температурами отжига праймеров 5°С
Должно быть одно место отжига
Праймеры могут быть
не полностью комплиментарны матрице, но изменения допустимы только на 5’-конце, 3 ’-конец обязательно должен быть полностью комплиментарнымЖелательно, чтобы праймеры заканчивались на 3 ’-конце на А/Т
Недопустима самокомплементарность(димеры и вторичные структуры) праймеров, особенно на 3 ’-конце (минимум 4 нуклеотида)
Стандартная концентрация праймеров в реакционной смеси 0,2-0,5 мкМ
