Разделы презентаций
- Разное
- Английский язык
- Астрономия
- Алгебра
- Биология
- География
- Геометрия
- Детские презентации
- Информатика
- История
- Литература
- Математика
- Медицина
- Менеджмент
- Музыка
- МХК
- Немецкий язык
- ОБЖ
- Обществознание
- Окружающий мир
- Педагогика
- Русский язык
- Технология
- Физика
- Философия
- Химия
- Шаблоны, картинки для презентаций
- Экология
- Экономика
- Юриспруденция
Методы анализа нуклеиновых кислот
Содержание
- 1. Методы анализа нуклеиновых кислот
- 2. Подготовка НК к анализу1. С помощью ферментов
- 3. Рестриктазы распознают палиндромы –последовательности-перевертыши, идентичные в обеих
- 4. 2. Проводят амплификацию (получение большого количества копий)
- 5. ПЦР (полимеразная цепная реакция)Kary Mullis (р. 1944)Нобелевская премия по химии 1993
- 6. ПЦР – это способ получения достаточного для
- 7. ПЦР Применение:Диагностика бактериальных и вирусных инфекцийГенетическое типирование (определение носительства мутантных генов)
- 8. Основан на ДНК-полимеразной реакции.Реакцию проводят в 4-х
- 9. После включения дидезоксинуклеотида в растущую цепь ДНК ее синтез останавливается
- 10. Слайд 10
- 11. ддГТФ,дГТФ и др. 5’ ТТААЦ----------Г 5’ ТТААЦ----------Г---------------------Г
- 12. Слайд 12
- 13. Саузерн- и Нозерн-блоттинг Методы основаны на способности ДНК
- 14. В основе метода – принцип комплементарностиВЕСТЕРН-БЛОТ (иммуноэлектрофорез)
- 15. Этапы:Выделение НК из биологического материала, фрагментацияЭлектрофорезПрикрепление НК-мишени
- 16. Прикладное значение: Это метод «отпечатков пальцев» идентификация людей;диагностика
- 17. Скачать презентанцию
Подготовка НК к анализу1. С помощью ферментов рестриктаз ДНК разрезают на фрагментыРестриктазы или рестрицирующие эндонуклеазы – высокоспецифичные ферменты, узнающие строго определенные последовательности ДНК и разрезающие их.
Слайды и текст этой презентации
Слайд 2Подготовка НК к анализу
1. С помощью ферментов рестриктаз ДНК разрезают
на фрагменты
определенные последовательности ДНК и разрезающие их.
Слайд 3 Рестриктазы распознают палиндромы –последовательности-перевертыши, идентичные в обеих цепях при прочтении
в направлении 5’ – 3’.
«шалаш»
«а роза упала на лапу азора»
Слайд 4
2. Проводят амплификацию (получение большого количества копий) фрагментов ДНК:
Полученные фрагменты
ДНК подвергают денатурации (90°С) –разрыв водородных
связей и разделение цепей;
Вносят праймер
и проводят его фиксацию (отжиг);Добавляют НТФ и ДНК-полимеразу
Слайд 6ПЦР – это способ получения достаточного для анализа числа копий
ДНК (гена или его фрагмента)
В пробирке смешиваются: исследуемый материал (образец
ДНК), дНТФ (субстраты для синтеза), ДНК-полимераза (Taq-полимераза), праймерыТЕРМОЦИКЛЕР
Нагревание до 900С (денатурация ДНК)
Охлаждение до 550С («отжиг» праймеров)
Нагревание до 750С (удвоение цепей) повторение цикла
Слайд 7ПЦР
Применение:
Диагностика бактериальных и вирусных инфекций
Генетическое типирование (определение носительства мутантных
генов)
Слайд 8Основан на ДНК-полимеразной реакции.
Реакцию проводят в 4-х пробирках, в каждую
из которых вносится:
матрица (исследуемый фрагмент ДНК)
праймер
субстраты (дАТФ*р/а, дГТФ, дЦТФ, дТТФ)
ДНК-полимераза
один
из четырех видов дидезоксинуклеотидов (ддАТФ, ддГТФ, ддЦТФ, ддТТФ)
Исследование последовательности нуклеотидов ДНК (метод Сэнджера)
Слайд 13Саузерн- и Нозерн-блоттинг
Методы основаны на способности ДНК и РНК образовывать
гибриды
ДНК – ДНК; ДНК – РНК;
РНК-РНК
Саузерн-блот – для идентификации ДНК;
Нозерн-блот
– для РНКЭдвин Саузерн изобрел этот метод
Принципы блоттинга такие же, как и в случае
Вестерн-блота
Слайд 15Этапы:
Выделение НК из биологического материала, фрагментация
Электрофорез
Прикрепление НК-мишени к подложке
(нитроцеллюлоза, найлон)
Денатурация и фиксация
Гибридизация с молекулярным зондом (меченый Р* образец ожидаемой
(искомой) ДНК)Авторадиография
Слайд 16Прикладное значение:
Это метод «отпечатков пальцев»
идентификация людей;
диагностика наследственных заболеваний;
наиболее быстрый
путь сравнения последовательности нуклеотидов в составе ДНК живых организмов
