МАГНИТНЫЕ НАНОЧАСТИЦЫ В СОВРЕМЕННОЙ МЕДИЦИНЕ

магнитных наночастиц
Стабилизация магнитных наночастиц
Области применения магнитных наночастиц
5.1. Применение магнитных

наночастиц в МРТ
5.2. Магнитные наночастицы в тераностике

наведенный магнитный момент.
Магнитные наночастицы могут состоять из ферро-, ферримагнитных

или суперпарамагнитных материалов.
Магнитные наночастицы по своему химическому составу могут представлять:
Металлы: Co, Ni, Fe
Оксиды металлов: Fe3O4, Fe2O3, CoFe2O4, MnFe2O4, ZnFe2O4
Магнитные сплавы: FePt, FePd, CoPt, CoPt3,  NdFeB, SmCo5

так называемых круговых токов. Источниками таких токов, обладающих магнитными моментами,

являются электронные спины и орбитальное вращение электронов в атомах.
Все вещества так или иначе обладают магнитными свойствами. Принято выделять две группы: магнитно-неупорядоченные и магнитно-упорядоченные.
В класс магнитно-неупорядоченных вещества входят две группы веществ: диамагнетики и парамагнетики. Диамагнетики отталкиваются от магнита, а парамагнетики притягиваются к нему. Для более точного отличия диамагнетика от парамагнетика используют магнитную восприимчивость (χ).
Магнитная восприимчивость – физическая величина, харак-теризующая связь между намагниченностью (I) и магнитным полем вещества (H). Для парамагнетиков χ>0, а для диамагнетиков χ<0.

– это вещества, обладающие большой, положи-тельной χ (до 106), которая

сильно зависит от внешних факторов, таких как магнитное поле и температура. Ферромагнетики способны намагничиваться до насыщения даже в слабых магнитных полях.
Антиферромагнетики – вещества с небольшой положительной χ (10-3–10-5), которая сильно зависит от температуры.
Ферримагнетики – вещества с высокой положительной χ.

Магнитные моменты

они переходят в однодоменное состояние, то есть становятся равномерно намагниченными по

всему объёму. 
При отсутствии внешнего магнитного поля средняя намагниченность таких суперпарамагнитных частиц равна нулю (нулевая остаточная намагни-ченность Mr → отсутствие петли гистерезиса)
Во внешнем магнитном поле такие суперпарамагнитные частицы ведут себя как парамагнетики, но их магнитная восприимчивость намного больше (высокая намагниченность насыщения Ms)

Петля гистерезиса

методы
Направленный синтез (из химических соединений путем направленного изменения их

состава с последующей остановкой роста новой фазы на стадии наноразмеров)
Химическое превращение (наночастицы одного состава превращаются в наночастицы другого состава)
Микробиологические методы (самоорганизация наноструктур в живых организмах)

том числе и магнитных наночастиц) необходимо учитывать особенность данных систем:

Неравновесность наносистем. Практически все наносистемы характеризуются термодинамической неустойчивостью, и процесс их синтеза проходит в условиях, далеких от равновесных, что позволяет добиться спонтанного зародышеобразования и избежать роста и агрегации сформировавшихся наночастиц.
Монодисперсность. Т.к. физико-химические, фармакологические и токсические свойства наночастиц чрезвычайно сильно зависят от их размера, для получения наносистем с оптимальными функциональными характеристиками необходимо синтезировать наночастицы с достаточно узким распределением по размерам, избегая образования сильно полидисперсных систем.

вибрационных, планетарных и других мельниц)
Осаждение в газовой фазе (испарение материала

под воздействием плазмы, электрической дуги, лазера с последующей конденсацией пара наночастиц в инертной атмосфере)
Электронно-лучевая литография (остросфокусированный с помощью магнитных линз электронный пучок действует на поверхность слоя полимера (резиста), чувствительного к электронному облучению. Участки поверхности, на которые попало излучение через специальную маску, очищаются от резиста с помощью проявителя. Через полученные окна в плёнке резиста производится вакуумное напыление подходящего материала, после чего неэкспонированный излучением резист также смывают другим растворителем) 
Электроэррозия (при образовании дуги между электродами, погруженными в ванну с жидкостью, вещество электродов частично диспергируется и взаимодействует с жидкостью с образованием дисперсного порошка) 

