Слайд 1Матричные биосинтезы
Репликация
Транскрипция
Трансляция
Слайд 2Репликация – это удвоение ДНК,
(от поздлатин. replicatio - повторение)
Репликация обеспечивает точное копирование генетической информации, заключенной в молекулах ДНК
Биологическое
значение – передача генетической информации от поколения к поколению
Репликация происходит в S фазе в клетке, готовящейся к делению
Слайд 3Для человека характерен только ПОЛУКОНСЕРВАТИВНЫЙ путь РЕПЛИКАЦИИ ДНК.
При полуконсервативной
репликации полученные молекулы состоят из родительской («старой») и вновь синтезированной
(«новой») цепей.
Синтез новой цепи ДНК осуществляется всегда в направлении 5'-3'
По одной матричной цепи идет непрерывный синтез – это «лидирующая» цепь
По комплементарной цепи - это «запаздывающая» цепь, синтез осуществляется участками. Эти участки называют фрагментами Оказаки.
Слайд 4Инициация
ДНК-топоизомераза I разрывает фосфоэфирную связь в одной из цепей ДНК
Образуются
репликативные вилки (пузыри) одновременно в нескольких сайтах, которые называются
ГЕЛИКАЗЫ
расплетают цепи ДНК, они используют энергию АТФ в процессе разрыва водородных связей.
биосинтез ПРАЙМЕРА – коротких последовательностей РНК, их называют ЗАТРАВКАМИ осуществляет фермент РНК-полимераза или ПРАЙМАЗА
Слайд 5Элонгация
Элонгация – удлинение цепи ДНК
Фермент – ДНК-полимераза α
Необходимым условием функционирования
ДНК-полимераз является наличие затравки
Субстраты – dАТФ, dГТФ, dЦТФ, dТТФ
Слайд 8Терминация
Завершение репликации
Теломеразы – ферменты, участвующие в биосинтезе теломер –
синтез цепи ДНК от 31 к 51
Теломера – специфическая
нуклеотидная последовательность с многочисленными повторами -GGGTTA- называются
Слайд 9Репарация ДНК
Частота возникновения ошибок при репликации и транскрипции НЕ ПРЕВЫШАЕТ
10-8-10-9, то есть возможна лишь одна ошибка на сотни миллионов
нуклеотидов.
Белки mut S, mut L, mut H распознают и разрывают фосфоэфирную связь
Экзонуклеаза удаляет некомплементарные нуклеотиды
ДНК-полимераза β восстанавливает цепь
ДНК-лигаза соединяет вновь ситезированный фрагмент
Слайд 11ТРАНСКРИПЦИЯ
Транскрипция- синтез молекул РНК на основании информации, записанной в
ДНК
Осуществляется в ядрах при участии ДНК-зависимых РНК-полимераз I, II и
III.
РНК-полимеразы I синтезируют рибосомальные РНК
РНК-полимеразы II синтезируют матричные и вирусные РНК.
РНК-полимеразы III синтезируют транспортные РНК.
Слайд 13Инициация транскрипции у эукариот
Инициация – присоединение ТАТА-фактора к промотору
Белок ТАТА-фактор
облегчает взаимодействие промотора с РНК-полимеразой
Образование транскрипционной вилки
Для любого
гена, кодирующего белок, есть энхансеры (усилители) и сайленсеры.
Слайд 14Кепирование
"Сар" представляет собой метилированный ГТФ, присоединенный в необычной позиции 5'-5'
и две метилированные рибозы в первых двух нуклеотидах mРНК. По
мере образования про-mРНК (еще до 30-ого нуклеотида), к 5'-концу, несущему пуринтрифосфат, присоединяется гуанин, после чего происходит метилирование.
Слайд 15Элонгация транскрипции
Фермент РНК-полимераза осуществляет синтез мРНК от 51 к 31
Факторы
элонгации
Слайд 16Терминация
Синтез м РНК завершается в сайтах терминации
Фактор терминации облегчает отделение
пре-мРНК
Слайд 17Полиаденилирование
Когда синтез пре-mРНК завершен, то на расстоянии примерно 20
нуклеотидов в направлении к 3' - концу от последовательности 5'-AAУAA-3'
происходит разрезание специфической эндонуклеазой и к новому 3'-концу присоединяется от 30 до 300 остатков АМФ (безматричный синтез).
Каждый вид mРНК имеет "поли-А хвост" определенной длины. Он защищает 3'-конец от гидролиза, т.к. покрыт полиА-связывающими белками.
Слайд 18Процессинг или созревание пре-мРНК
Сплайсинг - вырезание копий интронов из пре-мРНК
и сшивание копий экзонов с образованием мРНК. При этом образуются
сплайсомы – рибонуклепротеидные комплексы
Сплайсинг
от англ. to splace - сшивать без узлов).
