Введение в клиническую биохимию

Санэпид режим

в данной тест-системе от общего количества исследованных больных. Оценивается по

выборке сывороток крови, взятых от больных, которым достоверно поставлен диагноз.

данной тест-ситеме, от общего количества обследованных здоровых людей. Оценивается по

выборке сывороток крови здоровых людей.

тестировании одного и того же пациента.

можно по скорости реакции оценивать активность фермента, Б - скорость

реакции постоянно снижается, рекомендуется активность фермента оценивать по начальной скорости, В - линейный участок, на котором рекомендуется определять активность фермента, устанавливается в середине периода инкубации

точного поддержания температуры в измерительной кювете и правильного отсчета временных

интервалов. Так, общепринятым считается поддержание температуры в измерительной ячейке в пределах  0,1 оС

качества и внешней оценки качества и подвергаемый измерению в соответствии

с той процедурой измерения, что и проба с неизвестным содержанием.

в лаборатории параметрам;
доступность в большом количестве (закупка производится на год

минимум)
хорошая растворимость, если лиофилизирован
высокая стабильность веществ, содержащихся в КМ, до и после разведения;
произведен на основе человеческого матрикса или матрикса, близкого к человеческому;
удобство и простата в повседневном использовании.

флакона или растворения лиофилизированной формы материала
-тип матрицы контрольного материала
-разрешается

использовать только КМ, предварительно проверенный относительно допусков по гомогенности, стабильности, вариабельности, разлива, растворения, а также отсутствия инфицированности
-при выборе коммерческих КМ важно обратить внимание на стабильность по содержанию различных компонентов в данном материале
Для экономного использования жидкого КМ допускается разлить содержимое флакона в пробирки с герметическими крышками
При использовании реактивов и калибраторов одного производителя рекомендуется проверять характеристики аналитическй системы с помощью аттестованного КМ другого производителя.

содержанием вещества.

каждого вещества, методов и наборов реактивов. Они используются для определения

правильности. К ним должны предъявляться требования наравне со стандартными образцами (ГОСТ 14263-69),

КМ с неизвестным содержанием компонентов (неаттестованные) используются для контроля воспроизводимости. Для этих материалов известен лишь их грубый диапазон (норма, патология).

которых исследована многими методами.
Специальные КС предназначены для контроля качества при

определении:
показателей, исследуемых с определенной диагностической целью, например для диагностики анемий, повреждений сердечной мышцы, опухолей и т.д.
отдельных компонентов: С-реактивного белка, ревматоидного фактора, гормонов, газов крови и др.
компонентов, определяемых при терапевтическом мониторинге лекарств, в том числе, методами тонкослойной и высокоразрешающей газожидкостной хроматографии
компонентов, исследуемых методом сухой химии

растворителя
-потеря вещества лиофилизированной пробы при небрежном открывании флаконов;
-недостаточное выдерживание времени,

необходимого для полного растворения сыворотки;
-сильное встряхивание или перегревание при растворении сыворотки;
-несоблюдение периода стабильности после растворения сыворотки;
-несоблюдение условий хранения растворенного контрольного материала.

(суспензия)
Другие материалы, имитирующие клетки крови
Контрольные мазки (окрашенные и неокрашенные, нормальные

и патологические)

содержанием компонентов, а также применяют искусственные контрольные растворы, специально приготовленные

путем растворения в дистиллированной воде требуемых веществ.

20 человек)
Контрольная человеческая плазма с точным содержанием факторов свертывания (н

и п)
Контрольная плазма с дефицитом индивидуальных факторов свертывания
Контрольная плазма для контроля верхней и нижней границ терапевтической области при приеме антикоагулянтов.
В качестве основного контрольного материала используют слитую (только цитратную), плазму

проба пациента со значением определяемого показателя в нормальном диапазоне.
Этапы: провести

10 измерений определяемого показателя в одном и том же материале в одной аналитической серии; рассчитать статистические значения; сравнить CV полученное с установленным

по величинам относительного смещения;
Определение контрольного предела и построения контрольных карт.

