Современные молекулярно-генетические методы диагностики

группа
медико-профилактический факультет

Mycobacterium tuberculosis. Обследованию подлежат больные с длительными хроническими процессами, с

выраженными клинико-лабораторными и рентгенологическими показаниями и рефракторные к неспецифической антибактериальной и/или другим методам терапии.

У здоровых людей инфицирование микобактериями туберкулеза часто не приводит к появлению каких-либо симптомов, так как иммунная система человека способна противостоять МБТ
Симптомы активной формы ТБ:
кашель иногда с мокротой или кровью
боли в груди
слабость
потеря веса
повышенная температура и ночной пот.

Туберкулез можно излечить при проведении шестимесячного курса антибиотиков.

микроскопии
светодиодная (LED) микроскопия.
Культуральные методы
на плотных средах
на жидких средах
Молекулярно-генетические методы
выявление ДНК

МБТ
методы идентификации
молекулярно-генетические методы определения ЛУ
гибридизационные технологии
мультикомплексная ПЦР в режиме реального времени
картриджная технология

Наиболее распространенные методы диагностики:

настоящее время, однако они трудоемки и длительны, поэтому для более

быстрой и достоверной диагностики используют молекулярно-генетические методы.

плевральная жидкости)
Одновременное осуществление скрининга на M. Tuberculosis и рифампицин-резистентность
Результаты теста

выдаются через 2 часа и предоставляются в графическом, табличном и цифровом форматах
Результаты каждого модуля отражаются в реальном времени

95%) и специфичность (более 95%) для образцов макроты КУБ +

и КУБ-
полная автоматизация
безопасность
диагностика туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью
НЕДОСТАТКИ:
возможность определения устойчивости возбудителя только к одному противотуберкулезному препарату рифампицину, что предопределяет необходимость дальнейших исследований для диагностирования мультирезистентности
возможность использования только нативной мокроты и концентрированных ее образцов, высокая стоимость исследований

получение результатов (через 4-5 часов)
Высокая чувствительность (≥ 97%) и

специфичность (≥ 99%)
Автоматизация проведения исследований

рифампицину, что дает возможность выявить наличие мутаций в участке гена

rpoB

Тест система используются только в лабораториях для микробиологической диагностики туберкулеза III уровня, она предназначена для диагностики туберкулеза с идентификацией микобактерий и определением чувствительности к :

рифампицину
изониазиду
фторхинолонам,
аминогликозидам/циклическим пептидам
этамбутолу

Высокая производительность
· Быстрое

время выполнения (3-4 дня)
· Дешевле фенотипических исследований
· Системы открытые и адаптивные по мере появления новых данных

ОГРАНИЧЕНИЯ:

· Неполные данные по мутациям к новым ПТП
· Не до конца понятна роль гетерогенной устойчивости
· Важность эффлюксных насосов и компенсаторных механизмов остается неясной

(клиническая диагностика)
Быстрая и точная диагностика с использованием энциклопедии градаций

и мутаций
Полный профиль устойчивости в одном тесте

2. Полногеномное секвенирование (наблюдение/передача)
Выявление новых мутаций с появлением новых штаммов
Изучение роли эффлюсных насосов
Понимание компенсаторных механизмов устойчивости
Оценка передачи

устойчивости M/Tuberculosis, определенной молекулярно-генетическоими и фенотипическими методами/ В.Н. Бондаренко, В.А.

Штанзе , Л.В. Золотухина – Гомель, 2018.
Госманов Р.Г, Галиуллин А.К., Волков А.Х., Ибрагимова А.И. Микробиология. Учебник для студентов медицинских ВУЗов/ З,Г, Госманов, А.К. Галиуллин, А.Х. Волков, А.И. Ибрагимова – издание второе, стереотипное- Санкт-Петербург, Москва, Краснодар, 2017.
Структура и алгоритмы новейших молекулярно-генетических технологий экспресс диагностики туберкулеза и лекарственной устойчивости в Республике Казахстан: Методические рекомендации /А.Х.Аленова, Т.Ш.Абилдаев, Ж.Ш.Жумадилов и др.- Алматы, 2013.
Федеральные клинические рекомендации по организации и проведению микробиологической и молекулярно-генетической диагностики туберкулеза/ Л.НЧерноусова, Э.В. Севастьянова, Е.Е. Ларионова и др. – Москва, 2014.