Разделы презентаций


Ультрацентрифугирование (седиментация) Методы разделения и очистки биомолекул

Содержание

УльтрацентрифугированиеСедиментация – осаждение частиц в жидкости или газе под действием силы тяжести или центробежной силы.Если седиментация осуществляется с использованием высокоскоростной центрифуги (ультрацентрифуги), используется термин ультрацентрифугирование.Метод позволяет:- определить Мr, плотность и форму

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1Ультрацентрифугирование (седиментация)
Методы разделения и очистки биомолекул

Ультрацентрифугирование (седиментация)Методы разделения и очистки биомолекул

Слайд 2Ультрацентрифугирование
Седиментация – осаждение частиц в жидкости или газе под действием

силы тяжести или центробежной силы.

Если седиментация осуществляется с использованием высокоскоростной

центрифуги (ультрацентрифуги), используется термин ультрацентрифугирование.

Метод позволяет:

- определить Мr, плотность и форму макромолекул,

- разделить смесь веществ на компоненты для аналитических и препаративных целей
УльтрацентрифугированиеСедиментация – осаждение частиц в жидкости или газе под действием силы тяжести или центробежной силы.Если седиментация осуществляется

Слайд 3Ультрацентрифугирование
Принцип метода

При центрифугировании раствора макромолекул частицы движутся к дну пробирки

под действием центробежных сил. Через определенные промежутки времени определяют распределение

частиц по длине пробирки.
УльтрацентрифугированиеПринцип методаПри центрифугировании раствора макромолекул частицы движутся к дну пробирки под действием центробежных сил. Через определенные промежутки

Слайд 4Ультрацентрифугирование
Методы ультрацентрифугирования

Скоростное ультрацентрифугирование – частицы движутся через раствор, оставляя за

собой зону чистого растворителя. Исследуют смещение границы между растворителем и

раствором.

Зональное ультрацентрифугирование – образец наносится в виде слоя на поверхность более плотного растворителя. Различные компоненты будут разделяться в виде серии зон (полос), которые осаждаются только через растворитель отдельно одна от другой.
УльтрацентрифугированиеМетоды ультрацентрифугированияСкоростное ультрацентрифугирование – частицы движутся через раствор, оставляя за собой зону чистого растворителя. Исследуют смещение границы

Слайд 5Ультрацентрифугирование
Теория ультрацентрифугирования

На молекулу в растворе при центрифугировании действуют следующие силы:

УльтрацентрифугированиеТеория ультрацентрифугированияНа молекулу в растворе при центрифугировании действуют следующие силы:

Слайд 6Ультрацентрифугирование
Теория ультрацентрифугирования

1. Частица с большей массой будет двигаться быстрее

2. Более

плотная частица (с меньшим объемом) будет двигаться быстрее, чем менее

плотная

3. Чем больше плотность раствора, тем медленнее движение частиц

4. Чем больше коэффициент трения, тем медленнее движение частиц
УльтрацентрифугированиеТеория ультрацентрифугирования1. Частица с большей массой будет двигаться быстрее2. Более плотная частица (с меньшим объемом) будет двигаться

Слайд 7Ультрацентрифугирование
Теория ультрацентрифугирования

Коэффициент седиментации
параметры
эксперимента
параметры молекулы

УльтрацентрифугированиеТеория ультрацентрифугированияКоэффициент седиментациипараметрыэкспериментапараметры молекулы

Слайд 8Ультрацентрифугирование
Аналитическая ультрацентрифуга
Оборудование для ультрацентрифугирования

УльтрацентрифугированиеАналитическая ультрацентрифугаОборудование для ультрацентрифугирования

Слайд 9Ультрацентрифугирование
Препаративная ультрацентрифуга
Оборудование для ультрацентрифугирования

УльтрацентрифугированиеПрепаративная ультрацентрифугаОборудование для ультрацентрифугирования

Слайд 10Ультрацентрифугирование
Ротор с подвесными
стаканами
Ротор с подвесными
стаканами
Угловой ротор
Оборудование для ультрацентрифугирования

УльтрацентрифугированиеРотор с подвеснымистаканамиРотор с подвеснымистаканамиУгловой роторОборудование для ультрацентрифугирования

Слайд 11Ультрацентрифугирование
Скоростное ультрацентрифугирование
Скоростное ультрацентрифугирование – частицы движутся через раствор, оставляя за