распределяют среди анализируемых проб пациентов
В каждой аналитической серии проводится по

одному измерению в каждом из двух контрольных материалов
Точки, контрольных измерений наносятся на соответствующие контрольные карты
Оценку результатов исследования проводят с использованием контрольных правил

включает проведение соответствующих мероприятий, как в клинико-диагностических отделениях, так и

в лабораторных под­разделениях. Современные крупные стационары располагают серьезной лабораторной базой, призванной в полной мере обеспечить врача любого профиля широким спектром диагностических исследований, В их структуре работают такие лаборатории, как клинико-гематологическая, биохимическая, инфекционной иммунологии, бактериологическая, радиоиммунохимическая, экспресс-диагностики и др. Строгое соблюдение сотрудниками лабораторных подразделений санитарно-противоэпидемического режи­ма и личной гигиены с учетом профиля работы призвано обеспечить профилактику внутрилабораторного заражения возбудителями инфекционных заболеваний, а также профессиональных заболеваний, связанных с вредным воздействием на организм диагностических препаратов и химических реактивов.

опасными материалами возлагается на заведующих подразделений. В целях предупреждения профессиональных

заболеваний, в т. ч. внутрибольничных и внутрилабораторных инфекций, а также производственного травматизма со всеми работниками лабораторий проводится инструктаж по безопасным приемам и методам работы, который подразделяется на вводный (при приеме на работу), первичный на рабочем месте и периодический (повторный).
Инструктаж медицинского персонала на рабочем месте и доведение положений данной инструкции и дополнения к ней проводится (под роспись) заведующими лабораторными подразделениями при приеме на работу и в дальнейшем не реже 1 раза в год. Проведение инструктажа должно быть зарегистрировано в специальном журнале.

учреждений
I. Общие положения
Настоящая Инструкция предназначена для медицинского и технического персонала

подразделений лабораторной диагностики лечебно-профилактических учреждений.
В каждом подразделении, связанном с лабораторной диагностикой, с учетом специфики его работы, особенностей размещения, противоэпидемического режима, наличия тех или иных факторов биологической опасности заведующими лабораториями разрабатываются необходимые дополнения к данной инструкции, согласованные с врачом-эпидемиологом ЛПУ, инженером по охране труда и технике безопасности.

от 14.03.96 № 90 и от 16.08.04 № 83 все лица,

принимаемые на работу в лаборатории и работающие в них, в обязательном порядке проходят необходимые медицинские осмотры, лабораторные и функциональные обследования.
Кроме того, все медицинские работники, по роду своей деятельности имеющие контакт с кровью или ее компонентами, обследуются (при приеме на работу и в дальнейшем 1 раз в год) на маркеры вирусных гепатитов В и С (НВs-антиген и анти-НСV), а также подвергаются (в период оформления на работу) обязатель­ной вакцинации против вирусного гепатита В.
5. Медицинский персонал лаборатории инфекционной иммунологии, проводящий исследования на ВИЧ-инфекцию, дополнительно обследуется на наличие антител к ВИЧ.

целях профилактики внутрилабораторного заражения возбудителями внутрибольничных инфекций должен строго соблюдать

определенные правила при работе с кровью или дру­гими биологическими жидкостями и материалами (взятии крови, аналитических манипуляциях с пробами биологического материала, обработке медицинского инструментария и лабораторной посуды, бывших в контакте с кровью и другими биологическими жидкостями). В частности, необходимо:
Работать в медицинских халатах, шапочках, сменной обуви, резиновых (латексных) перчатках, а при угрозе разбрызгивания крови или других биологи-­ ческих жидкостей - в масках, очках, клеенчатом (полиэтиленовом) фартуке. Все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем или напаль-­ чником. При работе следует быть предельно внимательным, аккуратным, соблю-­ дать меры предосторожности при выполнении манипуляций с режущими и колю­- щими инструментами, избегать уколов, порезов, разрывов перчаток, боя посуды.
Разборку, мойку, предстерилизационную очистку лабораторного инстру-­ ментария и посуды производить только после предварительной дезинфекции.

месте.
Запрещается пипетирование крови и других биологических жидкостей ртом.
Поверхность рабочих столов

и лабораторного оборудования подвергается дезинфекции в конце рабочего дня, а в случае загрязнения биологическим материалом - немедленно.
В случае аварии, связанной с проливом крови и других потенциально опасных биологических жидкостей, принимать меры, изложенные в специальном разделе.

перчатках, соблюдая правила асептики, двукратно тщательно обрабатывая перчатки 70% спиртом

перед каждой манипуляцией. Перед проколом кожи пальца стерильным скарификатором одноразового использования место прокола обрабатывается стерильным тампоном (шариком из ваты), смоченным 70% спиртом или другим спиртовым кожным антисептиком. После забора крови к месту прокола кожи прикладывается на 1-2 мин ватный шарик с 70% спиртом.
Стерильные тампоны хранятся в упаковке из крафт-бумаги в количестве 20-25 штук; стерильные инструменты - в той же упаковке, в которой проводи­лась их стерилизация. Многоразовый инструментарий (микропипетки, капилля­ры, скарификаторы и пр.) стерилизуют и хранят в бумажной упаковке в количес­тве 5-10 штук.
Срок использования стерильных материалов - 3 суток. На упаковках со стерильным материалом обязательно указывается дата стерилизации.

