Химико-токсикологический анализ веществ, изолируемых дистилляцией (перегонкой с

«летучих ядов»
Петухов Алексей Евгеньевич
к.ф.н., старший преподаватель
кафедры фармацевтической
и токсикологической химии

включены:
синильная кислота;
спирты (метиловый, этиловый, пропиловый, бутиловый и амиловый);
формальдегид;
хлороформ, хлоралгидрат, четыреххлористый

углерод, дихлорэтан;
фенол, крезолы.

Во второй раздел Перечня включены: этиленгликоль, ацетон, бензол, толуол, ксилол и др.

ГЖХ Химический

метод

№ 346н
Желудок и кишечник (их содержимое);
Кровь
Легкие
Органы,

осуществляющие элиминацию ксенобиотиков
(печень, почки)
Селезенку
Мозг
Моча
Жировая ткань

спиртов)
Микродиффузионный
метод
С водяным паром
Частный метод
дистилляции
с пропусканием
сжатого азота
для HCN и ее
солей
Методы

изолирования

Парофазный анализ

колба с объектом исследования; 3 – баня водяная;
4 – холодильник;

5 – приемник дистиллята.

выше 100оС)
Колба с анализируемым образцом
(нагрев на водяной бане

до 60-70оС)
Холодильник
Приемник

г биологического материала
рН 2-3, щавелевая кислота

1) 5 мл - первая

фракция собирается в приемник с 5 мл 0,1 н NaOH
2) 300 мл – вторая фракция

кипят при температуре более низкой, чем температура кипения каждого из

компонентов (азеотроп);
Суммарное давление паров компонентов над системой Р, равное сумме давлений р1 + р2 всегда выше давления пара каждого компонента в отдельности

Основы метода

кипения отдельных компонентов;
В отдельных случаях, если вещество с водой не

дает азеотропа, в реакционную смесь дополнительно вводят вещество, образующее с токсичным веществом азеотроп (пример – этиленгликоль)

Основы метода

водой (Ткип. 100оС при 760 мм рт. ст.) при температуре

69оС. При этом количественное соотношение в дистилляте (в граммах)
m1 M1  P1
------- = -------------- ,
m2 M2  P2

где m1 и m2 - массы данных веществ в дистилляте, M1 и M2 – их молекулярные массы, P1 и P2 – парциальные давления их паров.

10% ТХУ + 0,5 мл бромной воды + 0,3 мл

0,5% гидразин сульфата сине-фиолетовый цвет
2) 2-3 капли дистиллята высушивают на предметном стекле + 1 к 1% AgNO3 в 50% азотной кислоте, нагрев на пламени горелки, + 1 к 1% метиленовой сини темно-зеленые игольчатые кристаллы
3) 1 мл дистиллята + 3 к 40% FeCl3/FeCl2, нагрев до кипения, охлаждают, + 10% HCl до кислой среды по лакмусовой бумаге берлинская лазурь

Fe(CN)2 + Na2SO4
Fe(CN)2 + NaCN = Na4[Fe(CN)6]
3Na4[Fe(CN)6] + 2Fe2(SO4)3 =

Fe4[Fe(CN)6]3 + 6Na2SO4
синее окрашивание

Заключение о качественном обнаружении (если синий осадок не выпадает тотчас) или необнаружении HCN дается лишь по истечении 24-48 час, т.к. при следовых количествах HCN в присутствии органических веществ осадок
Берлинской лазури может выпадать медленно.

Чувствительность реакции 20 мкг HCN в 1 мл раствора

(300 мл)

качественные реакции
Реакция отщепления атома хлора
Реакция образования изонитрила
Реакция с резорцином

Общей реакцией на галогенопроизводные является реакция отщепления галоида, что достигается

при нагревании части дистиллята со спиртовым раствором NaOH:

+ AgNO3
в HNO3

2. В случае отсутствия осадка или мути проводят реакцию получения изонитрила

Отрицательный результат этой реакции позволяет судить о ненахождении
в исследуемом объекте галогенорганических веществ.

CHCl3 + C6H5NH2 + 3 KOH  C6H5CN + 3 KCl + 3 H20

(м-диоксибензол) в 10% р-ре NaOH при нагревании:
Появление розового

(красного) окрашивания может указывать на наличие Хлороформа, 4-хлористого углерода, хлоралгидрата.

4. При значительных количествах ССl3 и хлоралгидрата
проводят реакцию восстановления Cu(OH)2 в Cu2(OH), пере
ходящую далее в Cu2O при кипячении с р-ром Феллинга.
При наличии хлороформа, хлоралгидрата и летучих с
водяным паром альдегидов (формальдегид, уксусный альдегид)
образуется желтый осадок гидрата закиси меди, переходящий
Почти тотчас в красный осадок закиси меди.
Альдегиды исключаются в ходе анализа соответствующими реакциями.