осаждение солей из водных растворов при контролируемом добавлении щелочи, окислителей

и пр.)
Термолиз металлсодержащих соединений (разложение под действием температуры лабильных прекурсоров металлов, таких как пентакарбонил, ацетилацетонат и соли длинноцепочечных органических кислот (олеат, стеарат, пальмитат, и другие) в высококипящих органических растворителях)
Гидротермальный метод (гидролиз прекурсоров металла при высоких давлениях и температурах в герметичном автоклаве)
Золь-гель метод (первичное осаждения золя гидроксида металла с помощью гидролиза прекурсора, после этого спонтанная поликонденсация гидроксида с образованием геля и отжиг, ведущий к образованию наночастиц)
Ультразвуковой метод (разложение нестабильных прекурсоров железа в условиях ультразвукового воздействия)
Синтез в обратных мицеллах (химический синтез наночастиц в ограниченном объеме нанореактора – мицеллы)

нуклеация и одинаковый рост благодаря диффузиии
II – нуклеация, рост и

агрегация меньших субъединиц
III – множественные события нуклеации и Оствальдовское созревание

Примером использования метода является получение магнитных наночастиц оксида железа с помощью осторожного добав-ления щелочи к смеси водных растворов хлоридов железа (II) и (III), находящихся в мольном отношении 1:2.
Fe2++ 2Fe3++ 8OH- = Fe3O4+ 4H2O
Преимущества: высокий выход, воспроизводи-мость,простота, одностадийность
Недостатки: высокая полидисперсность

несмешивающимися жидкостя-ми за счет стабилизации границы раздела монослоем поверхностно-активных веществ.

Обратные мицеллы - мицеллы, в которых капли воды распределены в фазе неполярного растворителя.
Размер капель принимает значе-ния порядка десятков нанометров, и может быть предсказуемо проконтро-лирован за счет варьирования соотно-шения вода-растворитель-ПАВ – это позволяет регулировать размер получаемых наночастиц, и повышать их монодисперсность.

Преимущества: низкая полидисперсность
Недостатки: содержит несколько стадий

Нанореактор

возможность контроля за скоростью процессов нуклеации и роста частиц, низкая

полидисперсность
Недостатки: в основном гидрофобные наночасти-цы, необходимость инертной атмос-феры и высоких температур

Модифицированные методы: термолиз в спрее и лазерный термолиз

Fe(CO)5 + Олеиновая кислота + Октиловый эфир + (CH3)3NO

Гидрофобные наночастицы
оксида железа

процесса роста частиц после нуклеации, что позволяет получать более монодисперсные

наночастицы по сравнению с методом соосаждения в растворе. В работе Shaker et all, 2013 золь-гель методом были получены монодис-персные магнитные наночастицы магнетита Fe3O4 с размерами от 29 до 89 нм в зависимости от температуры отжига (от 200 до 400°С, соответственно).
Преимущества: можно использовать нетоксичные соли металла, монодисперсность
Недостатки: многостадийность

прямой источник ультрадисперсных материалов, свойства которых могут быть изменены путем

варьирования биологических условий синтеза или переработки.
В настоящее время ультрадисперсные материалы могут быть получены из ряда биологических объектов, например, ферритинов и связанных с ними белков, содержащих железо, магнетических бактерий и другое.
С помощью микроорганизмов стало возможным проводить химические реакции для извлечения из руд различных металлов, минуя традиционные технологические процессы.

наночастицы с высоким уровнем поверхностной энергии и более чистые по

химическому составу, но очень дорогостоящие и требует значительных затрат энергии)
Химические методы синтеза (требуют мало затрат энергии, процесс синтеза экономичен, можно варьировать параметры наночастиц в широких пределах путем изменения условий проведения синтеза, и получать магнитные наночастицы, пригодны как для применения in vitro, так и для in vivo)
Микробиологические методы синтеза (чрезвычайно хорошо подходят для in vivo применений, но не универсальны, требуют тщательного контроля за условиями и еще недостаточно хорошо изучены)
В связи с этим, наиболее распространенными методами получения магнитных наночастиц являются химические.