пальца несколько капель крови спускают на индивидуальное предметное стекло, перемешивают

и используют для работы.
2. Кровь набирают в индивидуальные стерильные капилляры объемом 20 мкл и капилляры Панченкова непосредственно с поверхности кожи пальца.
Кровь набирают стерильным индивидуальным капилляром Панченкова, смоченным цитратом в соотношении цитрата и крови 1: 4 по объему.
После прокола кожи пальца 6-8 капель крови спускают в пластиковую пробирку, в которую предварительно внесено небольшое (на кончике глазной лопаточки) количество препарата трилон Б. Кровь тщательно перемешивают, вращая пробирку между ладонями. Разлив крови пипетками осуществляется в лаборатории.

закрывающиеся резиновыми пробками, сопроводительную документацию помещают в упаковку, исключающую возможность

ее загрязнения материалом. Помещать бланки направлений внутрь пробирок с кровью или обворачивать ими пробирки запрещается.
2. Транспортировка материала осуществляется в закрытых контейнерах, подвергающихся дезинфекционной обработке.
3. При хранении потенциально инфицированных материалов в холодильнике необходимо поместить их в полиэтиленовый пакет. Размораживание холодильника совмещают с его дезинфекцией.

раствор дезинфектанта в специальных маркированных емкостях из стекла, пластмасс или

покрытых эмалью без повреждений. Емкости должны быть снабжены крышками, иметь четкие надписи с указанием названия средства, его концентрации, назначения, даты приготовления.
При дезинфекции изделий, имеющих внутренние каналы, растворы дезинфицирующего средства в объеме 5-10 мл пропускают через канал с помощью груши (шприца) для удаления остатков крови, сыворотки и других биологических жидкостей, после чего изделие полностью погружается в дезраствор.
Для дезинфекции используются разрешенные к применению в Российской Федерации дезинфицирующие средства отечественного и зарубежного производства.
Дезинфекцию изделий химическим методом традиционно осуществляют одним из разрешенных дезинфицирующих средств по режимам, обеспечивающим уничтожение вирусов гепатитов В, С, ВИЧ-инфекции или возбудителей других
инфекций (например, туберкулеза), если есть анамнестические данные о конкретном пациенте. Как правило, этап дезинфекции лабораторной посуды и изделий медицинского назначения совмещается с этапом предстерилизационной очистки (при необходимости), если впоследствии они подвергаются дальнейшей стерилизации.
После предстерилизационной очистки лабораторная посуда и инструментарии промываются проточной водопроводной водой, высушиваются и могут быть использованы повторно или (при необходимости) упаковываются и подвергаются стерилизации.

изделия медицинского назначения многократного применения, подлежащие последующей стерилизации. Предстерилизационную очистку

проводят механизированным (с помощью специального оборудования) или ручным способом.
При наличии у средства наряду с моющими также и антимикробных свойств предстерилизационная очистка может быть совмещена с дезинфекцией.
При применении растворов, содержащих перекись водорода с моющим средством, растворов моющих средств "Лотос", "Лотос-автомат", "Астра", "Маричка", "Прогресс", а также натрия двууглекислого неизмененный раствор можно использовать до 6 раз в течение рабочей смены с подогревом до 50 °С.
Контроль качества предстерилизационной очистки проводится в порядке самоконтроля не реже 1 раза в неделю; организует и контролирует его старший лаборант лаборатории. Контролю подвергают 1% одновременно обработанных изделий каждого наименования, но не менее 3 единиц.
Качество очистки изделий проверяется путем постановки азопирамовой пробы на наличие остаточных количеств крови и фенолфталеиновой пробы на наличие остаточных количеств щелочных компонентов моющих средств. Изделия, дающие положительную пробу на кровь или щелочные компоненты моющих средств, подвергаются повторной очистке до получения отрицательных результатов.
Результаты контроля отражают в соответствующем журнале.