собой зону чистого растворителя. Исследуют смещение границы между растворителем и

раствором.
УльтрацентрифугированиеСкоростное ультрацентрифугированиеСкоростное ультрацентрифугирование – частицы движутся через раствор, оставляя за собой зону чистого растворителя. Исследуют смещение границы

Слайд 12Ультрацентрифугирование
Оптические методы регистрации движения границы раствор – чистый растворитель
Шлиреновская система
основана

на том, что луч света не отклоняется при прохождении через

область с однородной концентрацией, но отклоняется, проходя через участок с изменяющейся концентрацией, вследствие изменения показателя преломления.
УльтрацентрифугированиеОптические методы регистрации движения границы раствор – чистый растворительШлиреновская системаоснована на том, что луч света не отклоняется

Слайд 13Ультрацентрифугирование
Оптические методы регистрации движения границы раствор – чистый растворитель
Интерференционная система
использует

двухсекторную ячейку, один из секторов которой содержит только растворитель, другой

– раствор. При прохождении света через оба сектора получается оптическая интерферен-ционная картина.
УльтрацентрифугированиеОптические методы регистрации движения границы раствор – чистый растворительИнтерференционная системаиспользует двухсекторную ячейку, один из секторов которой содержит

Слайд 14Ультрацентрифугирование
Оптические методы регистрации движения границы раствор – чистый растворитель
Абсорбционная система
регистрирует

поглощение света определенной длины волны, соответствующей максимуму поглощения исследуемых биомолекул,

по длине ячейки.
УльтрацентрифугированиеОптические методы регистрации движения границы раствор – чистый растворительАбсорбционная системарегистрирует поглощение света определенной длины волны, соответствующей максимуму

Слайд 15Ультрацентрифугирование
Скоростное ультрацентрифугирование
Определение коэффициента седиментации

УльтрацентрифугированиеСкоростное ультрацентрифугированиеОпределение коэффициента седиментации

Слайд 16Ультрацентрифугирование
Скоростное ультрацентрифугирование
Определение коэффициента седиментации
tg a = w2s
tg a = 3,62

*10-5 с-1
W = 2p* 33000 /60

= 3,45*103

рад/с

W2 = 1,19*107

S = 30,1 *10-13 с

УльтрацентрифугированиеСкоростное ультрацентрифугированиеОпределение коэффициента седиментацииtg a = w2stg a = 3,62 *10-5 с-1W = 2p* 33000 /60

Слайд 17Ультрацентрифугирование
Скоростное ультрацентрифугирование
Факторы, влияющие на величину коэффициента седиментации
1. Чем больше концентрация,

тем больше S.
2. Чем больше скорость вращения центрифуги, тем больше

S.
3. Заряженные частицы имеют меньший S, чем незаряженные.
4. Частицы с вытянутой формой проявляют меньший S.
5. Чем больше Mr, тем больше S.
УльтрацентрифугированиеСкоростное ультрацентрифугированиеФакторы, влияющие на величину коэффициента седиментации1. Чем больше концентрация, тем больше S.2. Чем больше скорость вращения

Слайд 18Ультрацентрифугирование
Скоростное ультрацентрифугирование

УльтрацентрифугированиеСкоростное ультрацентрифугирование

Слайд 19Ультрацентрифугирование
Скоростное ультрацентрифугирование
Определение коэффициента седиментации

УльтрацентрифугированиеСкоростное ультрацентрифугированиеОпределение коэффициента седиментации

Слайд 20Ультрацентрифугирование
Зональное ультрацентрифугирование
Проводят в градиенте плотности сахарозы или глицерина 5-20 %

(белки), либо в градиенте плотности CsCl (ДНК)

УльтрацентрифугированиеЗональное ультрацентрифугированиеПроводят в градиенте плотности сахарозы или глицерина 5-20 % (белки), либо в градиенте плотности CsCl (ДНК)

Обратная связь

Если не удалось найти и скачать доклад-презентацию, Вы можете заказать его на нашем сайте. Мы постараемся найти нужный Вам материал и отправим по электронной почте. Не стесняйтесь обращаться к нам, если у вас возникли вопросы или пожелания:

Email: Нажмите что бы посмотреть 

Что такое TheSlide.ru?

Это сайт презентации, докладов, проектов в PowerPoint. Здесь удобно  хранить и делиться своими презентациями с другими пользователями.


Для правообладателей

Яндекс.Метрика