Слайд 1Потенциал действия аксона, его фазы и ионная природа
Слайд 2Изменение мембранного потенциала клетки при действии электрического тока различной силы
Действие допорогового стимула
Действие порогового стимула
Действие подпорогового стимула
Слайд 3ПОТЕНЦИАЛ ДЕЙСТВИЯ В КЛЕТКАХ РАЗНЫХ ТКАНЕЙ
а
б в
а – гигантский аксон кальмара; б – скелетное мышечное волокно; в – волокно мышцы сердца собаки
Слайд 4ХАРАКТЕРИСТИКИ ПОТЕНЦИАЛА ДЕЙСТВИЯ КЛЕТОК РАЗНЫХ ТКАНЕЙ
Длительность потенциала действия:
0,5
- 1 мс (нервные клетки)
несколько мс ( клетки
скелетных мышц)
сотни мс (кардиомиоциты).
Общая амплитуда - 100 - 120мВ,
Овершут - около 30-50мВ.
Слайд 5Изменение мембранного потенциала
Д – фаза деполяризации,
РБ – фаза быстрой
реполяризации,
РМ – фаза медленной реполяризации,
Г – фаза гиперполяризации.
Слайд 6ИЗМЕНЕНИЕ ИОННОЙ ПРОНИЦАЕМОСТИ ВО ВРЕМЯ РАЗВИТИЯ ПОТЕНЦИАЛА ДЕЙСТВИЯ
ПП PK: PNa:
PCl=1:0,04:0,45
ПД PK: PNa: PCl= 1:20:0,45
Слайд 7Изменение проницаемости мембраны для ионов натрия и калия во время
потенциала действия
Слайд 8ВЛИЯНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ИОНОВ НАТРИЯ НА АМПЛИТУДУ ПД
Слайд 12РЕГЕНЕРАТИВНЫЕ СВЯЗИ МЕЖДУ ДЕПОЛЯРИЗАЦИЕЙ МЕМБРАНЫ, УВЕЛИЧЕНИЕМ НАТРИЕВОЙ ПРОНИЦАЕМОСТИ И И
ВХОДЯЩИМ ТОКОМ ИОНОВ НАТРИЯ
Слайд 13Воротные механизмы потенциалозависимых ионных каналов
Слайд 15Изменение состояния натриевых и калиевых каналов мембраны в зависимости от
величины мембранного потенциала
Слайд 16Cостояниe ионных каналов
в фазу реполяризации ПД
Слайд 20Схема работы ворот потенциалозависимых натриевых каналов нервной мембраны
а -
зависимость процента открытых инактивационных (h) и активационных (m) ворот от
мембранного потенциала, б - схематическое изображение положений m и h - ворот при покое (1), развитии пика ПД (2) и в рефрактерной фазе (3).
Слайд 22Методика фиксации мембранного потенциала (МП) и регистрации трансмембранных токов (Iм)
Ус
— усилитель, реагирующий выходным током на разность между задаваемым «извне»
потенциалом Е и МП. В силу конструкции системы ток I этого усилителя, проходя через сопротивление мембраны (Rм) изменяет МП так, что достигается равенство между МП и Е. При достаточном коэффициенте усиления усилителя и быстродействии системы МП практически фиксируется на уровне Е. При снижении Е и вслед за ним МП до КУД или более в мембране нервного волокна (кальмара) открываются потенциалозависимые натриевые и калиевые каналы, что порождает трансмембранные токи, которые и регистрируются на фоне поддерживаемого сниженного МП.
Слайд 24
ОБЩИЙ МЕМБРАННЫЙ ТОК Im
i
Емкостной Общий ионный ток
ток
Слайд 25Ионные токи, зарегистрированные методом фиксации потенциала
А - ток, протекающий через
мембрану (синяя кривая) при смещении потенциала до 0 мВ относительно
поддерживаемого потенциала, равного -60 мВ (поддерживаемый и стимулирующий ток выделен красным цветом). Б - разделение мембранного тока (Im) на калиевую и натриевую компоненты: 1 - аксон находится в физиологическом растворе, I = INa + IK; 2 - натрий заменен на холин, I = IK; 3 - разность между 1 и 2, I = INa.