других изделий ме­дицинского назначения, бактериологических питательных сред проводят с целью

уничтожения на них (в них) всех видов микроорганизмов, в т. ч. споровых форм.
Стерилизацию осуществляют физическими (паровой, воздушный) и химическими (газовый, растворами химических средств) методами.
При паровом методе стерилизации используется водяной насыщенный пар под избыточным давлением от 0,5 до 2,1 атм (температура 110-135 °С); стерилизацию осуществляют в паровых стерилизаторах (автоклавах).
При воздушном методе стерилизующим средством является сухой горячий воздух с температурой 160 и 180 °С; стерилизацию осуществляют в воздушных стерилизаторах (сухожаровых шкафах).
Воздушным методом стерилизуются изделия из металлов, стекла и резин на основе силиконового каучука (инструменты, лабораторная посуда и др.). При этом объекты стерилизации могут быть завернуты в специальные упаковочные материалы или стерилизоваться без упаковки. Изделия загружают в таком количестве, которое допускает свободную подачу воздуха к стерилизуемым объектам. Загрузку и выгрузку изделий проводят при температуре в камере 40-50 °С.
Время стерилизации:
~ при температуре 180 °С - 60 мин; ~ при температуре 160 °С - 150 мин.
Контроль работы воздушных стерилизаторов осуществляется при каждой стерилизации с помощью специальных термовременных индикаторов.
Результаты контроля работы паровых и воздушных стерилизаторов заносятся в журнал.

на диске из фильтровальной бу­маги или в инсулиновом флаконе) проводится

в плановом порядке работни­ками лаборатории при помощи санитарно-бактериологических исследований 2 раза в год.
Основанием для заключения об эффективной работе стерилизационной ап­паратуры является отсутствие роста тест-культуры при бактериологических ис­следованиях всех биотестов в сочетании с удовлетворительными результатами физического и химического контроля.

помещений должна осуществляться с применением моющих и дезинфицирующих средств не

менее 1 раза в сутки, а при необходимости чаще.
Для проведения текущих и генеральных уборок помещений необходимо иметь достаточное количество маркированного по назначению уборочного инвентаря: ведер для мытья полов и стен; емкостей для обработки предметов обстановки и поверхностей; швабр для мытья полов и стен.
3. Генеральные уборки функциональных помещений лабораторий проводятся в соответствии с утвержденным заведующими подразделений графиком -один раз в месяц, в стерильных боксах - еженедельно. График составляется на квартал или полугодие.

оборудования или отодвинуть их для обеспечения свободного доступа к обрабатываемым

поверхностям и объектам;
уборку начинать по направлению от окна к двери;
окна мыть теплой водой с добавлением 1 столовой ложки нашатырного спирта на 1 л воды;
стены обработать дезинфицирующим раствором с помощью ветоши и оставить на 60 мин;
пространство за отопительными батареями и внутри них обрабатывать последовательно двумя ершами, смоченными в дезрастворе;
влажной ветошью, смоченной дезинфицирующим раствором, протереть лабораторные столы, другую мебель, оборудование;
провести обеззараживание полов дезинфицирующим раствором {экспозиция 60 мин) с последующим их мытьем;
надеть стерильный халат и смыть дезраствор стерильной ветошью, смоченной водопроводной водой;
для обеззараживания воздуха включить на 60 мин ультрафиолетовый облучатель (установку обеззараживания воздуха "Поток").
Генеральную уборку санузлов, других подсобных помещений проводить не реже 1 раза в 10 дней.

затем промыть и просушить.
Для обеззараживания поверхностей помещения использовать один из

раз­ решенных в Российской Федерации дезинфицирующих препаратов в соответс- твующих режимах.
Примерный расход дезинфицирующих средств составляет: 100-150 мл ра­- бочего раствора на 1 м2 площади поверхностей стен, потолка, пола, мебели.
Растворы моющих и дезинфицирующих средств необходимо менять после уборки 60-80 м2 поверхности; в помещениях с режимом асептики (стерильный бокс) - после обработки не более чем 60 м2 площади.
Промаркированный уборочный инвентарь применять для уборки различных функциональных помещений лаборатории строго по предназначению и хра­- нить раздельно в установленных местах (шкафах). В каждом лабораторном под­- разделении должно быть как минимум 5-7 комплектов уборочного инвентаря: 1) для лабораторных комнат; 2) помещений для дезинфекции и предстерилизаци- онной обработки (моечных); 3) стерилизационных (при наличии); 4) стерильных боксов (при наличии); 5) для рабочих кабинетов врачей, старших лаборантов и комнат персонала; 6) гардеробов и коридоров; 7) санитарных узлов.
По окончании генеральной уборки старшим лаборантом делается отметка об ее проведении в специальном журнале (графике).