шагом является осуществление их покрытия с целью обеспечения коллоидной стабильности

частиц
Для магнитных наночастиц устойчивость к агрегации определятся суммарным вкладом Ван-дер-Ваальсовых, электростатических и магнитных взаимодействий между ними. Частицы являются коллоидно стабильными, когда достаточно велики силы электростатического отталкивания между ними, определяющиеся зарядом поверхности частиц.
Например, заряженные группы, присутствующие на поверхности наночастиц оксида железа, имеют изоэлектрическую точку, близкую к 6.8, и поэтому в физиологических условиях частицы без покрытия склонны агрегировать.

растворе)
увеличение времени циркуляции в крови
облегчение дальнейшей модификации различными молекулами
снижение токсичности
увеличение

захвата определенными органами и тканями
придание свойств, нехарактерных для самих магнитных наночастиц (флуоресценция, плазмонный резонанс, термочувствительность и пр.)
обеспечение контролируемого высвобождения лекарственных препаратов из магнитных наночастиц
тонкое управление физико-химическими свойствами (размер, форма, заряд)
…

препаратов и визуализирующих агентов, а также осуществления активного нацеливания с

помощью биомолекул, необходимо их связывание с поверхностью магнитных наночастиц. В большинстве случаев, прямое взаимодействие таких молекул с функциональными химическими группами на поверхности магнитных наночастиц, получаемых вышеописанными методами, невозможно, поэтому логичным шагом является введение промежуточного покрытия, содержащего активные группы, способные к взаимодействию.
Таким образом, оптимальное покрытие магнитных наночастиц для биомедицинских применений должно обладать следующими свойствами:
гидрофильность и наличие электростатического заряда при физиологических pH для обеспечения коллоидной стабильности
наличие функциональных групп, способных взаимодействовать с лекарственными, визуализирующими или нацеливающими молекулами
биосовместимость и биодеградируемость для безопасности магнитных наночастиц

ПЭГ, поли-D,L-лактид-ко-гликолид – PLGA, поливинилпироллидон - ПВП, поливинилсульфон - ПВС

и пр.)
белки (альбумины, коллаген, казеин и пр.)
cиланы (меркаптопропил триметоксисилан – MPTS, (3-аминопропил) триэтоксисилан – APTES и пр.)
неорганические соединения (оксид кремния - SiO2, графит – С и пр.)
металлы (золото - Au, гадолиний - Gd и пр.)
органические мономеры (пирокатехин, алкилсульфонаты, карбоновые кислоты и пр.)
…

Магнитная биодетекция
Доставка лекарств
Магнитофекция
Ультравысокочастотная терапия
…

находящимися во внешнем магнитном поле, служит основой метода МРТ. У

биологических объектов роль таких магнитных ядер отведена протонам в молекулах воды.
МР – изображения можно построить тремя основными способами:
измерение концентрации протонов
измерение времени спин-спиновой релаксации Т2 (время энергетического обмена между магнитными ядрами водорода)
измерение времени спин-решеточной релаксации Т1 (время энергетического обмена между решёткой и магнитными ядрами
Т.к. концентрация протонов в тканях является практически постоянной величиной, для повышения контраста в МР-изображении используют контрастные агенты, стимулирующие Т1 или Т2 – релаксации. Парамагнитные низкомолекулярные комплексы, способные координировать молекулы воды и ускорять спин-решеточную релаксацию, являются Т1-контрастными агентами (например, хелаты гадолиния). Т2-контрастными агентами обычно являются ферро - и суперпарамагнитные наночастицы оксида железа, создающие вокруг себя магнитное поле и уменьшающие время спин-спиновой релаксации.

– пассивно накапливается в очагах демиелинизации и вызывает появление гиперинтенсивного

сигнала
(светлые участки на снимке)

Диагностика рассеянного склероза

Диагностика аденокарциномы молочной железы

Т2-контрастный агент – наночастицы Fe3O4 – пассивно накапливается в опухолевом очаге и вызывает появление гипоинтенсивного сигнала
(темные участки на снимке)

Введение контрастного агента

используется их конъюгация с лигандами, способными селективно связываться с рецепторами,

экспрессия которых повышена в пораженных клетках (например, опухолевых).
В качестве лигандов могут выступать антитела, аптамеры, пептиды, полисахариды, малые молекулы.