Отклонение кривой вниз соответствует входящему току, а вверх соответствует выходящему току. Поддерживаемый потенциал мембраны клетки и его смещение обозначены красной кривой.
Слайд 26А - смещения мембранного потенциала во времени относительно поддерживаемого потенциала.
Б - ток через мембрану, регистрируемый одновременно со смещением потенциала.
Показаны только смещения потенциала в положительную область от уровня поддерживаемого потенциала, равного -60 мВ (например, потенциала покоя).
В - вольтамперные характеристики, полученные в результате экспериментов с фиксацией потенциала. По оси абсцисс - смещения мембранного потенциала относительно поддерживаемого потенциала (в данном случае потенциала покоя); по оси ординат - изменения входящего Na+-тока (фиолетовая кривая) и выходящего К+-тока (коричневая кривая)
Фиксация потенциала на гигантском аксоне кальмара
Слайд 27Избирательное блокирование натриевых и калиевых каналов с помощью тетродотоксина и
тетраэтиламмония
Слайд 28МЕТОД patch-clamp и его конфигурации для измерения токов через одиночные
каналы
Слайд 29Na+-ток через одиночный Na+-канал в мышечной клетке мыши. А -
Регистрация методом patch-clamp в конфигурации cell-attached одиночных ионных каналов при
смещениях мембранного потенциала от -80 до -40 мВ. Открытое состояние Na+-каналов представлено в виде смещения нулевой линии вниз, т.е. через канал течет входящий Na+-ток.
Б - Регистрация методом patch-clamp в конфигурации outside-out одиночных ионных каналов при смещениях мембранного потенциала от -100 до -40 мВ
Слайд 30А - Na+-токи, зарегистрированные у разных электровозбудимых клеток
Б - Na+-токи,
зарегистрированные при разных ступеньках относительно поддерживаемого потенциала. Величина поддерживаемого потенциала
Eh равна -90 мВ. Величины ступенек тестирующих потенциалов указаны на рисунке.
В - вольтамперные характеристики, построенные по пиковым значениям (о) и по стационарным значениям (∆)Na+-токов.
Na+-токи, зарегистрированные в конфигурации whole-cell у электровозбудимых клеток при различных величинах смещения мембранного потенциала относительно поддерживаемого потенциала. K+-каналы были ингибированы Cs, тетраэтиламмонием или 4-аминопиридином.
Слайд 31ФОРМАЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ ИОННЫХ ТОКОВ (МОДЕЛЬ ХОДЖКИНА - ХАКСЛИ)
Слайд 32Ионный ток (Ii) складывается из суммы натриевого (INa) калиевого (IK)
и тока утечки (IL):
Каждый из токов рассчитывается по закону
Ома:
i
Слайд 33где:
gNa, gK и gL – проводимости для ионов натрия,
калия и ионов утечки, соответственно
(V-V(Na,K,L)) – величины электрохимических потенциалов для
соответствующих ионов,
V – является отклонением от абсолютных значений мембранного потенциала Е,
V(Na,K,L) – равновесные потенциалы, рассчитанные по уравнению Нернста
Слайд 34УРАВНЕНИЯ ХОДЖКИНА - ХАКСЛИ
gNa, gK – максимальные проводимости мембраны при
сильной деполяризации
Слайд 35Величины m, h и n рассчитываются из системы дифференциальных уравнений:
Слайд 36Величины αm, βm, αn, βn, αh, βh – константы скоростей,
зависящие от мембранного потенциала, температуры и концентрации двухвалентных ионов в
наружном растворе.
При деполяризации мембраны значения αm, αn и βh увеличиваются, а βm, βn и αh- уменьшаются.