жидкостей)
Авария - это нештатная ситуация, при которой создается реальная или

потенциальная возможность попадания патогенного агента в воздух производственной зоны, окружающую среду или заражения персонала.
Для проведения дезинфекционной обработки на случай аварии при работе с потенциально заразными биоматериалами (кровью, сывороткой крови, мочой, микробными культурами и др.) на рабочих столах должны быть предусмотрены промаркированные емкости с рабочим дезинфицирующим раствором, а также запас марлевых салфеток.
В каждом лабораторном помещении (группе функционально объединенных лабораторных комнат) должны быть специальные аптечки для оказания первой медицинской помощи при аварийных ситуациях с соответствующей инструкцией.
1. При аварийных ситуациях, связанных с проливом крови и других биоматериалов, все участники немедленно прекращают работу и приступают к ликвидации аварии.
О происшествии немедленно докладывается начальнику подразделения.
Загрязненная одежда снимается и замачивается в дезинфицирующем растворе в специальной промаркированной емкости.
Для уборки надевается соответствующая защитная одежда и резиновые перчатки.

пола и предметов обстановки обрабатываются раствором дезинфектанта, а разбитая стеклянная

и полимерная посуда обильно заливается дезраствором не менее чем на 1 ч, после чего последние убираются с помощью специально выделенного уборочного инвентаря, а поверхности очищаются с помощью моющих средств; использованная при этом ветошь замачивается в специально выделенной емкости с дезраствором, маркированной "Для дезинфекции использованной ветоши".
Резиновые (латексные) перчатки после окончания работы обеззаражи­- ваются погружением в дезинфицирующий раствор (6% раствор перекиси водо рода на 1 ч или других дезинфицирующих средств) или кипячением в течение 30 мин.
По окончании уборки для обеззараживания воздуха включается на 60 мин УФ-облучатель (облучатель-рециркулятор воздуха типа "Дезар"; установка обеззараживания воздуха "Поток").

полного оседания частиц образовавшегося аэрозоля) и отключения от электросети необходимо:
неповрежденные

объекты (центрифужные пробирки и т. п.) изъять, обработать дезинфицирующим раствором и передать для продолжения необходимых технологических операций;
гнездо ротора вместе с осколками пробирки (флакона) залить дезраствором, а после экспозиции не менее 1 ч последние удалить и поместить в емкость с дезраствором дополнительно на 1 ч;
внутреннюю поверхность центрифуги, в т. ч. крышки, и ротор тщательно обработать дезраствором (экспозиция 1 ч).
Только после этого работа на центрифуге может быть продолжена.

снять их. Затем выдавить каплю крови из ранки, последнюю обработать

двукратно с интервалом 5 мин 70% спиртом (кожным антисептиком), смазать края ранки 5% спиртовой настойкой йода.
При загрязнении кожи рук кровью следует немедленно обработать их в течение 1 мин тампоном, смоченным кожным антисептиком, разрешенным к применению, вымыть руки двукратно теплой проточной водой с мылом и насухо вытереть индивидуальным полотенцем (салфеткой).
10. При попадании крови или других биологических жидкостей:
на слизистые глаз - их следует сразу же промыть 0,01% раствором марганцево­кислого калия, приготовленного ех tempore (навеска 0,05г растворяется в 0,5 л дистиллированной воды);
на слизистую носа - обработать 0,05% раствором марганцевокислого калия (навеска 0,25г растворяется в 0,5л дистиллированной воды);
на слизистую рта - прополоскать 70% спиртом или 0,05 % раствором марганцевокислого калия.

место, характер аварии,
фамилия, имя и отчество лиц, находившихся непосредственно

в зоне ее воздействия, а также проведенные мероприятия.
О происшедшей аварии и проведенных мероприятиях заведующий лабораторией докладывает главному врачу ЛПУ и председателю комиссии по контролю за соблюдением требований биологической безопасности.
За лицами, находившимися в помещении, где произошла авария, устанавливается медицинское наблюдение на срок инкубационного периода.

в т.ч. лабораторным
А) создан табель оснащения КДЛ
Б) из Федерального Фонда

выделены средства на закупку оборудования
В) проведен тендер на закупку 4 комплектов (ЛОТов) лабораторного оборудования
Г) на основании заявок с территорий составлен реестр распределения оборудования

тестов/час
Произвольный порядок выполнения 24 тестов
Работает на любых реагентах
Моющиеся долгосрочные кюветы
Выполняет

любые турбидиметрические методики

САПФИР – 400 (Япония)