Слайд 19Lac-оперон E. coli содержит регуляторные
и структурные гены (цистроны).
Z -β- галактозидаза (расщепляет лактозу на глюкозу и галактозу).
Y-
β- галактозидпермеаза (переносит лактозу через мембрану клетки).
А - тиогалактозидтрансацетилаза (ацетилирует галактозу).
Слайд 20Генетический код - это система записи информации о последовательности расположения
аминокислот в белках с помощью последовательности расположения нуклеотидов в ДНК
Ген- это участок ДНК, кодирующий одну полипептидную цепь или одну молекулу tРНК, rРНК или sРНК.
Слайд 21Присоединение аминокислоты к тРНК - аминоацилирование
Фермент аминоацил-тРНК-синтетаза
С формилметионина начинается
синтез
любого полипептида у прокариот.
Слайд 23
ТРАНСЛЯЦИЯ
К малой субъединице, на которой уже находится mРНК, подходит формилметиониновая
тРНК, соединенная с формилметионином. В результате образуется инициаторный комплекс. При
элонгация рибосома «передвигается на 1 кодон
Слайд 24Взаимосвязь между нуклеиновыми кислотами и белками
Слайд 26Рис. 2. Представление пептидных фрагментов антигенов
опухолевой клетки в комплексе
с молекулами HLA I класса
А Б
Слайд 27Рис. 3. Наномерный пептидный фрагмент опухолевого антигена
в комплексе с молекулой
HLA I класса, А (вид сбоку), Б (вид сверху
Слайд 28Теломераза
В организме здорового человека есть клетки, которые могут делиться бесконечное
количество раз и не подвержены старению. Это стволовые клетки, активированные
лимфоциты, базальные клетки эпидермиса, мужские и женские половые клетки. В них активна теломераза, которая восстанавливает первоначальную длину теломер. Такие клетки способны к бесконечному делению. Элонгация (восстановление) теломерных повторов ДНК в клетках с активной теломеразой приводит к отмене ограничений на число делений, и такие клетки приобретают бессмертие. Это явление называется «иммортализация».
Слайд 29В 1932 году генетик, Нобелевский лауреат Герман Мёллер обратил внимание
на особое поведение концевых участков хромосом, которые предотвращали склеивание одних
хромосом с другими. Он назвал их "теломерами", что в переводе с греческого означает "концевые частички".
После завершения синтеза копий ДНК происходит удаление РНК-праймеров, и дочерние цепи ДНК оказываются недореплицированными, то есть короче материнских на размер РНК-праймера (100-200 нуклеотидов), чем и обусловлено старение организма.
Прогрессивное укорочение теломер является счетно-ограничительным механизмом митотических циклов и играет роль часов, отсчитывающих число делений клетки и продолжительность жизни. При каждом делении теломеры дочерних клеток становятся короче на 100-200 нуклеотидов.
Слайд 30По достижении критической длины теломерной ДНК запускаются процессы остановки клеточного
цикла. В 1965 году это впервые установил американский ученый Л.
Хейфлик из Института Вистар в Филадельфии. Фибробласты и эпителиальные клетки человека, в культурах in vitro, после 50-60 делений (так называемое "число Хейфлика") необратимо останавливались в G1- или G2-фазах клеточного цикла. Это состояние получило название сенессенса или "репликативного старения", оно обусловлено исчезновением теломер и образованием "липких" концов хромосом, что вызывает их соединение и запуск реакций разрушения ДНК, в результате чего клетка утрачивает способность к репродукции и погибает.
Слайд 31При злокачественном перерождении клеток также происходит отмена ограничений на число
делений клетки, благодаря активации гена теломеразы, и эти клетки становятся
бессмертными. Сочетание активной теломеразы и угнетение апоптоза в опухолевой клетке приводит к трагическим последствиям для организма, который погибает от безудержного роста злокачественной опухоли.
Теломераза – фермент, состоящий из белковой части и РНК, – был обнаружен Грейдером и Блэкберном в 1985 году. У человека hTERT (Homo sapiens telomerase reverse transcriptase) достраивает недореплицированные 3'-концы теломер ДНК короткими повторяющимися последовательностями TTAGGG. Главной функцией теломер является защита концов хромосом от деградации и слипания во время клеточного деления. Длина теломер колеблется от 5 до 15 тысяч пар оснований. Именно выступающие 3'-концы материнских хромосом узнаются теломеразой, которая последовательно наращивает материнские цепи на сотни повторов, используя их 3'-ОН концы в качестве праймеров, а РНК, входящую в состав фермента, в качестве матрицы. Образующиеся длинные одноцепочечные концы в свою очередь служат матрицами для синтеза дочерних цепей традиционным репликативным механизмом.