Слайд 37
Решения этих уравнений проще представить в виде экспоненциальных характеристик –
постоянных времени изменения m, n и h:
Стационарные значения переменных m,
n и h:
Слайд 38Графики зависимости стационарных значений m, n и h (m∞, n∞
и h∞) и постоянных времени τm,τn и τh от мембранного
потенциала
Слайд 40Сравнение рассчитанного потенциала действия (В1) с реальным потенциалом действия, зарегистрированным
в гигантском аксоне кальмара (В2). Рассчитанная скорость проведения потенциала действия
составляла 18,8 м/с, а полученная в эксперименте - 21,2 м/с
В1
В2
Слайд 41Электрические параметры нервных волокон
Слайд 42
Если С=0,8мкФ/см2, ε = 2, то d=2,2 нм
Удельное сопротивление аксоплазмы
и саркоплазмы от 30 до 200 Ом·см;
Электрическая емкость различных клеток
около 1мкФ/см2
Электрическая емкость чистого бислоя липидов 0,8мкФ/см2
С – электрическая емкость,
- диэлектрическая проницаемость изолирующей части бислоя,
ε0 – электрическая постоянная,
S - площадь
Слайд 43КАБЕЛЬНАЯ СТРУКТУРА
Cm емкость мембраны
rm сопротивление мембраны
ri – сопротивление аксоплазмы
Слайд 44Согласно закону Ома ток, текущий по осевому цилиндру:
i – ток,
текущий по осевому цилиндру, х – расстояние от источника тока,
ri – сопротивление аксоплазмы
(1)
Слайд 46Ток через мембрану
Исходя из 1 и 2
(3)
(4)
Слайд 47Мембранный ток складывается из двух компонентов:
(5)
Слайд 48
Далее из 4 и 5 получаем
Умножим обе части на rm
(6)
(7)
Слайд 51Решением этого уравнения является экспоненциальная зависимость:
Где τ– постоянная времени, показывающая
через сколько времени амплитуда мембранного потенциала падает в e раз
.
РЕШЕНИЯ КАБЕЛЬНОГО УРАВНЕНИЯ
Слайд 52Если продолжительность прямоугольного толчка тока превышает 3τ, V достигает постоянного
уровня, в этом случае
Уравнение примет вид
Слайд 54Сопротивление мембраны (rm) рассчитывается через удельное сопротивление (Rm):
где Rm=1-100 кОм·см2,
в перехватах Ранвье: 30-40 Ом·см2
Сопротивление аксоплазмы (ri) рассчитывается через удельное
сопротивление (Ri):
где Ri=40 Ом·см2
Слайд 55λ– постоянная длины, показывающая на каком расстоянии амплитуда мембранного потенциала
падает в e раз.
с учетом сопротивлений мембраны и
аксоплазмы (Rm и Ri):
где D – диаметр нервного волокна
Слайд 56Б1
Б2
Б3
ПОСТОЯННАЯ ВРЕМЕНИ τ ПОСТОЯННАЯ
ДЛИНЫ λ
Слайд 57Распространение пассивного электротонического потенциала на примере немиелинизированного волокна.
Na канал обозначен
розовым цветом
К канал – желтым цветом
Канал утечки обозначен коричневым цветом
Слайд 58Типы нервных волокон
А - миелиновое волокно,
Б - безмиелиновое волокно.
1
- осевой цилиндр,
2 - миелиновый слой,
3 - мезаксон,
4 - ядро нейролеммоцита (шванновской клетки),
5 - узловой перехват (перехват Ранвье).
Электрические характеристики миелина
R = 0,16 МОм • см, С = 0,005 мкФ/см.
Слайд 59Распространение потенциала действия на примере немиелинизированного волокна.
Na каналы обозначены розовым
цветом
К каналы – желтым цветом
Канал утечки обозначен коричневым цветом
Слайд 60Механизм проведения потенциала действия в немиелинизированном волокне.
Слайд 61Механизм распространения возбуждения по безмиелиновому нервному волокну
Слайд 62Изменение мембранного потенциала и натриевой и калиевой проводимости мембраны вдоль
кабельной структуры во время распространяющегося ПД, а также токи, текущие
через различные участки мембраны.
Слайд 64Механизм проведения потенциала действия в миелинизированном волокне.
Слайд 65Механизм распространения возбуждения по миелиновому нервному волокну
Слайд 68Сравнение общих принципов проведения возбуждения по немиелинизированному и миелинизированному нервному
волокну