Метод изучения соматических клеток

д.м.н.проф. КарединаВ.С.

клеток
Биохимический метод
Молекулярно – генетические
Метод приемных детей
Антропометрический
Дерматоглифика

генетической информации, дает возможность изучать на них генетические закономерности всего

организма.
Основу метода составляет культивирование отдельных соматических клеток человека и получение из них клонов, а так же их гибридизацию и селекцию.

и дают генетически однородное потомство;
клоны могут сливаться и давать гибридное

потомство;
легко подвергаются селекции на специальных питательных средах;
клетки человека хорошо и долго сохраняются при замораживании.;

мозга, крови, ткани эмбрионов. Однако чаще всего используют клетки соединительной

ткани (фибробласты) и лимфоциты крови.

С помощью метода гибридизации соматических клеток:
а) изучают метаболические процессы в клетке;
б) выявляют локализацию генов в хромосомах;
в) исследуют генные мутации;
г) изучают мутагенную и канцерогенную
активность химических веществ.

линий могут сливаться, образуя гибриды, содержащие геномы обеих родительских форм.

Первые такие гибриды были получены при слиянии клеток разных линий мышей. Наряду с внутривидовыми получены и межвидовые гибриды, например, между клетками человека и мыши, мыши и хомячка, мыши и курицы и др. Образование гибридных клеток происходит чаще, если в культуру добавлены некоторые вещества (например, полиэтиленгликоль) или инактивированный вирус Сендай.

клетки, которые содержат оба родительских ядра. Затем в результате митоза

и деления образу­ются две одноядерные клетки — синкарионы, имеющие хромосомы обоих родительских клеток.
В течение первых делений гибридной клетки, не ясно почему, происходит потеря хромосом одного из видов. Так, у гибридов мышь-хомячок элиминируются хромосомы мыши.

наличием определенной хромосомы в гибриде, то можно предположить, что этот

ген локализован в данной хромосоме.

Какая
хромосома человека сохранится — предуга-дать невозможно. Через определенное число поколений

в гибридной клетке сохранятся все хромосомы мыши и несколько (в среднем 7) хромосом человека. Однако некоторые клетки могут содержать одну - две пары хромосом, другие — 7, а некоторые — до 20 хромосом человека. Вместе с тем из всей популяции гибридных клеток можно отобрать стабильные клоны (клон — потомство одной клетки), содержащие конкретные человеческие хромосомы, и провести в них картирование генов.

от человека и 20 от мыши. В дальнейшем происходит элиминация

хромосом того вида, клетки которого медленнее размножаются. При этом хромосомы мыши сохраняются, а хромосомы человека утрачиваются.

мыши и человека отличаются. Нетрудно определить, какие хромосомы присутствуют в

гибриде и выяснить, синтез каких белков связан с данными хромосомами человека. Обычно гибридные клетки теряют хромосомы целиком, поэтому, если какие-либо гены присутствуют или отсутствуют вместе, то они могут быть отнесены к одной хромосоме.

используют "хромосомные перестройки, что дает возможность установить локализацию генов в

определенном участке хромосомы, определить последовательность их расположения, т. е. построить карты хромосом человека.

в 1-й аутосоме — 24 гена. Ген, определяющий группы крови

по системе АВО, расположен в 9-й хромосоме, группы крови по системе МN во 2-й хромосо­ме, а по системе резус- фактора (Rh) — в 1-й хромосоме.
Использование метода гибридизации соматических клеток дает возможность изучать механизмы первичного действия генов и их взаимодействия, что расширяет возможности точной диагностики наследственных болезней на биохимическом уровне.

обнаружить в геноме человека сверхизменчивые участки ДНК (минисателлиты), характерные для

каждого человека. Одновременно были выделены последовательности ДНК, изменяю­щиеся с повышенной частотой. Они локализованы по всему геному и имеют разное число копий. На основе сверхизменчивых последовательностей ДНК созданы маркеры или зонды ДНК.

специальным образом. Маркеры "узнают" сходные с ними сверхизменчивые участки на

ДНК и присоединяются к ним. Эти участки становятся радиоактивными и их можно выявить методом радиоавтографии. Число и распределение таких мест присоединения индивидуально у каждого человека.

хромосоме. Так, недавно ученые установили, что ген гиперкератоза (патологическое утолщение

кожных покровов и образование язв на коже) человека лежит — в 17-й хромосоме, а ген болезни Альцгеймера (старческое слабоумие) — в 21-й хромосоме.

диабета, шизофрении и ряда других заболеваний.
Исследование сверх изменчивых

ДНК в клетках опухолей позволяет обнаружить перестройки хромосом на ранних стадиях развития опухоли, что важно для их ранней диагностики.
В последние годы созданы более совершенные генетические карты генома человека с использованием маркерных генов и последних достижений молекулярной генетики.