускании электрического тока через раствор в
- 5. Движение молекул осуществляется в геле, пронизанном маленькими
- 6. Через определённое время, электрический ток отключают и
- 7. Состав геляАгароза – полисахарид получаемый из красных
- 8. Буфер для электрофорезаЭлектрофорез проводится в камере, заполненной
- 9. Бромид этидия Это интеркалирующий агент, который интеркалирует
- 10. МаркерыМаркеры длин ДНК предназначены для определения размера молекул, прошедших через гель
- 11. Краситель для пробКраситель смешивают с пробами и
- 12. НапряжениеОбщая скорость движения ДНК через агарозный гель
- 13. Схема эксперимента
- 14. Возможные трудностиПеред заливкой геля необходимо убедиться, что
- 15. Использование результатов анализа
- 16. Этапы ПЦРВыделение РНКПолучение ДНК на матрице РНКПроведение
- 17. Для этого вам необходимо зарегистрироватьсяУказать email и
- 18. Самостоятельно проведите гель-электрофореза в виртуальной лаборатории: https://learn.genetics.utah.edu/content/labs/gel/
- 19. Скачать презентанцию
Электрофорез - разделение смесей биомолекул в электрическом полеПрименение
Слайды и текст этой презентации
Слайд 4
При пропускании электрического тока через раствор в нем формируется направленное
электрическое поле
Под действием поля молекулы начинают движение в направлении катода(-)
или анода(+)ДНК – отрицательно заряженная молекула, будет двигаться к аноду
Принцип метода
Слайд 5Движение молекул осуществляется в геле, пронизанном маленькими порами
Чем молекулы меньше,
тем легче им проходить через поры и тем быстрее они
проходят через гельПринцип метода
Чем молекулы ДНК объемистее, тем сложнее им бегать — все как у людей!
Слайд 6Через определённое время, электрический ток отключают и движение молекул прекращается
К этому моменту молекулы распределятся в соответствии с их размерами
Принцип
метода
Слайд 7Состав геля
Агароза – полисахарид получаемый из красных морских водорослей Porphyra
umbilicalis
Агарозу растворяют в буферном растворе, после чего нагревают для полного
растворенияМатрица из агарозы инертна
Варьируя процентным содержанием агарозы в буфере, можно устанавливать необходимый объём пор.
Маленький процент – большие поры
Большой процент – маленькие поры
Слайд 8Буфер для электрофореза
Электрофорез проводится в камере, заполненной буферным раствором.
Чаще
всего используются буферы, содержащие ЭДТА, трис и борную или уксусную
кислоту: TAE и TBE.Буфер необходим для повышения ионной силы раствора.
Слайд 9Бромид этидия
Это интеркалирующий агент, который интеркалирует между основаниями нуклеиновых кислот
и позволяет удобно обнаруживать фрагменты ДНК в геле.
Под ультрафиолетовым светом
образует оранжевое свечение.Бромид этидия вносят в пробы, в сам гель или окрашивают гель в конце анализа.
*Интеркаляция — обратимое включение молекулы или группы между другими молекулами или группами.
Слайд 11Краситель для проб
Краситель смешивают с пробами и маркером длин ДНК
для визуализации хода анализа
В начале анализа необходимо убедиться, что краситель
движется в нужном направленииАнализ следует остановить, когда краситель прошёл ¾ длины геля
Слайд 12Напряжение
Общая скорость движения ДНК через агарозный гель зависит от напряжения
Повышение
напряжения приводит к повышению скорости
Чрезмерно высокое напряжение нагревает гель, в
результате чего он может растаять
Слайд 14Возможные трудности
Перед заливкой геля необходимо убедиться, что агароза полностью растворена
Перед
заливкой геля необходимо проверить раствор агарозы на отсутствие пузырьков
При загрузке
проб следить за тем, чтобы не было перекрёстного смешивания растворов в лункахПеред включением источника тока нужно проверить полностью ли погружен гель в буфер
Необходимо отмечать в какой лунке, какая проба
Слайд 16Этапы ПЦР
Выделение РНК
Получение ДНК на матрице РНК
Проведение ПЦР
Визуализация результатов
В результате
ПЦР получается множество копий одного или нескольких фрагментов ДНК.
Полимеразная
цепная реакция (ПЦР) – экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (НК) пробеГель-электрофорез в рамках данного курса
Слайд 17Для этого вам необходимо зарегистрироваться
Указать email и придумать пароль (остальные
графы можно не заполнять):
Далее повторно перейти по ссылке в заголовке
слайда и нажать «Login»Просмотрите демонстрацию анализа на сайте https://vlab.amrita.edu/index.php?sub=3&brch=77&sim=1375&cnt=2870
При появлении такой надписи:
Необходимо выполнить следующее:
Нажать на букву «i» рядом с адресной строкой
Выбрать пункт «Настройки сайтов»
Перейти к графе «Flash»
Установить «Разрешить»
Вернуться к сайту и обновить страницу
Слайд 18Самостоятельно проведите гель-электрофореза в виртуальной лаборатории: https://learn.genetics.utah.edu/content/labs/gel/