Диагностика глиомы С6 мозга у крыс с помощью магнитных наночастиц Fe3O4, покрытых оболоч-кой из альбумина и связанных с моноклональ-ными антителами к фак-тору роста эндотелия сосудов VEGF, уровень экспрессии которого повы-шен в клетках С6. Приведено сравнение с препаратом Feridex, который несколько лет назад применялся в клинике.

IgG – неспецифические иммуноглобулины (контроль)

композиций, заключающийся в комплексном решении терапевтических и диагностических проблем путём

создания препаратов, которые являются одновременно и средством ранней диагностики, и терапевтическим агентом.

говорит о наличии у полученных магнитных наночастиц суперпарамагнитных свойств

нм
Просвечивающая электронная микроскопия с параллельным элементным анализом
Магнитные наночастицы большего размера

оказались нестабильными в физиологических условиях и спустя несколько дней образовывали агрегаты, что для препаратов, предназначенных для внутривенного введения, недопустимо

БСА – бычий сывороточный альбумин

4T1 мыши с помощью векторных магнитных наночастиц с Доксорубицином увеличила

медиану выживаемость животных на 50% по сравнению с обычным Доксорубицином

При рН 7,4 нано-частицы заряжены отрицательно, а Доксорубицин положительно

Электро-статический комплекс

2014 описана система доставки генов с использованием магнитных наночастиц под

воздействием внешнего магнитного поля

можно направлять магнитные наночастицы к патологическим очагам, находящимся вблизи поверхности

тела. Таким образом, происходит изменение биорас-пределения контейнеров на основе магнитных наночастиц, несущих на себе терапевтические молекулы. Однако для глубокозалегающих очагов заболевания такой подход малоэффективен.

Магнитный наноконтейнер с лекарством

Циркулиро-вание в крови

ЦЕЛЕВЫЕ ТКАНИ

Ретикуло-эндотелиальная система
(селезенка, печень, костный мозг)

Основной путь

Ограниченный доступ

N

S

клеток к воздействию высокой температуры (43-45°С) по сравнению со здоровыми.

Это связано с тем фактом, что стремительно делящиеся клетки, образующие раковую опухоль, находятся в состоянии нехватки кислорода (гипоксии) и избытка кислых продуктов обмена веществ (ацидоза). При повышенных температурах оба процесса становятся более ярко выраженными, приводя к гибели раковых клеток.
Наиболее перспективной является гипертермия с применением магнитных наночастиц. С физической точки зрения это означает превращение магнитной энергии в тепло при перемагничивании частиц в высокочастотном магнитном поле.

Если магнитные наночастицы загрузить химиопрепаратом, то можно одновременно оказывать на опухоль гипертермический и цитостатический эффект

при проведении ультравысокочастот-ной терапии опухолей. Ультравы-сокочастотные колебания создают электрические токи

внутри наночастиц магнетита. Частицы нагреваются и проводят тепло в опухолевые клетки, которые вследствие этого погибают.
В работе Chissov et all, 2005 для данной цели использовались наночастицы магнетита Fe3O4, покрытые оболочкой из декстрана, размером 200 нм.

Гистологический анализ опухоли:
А: УВЧ + МНЧ
1 - тромбоз капилляров
2 - отек интерстициальной соединительной ткани
3 – повреждение мышечных клеток
Б: УВЧ без МНЧ
Никаких признаков необратимых повреждений опухоли не обнаружено

и могут быть легко ресуспендированы
наночастицы химически инертны и могут долго

храниться в водных растворах, не ингибируют ферментативные реакции
широкие возможности для автоматизирования процессов выделения нуклеиновых кислот, белков, клеток

С помощью МНЧ можно проводить выделение различных биомолекул из смеси в лабораторных условиях. МНЧ с необ-ходимыми химическими группами на поверхности связываются с опреде-ленными молекулами, после чего такие МНЧ собираются сильным постоянным магнитом.