+ K2[HgJ4] + 3KOH

Hg + CCl3CHOK + 4KJ + 2H2O

При наличии хлоралгидрата в исследуемом растворе образуется кирпично-красный осадок, который затем становится грязно-зеленым

Такую же реакцию дают альдегиды и некоторые другие восстанавливающие вещества

Продолжение

образования этиленгликоля и обнаружение его после переведения в формальдегид:
При нагревании

1,2-дихлорэтана с раствором карбоната натрия в запаянной ампуле образуется этиленгликоль. При взаимодействии этиленгликоля с периодатом калия образуется формальдегид

Формальдегид подтверждают реакциями с хромотроповой и фуксинсернистой кислотой

Такую же реакцию дают альдегиды и некоторые другие восстанавливающие вещества

Продолжение

запаянной ампуле образуется ацетилен, который при взаимодействии с солями меди

(I) дает ацетиленид меди, имеющий розовую или вишневую окраску

Продолжение

0,03 мкг в пробе. Реакция не является специфичной и имеет

только отрицательное значение. Белки и продукты их разложения мешают реакции, поэтому ее нельзя проводить (например, для установления факта консервирования формалином) непосредственно с жидкостью, которой залиты внутренние органы трупа.
2. Дистиллят смешивают с 5-кратным объемом конц. H2SO4. После охлаждения смеси вносят 0,02-0,03 г кодеина (морфина) – сразу или через несколько минут появляется красно- или сине-фиолетовое окрашивание. Чувствительность - 0,02 мкг в пробе.
3. Дистиллят смешивают с 2-3 каплями конц. H2SO4 или HCl и р-ром фуксинсернистой кислоты – через несколько минут появляется синее или сине-фиолетовое окрашивание. Чувствительность - 0,03 мкг в пробе.

Реакцию дают все альдегиды. Ацетон также дает сине-фиолетовое окрашивание.

красно-фиолетовое окрашивание. Чувствительность - 1,0 мкг в пробе.

металлическое серебро:
AgNO3 + NH4OH = AgOH +

NH4NO3;
2AgOH = Ag2O + H2O;

Чувствительность – 0,02 мкг в пробе.

Заключение о нахождении формальдегида в биоматериале дается, как правило, при условии получения положительных результатов второй и третьей реакций.

Продолжение

1% свежеприготовленного нитропруссида натрия [Na2Fe(CN)5NO]•2H2O дает оранжево-красное окрашивание, переходящее при

добавлении CH3COOH до кислой реакции в красно-фиолетовой или вишнево-красное окрашивание.
2. С р-ром йода в KI в присутствии 10% водного р-ра NH4OH образуется йодоформ (характерный запах) и выпадает желтый кристаллический осадок.
Чувствительность реакции – 0,1 мг/мл.

Химико-токсикологический анализ ацетона

дают эту реакцию, поэтому реакция имеет значение только при отсутствии

этих веществ.
3. С 1% р-ром фурфурола в 96°этаноле в присутствии 10% NaOH и дальнейшем подкислении конц. HCl дистиллят, содержащий ацетон, дает интенсивное красное окрашивание. Это общая реакция для альдегидов и кетонов.

Продолжение

на окислении его в формальдегид. Поэтому необходимо убедиться в отсутствии

формальдегида.
1. Окисление метанола в дистилляте проводят 2%р-ром KMnO4 в кислой среде (10% H2SO4) при охлаждении холодной водой, добиваясь возможно большей полноты окисления метанола до формальдегида.

CH3OH + 2KMnO4 +3H2SO4= 5H2CO + 2MnSO4 + K2SO4 + 8H2O
Для уничтожения избытка KMnO4 к исследуемой жидкости по каплям прибавляют до обесцвечивания 15% р-р бисульфита натрия или щавелевой кислоты:
2KMnO4 + 5Na2SO3 + 3H2SO4= 2MnSO4+ 5Na2SO4 + K2SO4 + 3H2O
2KMnO4 + 5H2C2O4 + 3H2SO4 = 2MnSO4+ K2SO4 + 10CO2 + 8H2O

Химико-токсикологический анализ метанола

и исследуют:
А) с р-ром кодеина или морфина в конц.H2SO4 –

при наличии H2CO появляется красно-фиолетовое (сине-фиолетовое) окрашивание.
Б) с р-ром фуксинсернистой кислоты в присутствии 1 мл конц. HCl - появляется синее или сине-фиолетовое окрашивание.
Чувствительность реакции – 0,1 мг в пробе.

2.Реакция образования метилового эфира салициловой кислоты.
Характерный запах.
Чувствительность реакции – 0,3 мг в пробе.

Продолжение

реакции – 0,04 мг/мл.
Химико-токсикологический анализ этанола

среде до уксусного альдегида – специфический запах:
Чувствительность реакции не

превышает 3 мг в 1 мл дистиллята.

Продолжение

дистиллятом и бензоилхлоридом в присутствии 40% NaOH:

белый осадок или муть трибромфенола (кристаллы имеют форму игл). При

избытке брома реакция идет дальше с переходом в кетоформу:

FeCl3 появляется синее или сине-фиолетовое окрашивание. Реакция специфична для фенольного

гидроксила.

Продолжение

калия в щелочной среде до щавелевой кислоты, подкисление и образование

оксалатов калия при добавлении хлорида кальция – помутнение

2. С сульфатом меди в щелочной среде – синяя окраска
CuSO4 + 2 NaOH  Na2SO4 + Cu(OH)2
HOCH2CH2OH + Cu(OH)2  (-OCH2CH2O-)Cu + 2 H2O

3. Окисление до формальдегида и обнаружение с реакцией фуксинсернистой кислотой– сине-фиолетовое окрашивание

HOCH2CH2OH + KJO4  2 HCHO + KJO3 + H2O

красная окраска
Химико-токсикологическое значение амилового спирта

абсорбирующую жидкость (ж2) через газовую фазу до выравнивания давления в

системе

Токс

Ж2

Ж1

анализируемых соединений

+ CCl3COOH  RONO + CCl3COONa + H2O

мл 30% нитрита натрия
Взбалтывается и через 1 мин шприцом отбирается

0,3 мл парогазовой пробы и вводится в испаритель хроматографа

Методика

добавляется 0,5 мл 0,1% н-пропанола
Методика